Phần 2: Dược lý mạng tích hợp và mô hình cá ngựa vằn để điều tra các thành phần tác dụng kép của Cistanche Tubulosa để điều trị cả bệnh loãng xương và bệnh Alzheimer
Mar 30, 2022
Tiếp xúc:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
BẤM VÀO ĐÂY ĐỂ XEM PHẦN 1
3. Kết quả
3.1 Hợp chất ứng viên và PoMục tiêu thông tin
Trong nghiên cứu các thành phần hóa học CT, tổng số 75 thành phần đã được thu được từ TCMSP. Sau đó, PCA được tiến hành để hình dung sự phân bố hóa học của CT. Như trong Hình 1, các thành phần của CT là đa biến trong không gian hóa học, và 28 trong số chúng thỏa mãn quy tắc 5 của Lipinski (Lipinski, 2003). Điều thú vị là có nhiều phần trùng lặp giữa các thành phần của CT và các loại thuốc phân tử nhỏ đã được phê duyệt cho OP / AD. Nó chứng minh rằng nhiều hợp chất trong CT có khả năng gây nghiện tiềm năng trên OP / AD. Để đánh giá thêm khả năng gây nghiện của chúng, 43 hợp chất đã được DL sàng lọc. Sau khi dự đoán mục tiêu, 26 hợp chất ứng cử viên đã được chọn để phân tích tiếp theo. Và chúng có thể được gắn với tổng số 847 protein mục tiêu.
cistamchecó tác dụng chống bệnh Alzheimer.
Các mục gen liên quan đến OP hoặc AD được thu thập từ cơ sở dữ liệu DisGeNET và GeneCards. Kết quả là, 3052 và 8042 mục gen lần lượt được thu thập. Chúng tôi đã sử dụng hai điểm số từ cơ sở dữ liệu DisGeNET và GeneCards làm điểm đánh giá, sàng lọc phần năm mục tiêu hàng đầu. Tỷ lệ 1/5 được quyết định bởi các thí nghiệm trước. Sau đó, 211 mục tiêu chung OP-ED được bảo toàn để phù hợp với mục tiêu của 26 hợp chất ứng cử viên. Cuối cùng, tổng số 81 mục tiêu protein (Bảng bổ sung S2) kết nối với 22 hợp chất ứng cử viên (Bảng bổ sung S3) đã được chọn cho các cơ chế phân tử của phân tích hoạt động, tạo thành mạng lưới tương tác protein-protein (PPI) được thể hiện trong Hình 2.
22 hợp chất được chia thành 11 loại: 5 phenylethanoid glycoside (PhGs) (Decaffeoylacteoside, Cistanoside E, v.v.), 3 phenylacryl oligosaccharides (Cistanoside H, Cistanoside F, v.v.), 3 iridoid và iridoid glycoside (Leonuride, Geniposidic acid, v.v.), 3 lignans và lignan glycoside (Yangambin, (cộng) -Pinoresinol-O - - D-glucopyranoside, v.v.), 2 flavonoid (quercetin, genistein), 1 alkaloid, 1 terpene, 1 sterol, 1 rượu béo, 1 axit béo, và loại khác. Theo các báo cáo trước đây, các hợp chất này là thành phần chính hoặc thành phần chức năng hoạt động của CT (Fu và cộng sự, 2018).
Trong Hình 2, tổng số 81 mục tiêu chung được tìm thấy có mối tương quan với OP và AD. Mức độ của PPI được sử dụng như một tham số đặc trưng để xác định tầm quan trọng của các mục tiêu tiềm năng. 5 protein mục tiêu giả định hàng đầu liên quan đến OP và AD là albumin (ALB), insulin (INS), interleukin 6 (IL6), TNF-alpha (TNF) và yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF).
Hình 1.Phân bố hóa học dựa trên phân tích thành phần chính (PCA).
