Phần II.:Cistanche Tubulosa Phenylethanoid glycoside gây ra quá trình apoptosis của tế bào ung thư biểu mô tế bào gan bằng con đường phụ thuộc ty thể và MAPK và tăng cường tác dụng chống ung thư thông qua việc kết hợp với cisplatin
Mar 05, 2022
Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Chúng tôi đánh giá thêm tác dụng kích thích miễn dịch của CTPG (Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside) trên chuột. Sau khi tiêm i.p., tiêm s.c. và i.g. quản lý CTPG (200 và 400mg / kg), không có sự thay đổi đáng kể trong tình trạng của chuột so với nhóm không được điều trị. Trọng lượng cơ thể của chuột cũng không có sự khác biệt đáng kể giữa các nhóm được điều trị CTPG và các nhóm không được điều trị (Hình 7A). Các chỉ số tim, gan, lá lách, phổi, thận và tuyến ức của chuột là tương tự nhau giữa tất cả các nhóm ngoại trừ chỉ số lá lách của chuột trong nhóm tiêm CTPG i.p. 400mg / kg (Bảng 1). Kết quả cho thấy rằng liều CTPG được chọn không có tác dụng phụ ở chuột. Lá lách là một cơ quan bảo vệ miễn dịch quan trọng ở động vật có vú và sự phát triển của nó ảnh hưởng trực tiếp đến chức năng miễn dịch của cá nhân và khả năng chống lại bệnh tật. Chỉ số cơ quan miễn dịch phản ánh sự phát triển và chức năng miễn dịch của các cơ quan miễn dịch. Lá lách chứa nhiều loại tế bào miễn dịch, bao gồm tế bào T, tế bào B, tế bào giết người tự nhiên (tế bào NK), đại thực bào, tế bào đuôi gai (DC) và các tế bào khác, đóng một vai trò quan trọng trong hệ thống miễn dịch.30 Người ta đã báo cáo rằng polysacarit có thể làm tăng số lượng tế bào miễn dịch để tăng cường cơ thểmiễn dịch.31 Khi tiêm I.p. CTPG làm tăng đáng kể chỉ số lá lách (tăng 0,55 lần), chúng tôi đã phân tích thêm số lượng các tế bào miễn dịch khác nhau trong lá lách. Kết quả cho thấy i.p. tiêm CTPG làm tăng đáng kể số lượng tế bào T (tế bào CD3 + CD19−) (tăng 0,49 lần), tế bào B (tế bào CD3−CD19+) (tăng 0,49 lần) và tế bào NK (tế bào CD3−CD19−CD49b+) (tăng 1,63 lần) so với nhóm không được điều trị. Tế bào T CD4+ và CD8+, là các phân nhóm chính của tế bào T, đóng một vai trò quan trọng trong đáp ứng miễn dịch tế bào đặc hiệu với kháng nguyên.32 Do đó, chúng tôi đã phân tích thêm về số lượng và trạng thái kích hoạt của các tế bào T CD4+ và CD8+ trong lá lách. Kết quả chỉ ra rằng i.p. tiêm CTPG không chỉ làm tăng đáng kể số lượng tế bào T CD4 + và CD8 + (tăng lần lượt 0,55 và 0,34 lần) mà còn tăng cường trạng thái kích hoạt của tế bào T CD4 + (tế bào CD4 + CD44 +) (tăng 0,84 lần) (Hình 7B), những kết quả này cho thấy CTPG có chức năng tăng cường miễn dịch.
Sự kết hợp của CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside)và Cisplatin thể hiện tác dụng chống ung thư mạnh mẽ trên mô hình chuột khối u H22
Người ta thường chấp nhận rằng hóa trị hoặc xạ trị có thể dẫn đến tiên lượng xấu và gây ra nhiều tác dụng phụ, có thể là do sự ức chế hệ thống miễn dịch và tổn thương các mô và cơ quan bình thường. Polysacarit từ TCM có tác dụng tăng cường miễn dịch và làm giảm bớt thiệt hại của các cơ quan miễn dịch và tế bào miễn dịch do hóa trị liệu gây ra, ví dụ, chitosan33 và Lycium barbarum polysacarit.34 Kết quả trên cho thấy CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside)có thể cải thiện các tác dụng phụ của cisplatin trên hệ thống miễn dịch. Do đó, tác dụng chống ung thư của CTPG kết hợp với cisplatin đã được đánh giá trong mô hình chuột khối u H22. Như thể hiện trong Hình 8A, chỉ riêng CTPG, riêng cisplatin và sự kết hợp của CTPG và cisplatin (CTPG + cisplatin) đã ngăn chặn đáng kể sự phát triển của khối u H22 so với nhóm đối chứng. CTPG +cisplatin cho thấy tác dụng ức chế mạnh hơn so với CTPG và cisplatin đơn thuần. Vào ngày thứ 20, khối u trong đối chứng, riêng cisplatin, CTPG một mình và các nhóm CTPG + cisplatin lần lượt là khoảng 1707,8, 722,5, 1033,8 và 367,5mm3. Cùng ngày, các khối u đã được thu thập để quan sát trực quan (Hình 8B) và so sánh trọng lượng (Hình 8C). CTPG + cisplatin cho thấy hiệu quả điều trị tốt hơn trên mô hình chuột khối u H22 so với CTPG hoặc cisplatin đơn thuần. Trọng lượng khối u trong nhóm CTPG + cisplatin thấp hơn so với các nhóm khác. Những kết quả này cho thấy rằng hoạt động chống khối u của CTPG và cisplatin dẫn đến tác dụng hiệp đồng.