3.2 Phân tích mạng tích hợp và phân loại
81 protein mục tiêu giả định trong Bảng S2 đã được chọn để bắt đầu phân tích làm giàu con đường GO và KEGG. Sau khi lọc theo giá trị p (GO cắt nhỏ hơn hoặc bằng 0. 0 5, đường cắt KEGG nhỏ hơn hoặc bằng 0,01), 15 số hạng GO và 66 KEGG Các thuật ngữ về con đường đã được trả về, như thể hiện trong Hình 3 và 4. Tổng cộng có 16 thuật ngữ GO được bao gồm: 5 cho chức năng phân tử, 5 cho các quá trình sinh học và 6 cho các thành phần tế bào. Vì nghiên cứu này nhằm mục đích khám phá cơ chế bệnh sinh phổ biến tiềm ẩn của OP và AD, chúng tôi đã loại bỏ các thuật ngữ về con đường liên quan trực tiếp đến các bệnh khác và phân loại phần còn lại thành các loại chức năng khác nhau. Nó gợi ý rằng 22 thành phần hoạt tính của CT có thể điều chỉnh tổng cộng 66 con đường liên quan chủ yếu đến sự dẫn truyền tín hiệu, hệ thống nội tiết, hệ thống miễn dịch, tăng trưởng tế bào và chết để đóng vai trò đối đầu chống lại OP và AD.
Để tiết lộ sự khác biệt trong hoạt động của các loại hợp chất khác nhau, mạng PPI được xây dựng trong Hình 2 đã được phân tích theo các loại của chúng trong Bảng S3. Hình 5 minh họa rằng 5 PhG, 2 flavonoid, 1 terpene, và 1 sterol, đặc biệt là flavonoid, có thể quan trọng hơn các thành phần khác của CT chống lại OP và AD. Sau đó, 4 loạt hợp chất hoạt động này được chọn để khám phá các con đường nén của chúng. Như có thể thấy từ Hình 6, PhGs, flavonoid, terpene và sterol đã hoạt động cùng nhau hoặc đơn lẻ trên 27 con đường, chứa 11 mô-đun: tăng trưởng và chết tế bào, hệ thống nội tiết, hệ thống miễn dịch, truyền tín hiệu, phát triển và những mô-đun khác. Kết quả cho thấy rằng các hợp chất này có thể đóng một vai trò hiệp đồng trong tác động tích cực của CT lên OP và AD. Cần lưu ý rằng tác dụng bảo vệ của PhG có thể đáng chú ý hơn flavonoid trong bệnh thoái hóa thần kinh vì PhG có tương tác trực tiếp với con đường bệnh Alzheimer trong khi flavonoid liên quan đến các phân tử tín hiệu và sự tương tác. Chỉ sterol và terpene có liên quan đến chuyển hóa lipid và hệ bài tiết. Ngoài ra, PhGs, terpene và flavonoid cho thấy mối liên quan tiềm ẩn với bệnh nội tiết và chuyển hóa.
Theo minh họa PPI, 2 flavonoid (GE, QU), 1 terpene (AA) và 1 sterol (BSS) đã được sử dụng làm hợp chất có giá trị để nghiên cứu thêm về cơ chế phân tử. Điều thú vị là chúng tôi phát hiện ra rằng tất cả chúng đều có mối quan hệ với nhau với lộ trình tín hiệu MAPK và lộ trình tín hiệu TGF-beta. Và giá trị p của hai con đường cũng cao hơn nhiều. Các mục tiêu giả định của 4 hợp chất có giá trị và sự phân bố của các protein bị ảnh hưởng của chúng theo hai con đường được trình bày trong Hình 7.
3.3 Xác nhận hiệu quả của các hợp chất có giá trị
Trong phân tích mạng lưới được thiết lập ở 3.2 này, chúng tôi đã thu thập được 4 hợp chất có giá trị để xác nhận hoạt tính dược lý. Bằng phương pháp phân tích cấu trúc topo trong nghiên cứu này, chúng tôi nhận thấy rằng genistein (GE, C9, DL =0. 21), quercetin (QU, C11, DL =0. 28), axit abietic (AA, C19, DL =0. 28) và -sitosterol (BSS, C20, DL =0. 21) cho thấy tác động qua lại khả thi đối với OP và AD. Trong phần này, các mô hình in vivo của ấu trùng cá ngựa vằn được tạo ra bởi Pre hoặc AlCl3 tương ứng được thiết lập để đánh giá tác dụng bảo vệ của 4 hợp chất chống lại OP và AD.