Trọng lượng cơ thể của chuột được đo để phản ánh tình trạng sức khỏe của chuột. Trọng lượng cơ thể giảm đáng kể sau khi điều trị cisplatin, cho thấy độc tính toàn thân nghiêm trọng do cisplatin gây ra.35 Trong khi đó, CTPG kết hợp với cisplatin cải thiện đáng kể việc giảm cân cơ thể do cisplatin gây ra, trong khi CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside)một mình không có ảnh hưởng đáng kể đến trọng lượng cơ thể của chuột (Hình 8D). Các cơ quan bao gồm lá lách, tim, gan, phổi, thận và tuyến ức cũng được phân lập để tính toán các chỉ số cơ quan. So với nhóm không được điều trị, các chỉ số lá lách đã giảm đáng kể và tăng lần lượt bởi cisplatin và CTPG. CTPG + cisplatin đã phục hồi các chỉ số lá lách so với chỉ riêng cisplatin. Các chỉ số cơ quan khác cho thấy không có sự khác biệt đáng kể giữa tất cả các nhóm (Bảng 2). CTPG (Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside) Kết hợp với Cisplatin Enhanced theMiễn dịchcủa chuột khối u.
Kết quả trên cho thấy CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside) tăng cường khả năng miễn dịchcủa chuột và ức chế quá trình apoptosis của splenocytes gây ra bởi cisplatin. Chúng tôi đã điều tra thêm xem liệu tác dụng chống ung thư của CTPG + cisplatin có tương quan với khả năng miễn dịch tăng cường hay không. Trong quá trình xuất hiện và phát triển khối u, hệ thống miễn dịch của cơ thể đóng một chức năng giám sát miễn dịch quan trọng và miễn dịch tế bào qua trung gian tế bào T đóng một vai trò quan trọng. Tế bào T CD4+ có chức năng hỗ trợ miễn dịch tế bào và phản ứng miễn dịch dịch thể, và tế bào T CD8+ là tế bào tác nhân chính của phản ứng miễn dịch, đặc biệt có thể tiêu diệt tế bào đích và đóng một vai trò quan trọng trong khả năng miễn dịch khối u và miễn dịch kháng vi-rút.32 Lá lách của chuột mang khối u được thu thập để phát hiện số lượng tế bào T và tế bào B bằng phương pháp tế bào học dòng chảy. Tần số và số lượng tế bào T bao gồm các tế bào T CD4 + và CD8 + trong nhóm CTPG + cisplatin cao hơn đáng kể so với các tế bào trong đối chứng (tăng lần lượt 0,55 và 0,7 lần) và nhóm cisplatin (tăng lần lượt 0,92 và 1,16 lần) (Hình 9A và B). So với nhóm đối chứng, chỉ riêng CTPG cũng làm tăng một phần số lượng tế bào CD4 + và CD8 + T mặc dù không có sự khác biệt đáng kể. Tần số và số lượng tế bào B không có sự khác biệt đáng kể giữa tất cả các nhóm.
Các tế bào ức chế có nguồn gốc từ tủy (MDSC) và tế bào T điều hòa (Tregs) mở rộng trong các khối u và ức chế phản ứng miễn dịch chống ung thư; chúng ngăn chặn sự kích hoạt và mở rộng của các tế bào T CD4 +, chức năng của các tế bào T hiệu ứng, kích hoạt và / hoặc tăng sinh, và sự hình thành cytokine của các tế bào T CD4 + và CD8 +, sự tăng sinh tế bào B và sản xuất và chuyển đổi lớp immunoglobulin, chức năng gây độc tế bào của NK và tế bào T giết người tự nhiên (NKT), và chức năng và sự trưởng thành của DC.36-38 Tần số và số lượng MDSC (CD11b + Gr-1+), các đại thực bào (CD11b+Gr-1−), và Tregs (Tregs tự nhiên: CD4+CD25+Foxp3+; cảm ứng Tregs: CD4+CD25−Foxp3+) trong lá lách của chuột khối u được phân tích bằng phương pháp tế bào học dòng chảy. So với nhóm đối chứng, tần số và số lượng MDSC giảm đáng kể sau khi tiêm riêng cisplatin (giảm 1,56 lần) hoặc kết hợp với CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside)(giảm 0,62 lần). Số lượng đại thực bào CD11b+Gr-1− cũng giảm đáng kể mặc dù không có sự thay đổi đáng kể về tần số của chúng (Hình 9C). Ngoài ra, CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycoside)điều trị một mình và CTPG + cisplatin làm giảm đáng kể tần số của Tregs cảm ứng (giảm lần lượt 0,33 và 0,37 lần) (Hình 9D). Những kết quả này cho thấy rằng tác dụng chống ung thư của CTPG + cisplatin có thể tương quan với khả năng miễn dịch được tăng cường đặc trưng bởi số lượng tế bào T tăng lên và số lượng MDSC và Tregs giảm.