3.3.1. Ảnh hưởng của 4 hợp chất đến OP
Để phát hiện xem 4 hợp chất có tác dụng bảo vệ chống lại OP hay không, Pre được sử dụng để thiết lập mô hình cá ngựa vằn OP. Sự phát triển của nguyên bào xương lần đầu tiên được kiểm tra bằng phương pháp nhuộm đỏ alizarin để khảo sát ảnh hưởng trực tiếp của 4 hợp chất đối với sự hình thành xương. So với cá ngựa vằn đối chứng, Pre rõ ràng đã gây ra sự thay đổi về hình thái xương và mật độ xương của hộp sọ cá ngựa vằn trong nhóm mô hình (Hình 8). Sự giảm diện tích nhuộm và IOD trong nhóm Pre và xu hướng ngược lại trong nhóm Ed cũng thể hiện trực quan sự thành công của mô hình OP. Hơn nữa, diện tích nhuộm và 2 IOD của hộp sọ cá ngựa vằn ở nhóm BSS / GE / QU / AA đã tăng lên đáng kể so với nhóm mô hình (Hình 9). Các chất đánh dấu điển hình của quá trình hình thành và tiêu xương như ALP và TRAP đã được thử nghiệm để đánh giá thêm tác dụng chống loãng xương của 4 hợp chất. Như thể hiện trong Hình 10, Pre giảm đáng kể hoạt động ALP và tăng hoạt động TRAP trái ngược với nhóm đối chứng. Ngược lại, hợp chất Ed và 4 cho thấy xu hướng ngược lại đáng kể với nhóm Pre trong các hoạt động ALP và TRAP của cá ngựa vằn. Những kết quả này kết hợp với nhau đã xác nhận rằng BSS, QU, GE và AA có thể đóng những vai trò tích cực trong việc hình thành xương ở cá ngựa vằn OP trước cảm ứng.
3.3.2. Ảnh hưởng của 4 hợp chất đến AD
Để đánh giá tác dụng bảo vệ chống lại AD của 4 hợp chất, mô hình cá ngựa vằn cảm ứng AD AlCl 3- đã được sử dụng. Đối với mô hình rối loạn vận động AD này, máy phân tích hành vi đã được sử dụng để theo dõi chuyển động của cá ngựa vằn. Như thể hiện trong Hình 11, AS của nhóm AlCl3 thấp hơn đáng kể so với nhóm đối chứng, trong khi đối với DPZ và cả 4 hợp chất, AS gần với đối chứng. DRR và RE được liệt kê trong Bảng S4. Kết quả cho thấy rằng các nồng độ khác nhau của GE, BSS, QU và AA đã làm tăng DRR lên 2. 37-37. 64 phần trăm, 6 0. 18-103. 92 phần trăm, 70. {14 }}. 61 phần trăm, 2. 37-42. 64 phần trăm, tương ứng với một phần có nghĩa (p-value <0. 001-0.="" 01).="" các="" ∆s="" trong="" nhóm="" đối="" chứng,="" nhóm="" alcl3="" và="" nhóm="" dpz="" hỗ="" trợ="" thêm="" rằng="" việc="" xây="" dựng="" mô="" hình="" ad="" đã="" thành="" công.="" re="" cho="" ge,="" bss,="" qu="" và="" aa="" là="" 13.="" 12-50.="" 45="" phần="" trăm,="" 11.="" 41-63.="" 09="" phần="" trăm,="" 1.="" 63-66.="" 89="" phần="" trăm,="" 13.="" {{34}="" }="" .09="" phần="" trăm,="" tương="" ứng.="" những="" kết="" quả="" với="" sự="" khác="" biệt="" đáng="" kể="" này="" đã="" chứng="" minh="" rằng="" ge,="" bss,="" qu="" và="" aa="" có="" thể="" cải="" thiện="" chứng="" rối="" loạn="" vận="" động="" của="" cá="" ngựa="" vằn="" ở="" một="" mức="" độ="" nào="" đó.="" xác="" định="" hoạt="" động="" của="" các="" dấu="" hiệu="" dẫn="" truyền="" thần="" kinh="" (ache="" và="" chat)="" trong="" các="" nhóm="" được="" thể="" hiện="" trong="" hình="" 12.="" alcl3="" làm="" tăng="" đáng="" kể="" hoạt="" động="" ache="" và="" giảm="" hoạt="" động="" chat="" so="" với="" nhóm="" chứng.="" nhưng="" dpz="" và="" 4="" hợp="" chất="" cho="" thấy="" khả="" năng="" phục="" hồi="" một="" phần="" những="" thay="" đổi="" do="" alcl3="" gây="" ra="" trong="" hoạt="" động="" ache="" và="" chat.="" nó="" phù="" hợp="" với="" kết="" quả="" đánh="" giá="" chứng="" rối="" loạn="" vận="" động="" hiệu="" quả="" phục="" hồi.="" kết="" luận,="" ge,="" bss,="" qu="" và="" aa="" có="" thể="" có="" tiềm="" năng="" trở="" thành="" các="" tác="" nhân="" chống="" ad="" nổi="">
3.4 Xác thực các mục tiêu giả định
Để xác minh các mục tiêu giả định đã được dự đoán trong công việc này, các mục tiêu liên quan đến đường dẫn tín hiệu MAPK và TGF-beta đã được chọn để phân tích qRT-PCR. Mức biểu hiện mRNA tương đối của họ trong mô hình OP được thể hiện trong Hình 13. So với nhóm Pre, GE tăng mức mapk14a, fgfr1b, tgfb1, bmp2 và giảm mức tp53, TNF-, jun, tgfbr1 và c-fos . QU tăng mức mapk14a, fgfr1b, tgfb1, bmp2 và giảm mức tp53, jun và il1b. BSS chỉ cho thấy tác dụng giảm đối với tp53, TNF- và mapk3. Như trong Hình 14, trong mô hình AD, GE, QU, BSS và AA làm giảm mức độ biểu hiện mRNA của tp53. GE và QU đều giảm mức TNF-, bmp2, tgfbr1, sp1, tgfb2 và ifn, đồng thời tăng mức jun, trong khi GE và AA tăng mức mapk3. Chỉ có GE xuất hiện để đảo ngược sự gia tăng của mapk14a, fgfr1b, fgfr1a và igf1ra. Bên cạnh đó, QU làm giảm mức độ cao của il1b và EGF. Mức độ biểu hiện mRNA tương đối của các gen bao gồm tp53, TNF-, mapk14a, mapk3, fgfr1b, bmp2, jun, il1b và tgfbr1 thay đổi đáng kể so với nhóm đối chứng trong mỗi mô hình. Những kết quả này cho thấy rằng chúng có thể đóng vai trò là mối liên hệ giữa hai căn bệnh. Ngoài ra, các kết quả này cũng gợi ý về khả năng tác dụng hiệp đồng của 4 hợp chất.
4. Thảo luận
OP và AD là những bệnh lâm sàng phổ biến nhất liên quan đến lão hóa. Cơ chế sinh lý bệnh phức tạp của chúng đã hạn chế hiệu quả điều trị hai bệnh trong nhiều năm. Các yếu tố nguy cơ của OP và AD cho thấy nhóm dễ mắc cả hai bệnh này có phần giống nhau, chẳng hạn như phụ nữ cao tuổi (Abraham và cộng sự, 2013; Patel, 2017), bệnh nhân tiểu đường (Vieira và cộng sự, 2018; Xia và cộng sự, 2012), những người hút thuốc lâu năm (Franic và Verdenik, 2018; Zhong và cộng sự, 2015), và những người không hoạt động (Koedijk và cộng sự, 2017; Sofi và cộng sự, 2011). Hơn nữa, các nghiên cứu hiện tại đã xác định rằng một số protein quan trọng trong AD cũng có chức năng trong chuyển hóa xương (Li và cộng sự, 2016; Pan và cộng sự, 2018). Có những lý do để tin rằng OP và AD không hoàn toàn độc lập, thậm chí có một số mối liên hệ tiềm ẩn. Điều này gợi ý một liệu pháp đồng tính tiềm năng cho bệnh dị dưỡng, có nghĩa là điều trị OP và AD với cùng một liệu pháp.
Trên cơ sở các mục tiêu và nguyên tắc điều trị của bệnh TCM, tình trạng không điều chỉnh trong một bệnh có thể được phân loại thành một số "mẫu". Vì vậy, nhiều bệnh như OP và AD có thể có chung một "mô hình" và được điều trị bởi cùng một bệnh TCM (Jiang, 2005). Là một loại thảo mộc bổ thận, CT được sử dụng rộng rãi trong điều trị OP và AD. Các nghiên cứu hiện đại đã cung cấp một số bằng chứng nhỏ gọn cho thấy CT có tác dụng dược lý tích cực trên khung xương và hệ thần kinh. Tuy nhiên, nó vẫn cần các nghiên cứu chi tiết hơn để tiết lộ các cơ chế của CT.
cistanche và tongkat alicóhành động dược lý tích cựctrênbộ xương và hệ thần kinh.
Trong nghiên cứu này, để hiểu rõ về tác động của CT đối với OP và AD, một phương pháp tiếp cận dược lý mạng đã được thiết lập để dự đoán các thành phần hoạt tính có thể có và phân tích các con đường liên quan. Nó khác với các nghiên cứu dược lý mạng trước đây về CT (Liu và cộng sự, 2017). Lần đầu tiên mạng lưới phân tử “một thuốc - hai bệnh” được tiến hành, thay vì chỉ tập trung vào một bệnh. Một mặt, phân tích mạng tích hợp đã phát hiện ra tổng cộng 22 hợp chất hoạt động của CT có tác dụng kép để điều trị cả OP và AD. Mặt khác, mô hình của hai căn bệnh đã hỗ trợ cho việc tiết lộ mối liên hệ của chúng. Phân tích phân loại cho thấy rằng các hợp chất hoạt tính này có thể có tác dụng hiệp đồng trên nhiều mô-đun chức năng sinh học và PhG, flavonoid, terpene và sterol cho thấy hiệu quả tốt hơn. Để xác minh tính khả thi và tính phù hợp của mạng lưới được tiến hành này, cá ngựa vằn đã được sử dụng để xây dựng các mô hình OP và AD in vivo và đánh giá hiệu quả của bốn hợp chất. Và xác thực mục tiêu giả định đã được áp dụng để tiết lộ sức mạnh tổng hợp tiềm năng của chúng. Những nghiên cứu kết hợp này trong silico và in vivo đã cung cấp một điểm khởi đầu mới cho việc tiết lộ tác dụng bảo vệ của CT đối với hai bệnh. Nó có thể cung cấp manh mối mới về mối tương quan giữa cơ chế bệnh sinh OP và AD, cũng như giúp phát triển các chiến lược điều trị trong tương lai cho hai bệnh. Tuy nhiên, phương pháp này vẫn cần cải tiến và hoàn thiện để khám phá hoàn toàn các cơ chế hiệp đồng của CT để điều trị OP và AD. Trong nghiên cứu này, chỉ một số hợp chất nhất định được chọn để xác nhận. Cần phải xác minh thêm 18 thành phần hoạt động khác với các mục tiêu và đường dẫn cơ bản bằng các thử nghiệm. Và những điểm chung giữa OP và AD vẫn cần được tiếp tục tìm hiểu và khám phá, đặc biệt là từ góc độ điều trị.
mua cistanche ở đâu
Trong nghiên cứu của chúng tôi, BSS, GE, AA và QU đã được chứng minh là có tác dụng bảo vệ OP và AD ở cá ngựa vằn. Thú vị hơn, những thành phần có giá trị này cũng đã được xác nhận bằng thực nghiệm trong các tài liệu khác và cho thấy các hoạt động dược lý phù hợp với điều đó trong bài báo này (Ayaz và cộng sự, 2017; Chauhan và cộng sự, 2018; King và cộng sự, 2015; Ramnath và cộng sự. , 2018; Thummuri và cộng sự, 2018; Vargas-Restrepo và cộng sự, 2018; Wang và cộng sự, 2019; Yuan và cộng sự, 2018). Nó tiếp tục chứng minh tính hiệu quả và hợp lý của mạng lưới này và chỉ ra tác động kép của 18 hợp chất còn lại. Đối với xác nhận các mục tiêu giả định, 9 mục tiêu hiệu quả bao gồm TP53, JUN, TNF, IL1B, MAPK14, MAPK3, FGFR1, BMP2 và TGFBR1 đã được sàng lọc thành các mục tiêu chung của OP và AD cuối cùng. TP53 là một chất ức chế khối u quan trọng và sự kích hoạt của nó có thể gây ra quá trình apoptosis tế bào thần kinh (Xiao et al., 2019). TP 53, JUN và SP1 là các yếu tố phiên mã tích cực trong OP chính (Xie và cộng sự, 2015). TNF và IL1B là các cytokine gây viêm phổ biến có chức năng thúc đẩy quá trình tạo xương (Geissler et al., 2018) và mất xương (Sang et al., 2017). Hơn nữa, cả hai đều là mục tiêu điều trị cho AD thông qua việc ức chế quá trình viêm thần kinh để bảo vệ tế bào thần kinh (Liu và cộng sự, 2017). TGFB1, TGFB2, TGFBR1 và TGFBR1 có tác dụng phức tạp đối với chứng viêm tế bào thần kinh (Lippa và cộng sự, 1998) và sự tiêu xương (Quinn và cộng sự, 2001). Protein hình thái xương (BMPs) là một trong những yếu tố liên quan đến sự biệt hóa thần kinh đệm của tế bào tiền thân thần kinh (Kwak và cộng sự, 2014). Sự biểu hiện điều chỉnh của BMP2 đã được chứng minh là có vai trò thiết yếu trong quá trình biệt hóa nguyên bào xương (Li và cộng sự, 2017). Ngoài các mục tiêu đã được xác nhận bằng thực nghiệm này, 81 mục tiêu phổ biến được liệt kê trong Bảng S2 cũng được mong đợi là mục tiêu điều trị, nhưng chưa được nghiên cứu hoặc đã có các nghiên cứu sơ bộ trong nghiên cứu khác.
Điều đặc biệt đáng chú ý là các mục tiêu có giá trị này đều liên quan đến các con đường tín hiệu MAPK và TGF-beta dựa trên phân tích làm giàu KEGG. Con đường tín hiệu MAPK điều chỉnh sự tăng sinh, biệt hóa, tồn tại hoặc apoptosis của tế bào, viêm và miễn dịch bẩm sinh. Đã có báo cáo rằng đường dẫn tín hiệu MAPK bị tổn thương đã góp phần gây ra bệnh lý thoái hóa thần kinh như AD (Kim và Choi, 2015) cũng như ức chế trực tiếp nguyên bào xương (Xiao và cộng sự, 2019). Đối với các thành viên trong gia đình TGF, họ đóng các vai trò khác nhau trong khung xương với tác động trực tiếp đến sự suy giảm xương (Sun và cộng sự, 2016), trong khi việc kích hoạt tín hiệu TGF-beta tế bào thần kinh làm tăng rối loạn thoái hóa thần kinh và bệnh giống AD (Tesseur và cộng sự ., 2006). Do đó, các con đường tín hiệu MAPK và TGF-beta có thể trở thành cơ chế dùng chung để tiết lộ cơ chế bệnh sinh của OP và AD hoặc làm chậm quá trình tiến triển. Bên cạnh hai con đường, 22 hợp chất hoạt động điều chỉnh tổng cộng 66 con đường, đặc biệt là các con đường có giá trị p cao nhất, chẳng hạn như con đường tín hiệu Prolactin, con đường tín hiệu FoxO và sự biệt hóa tế bào Th17 cũng sẽ đáng được quan tâm và nghiên cứu và là chìa khóa để khám phá mối tương quan giữa OP và AD. Cuối cùng, những khám phá được tổng kết có thể ám chỉ mối liên hệ giữa hai căn bệnh trong hệ thống miễn dịch và hệ thống nội tiết.
5. Kết luận
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã đề xuất một phương pháp tiếp cận dược lý mạng, kết hợp phân tích PCA, sàng lọc DL, thu thập và dự đoán nhiều mục tiêu, xây dựng mạng PPI, cũng như phân tích lộ trình GO và KEGG để thăm dò hiệu quả của CT trong điều trị OP và AD. Kết quả của chúng tôi cho thấy rằng 22 thành phần hoạt tính của CT có thể chủ yếu điều chỉnh quá trình truyền tín hiệu, hệ thống nội tiết, hệ thống miễn dịch, tăng trưởng tế bào và chết để đóng một vai trò quan trọng trong điều trị OP và AD. Để hiểu rõ hơn về cơ chế của CT, mạng lưới này đã được đào sâu và phân tích tùy thuộc vào loại hợp chất. Cuối cùng, chúng tôi đã áp dụng mô hình OP và AD của cá ngựa vằn riêng biệt để xác định 4 hợp chất có giá trị và các mục tiêu liên quan, cung cấp một phương pháp khả thi để kết nối bộ gen với dược lực học và tìm ra các hợp chất có tác dụng kép.
