Phần 1: Tương tác của Axit Ascorbic, 5- Axit Caffeoylquinic và Quercetin -3- Rutinoside trong sự hiện diện và vắng mặt của sắt trong quá trình xử lý nhiệt và ảnh hưởng đến hoạt động chống oxy hóa

Mar 15, 2022


Để biết thêm thông tin, liên lạctina.xiang@wecistanche.com


trừu tượng: Các hợp chất hoạt tính sinh học trong trái cây và rau quả ảnh hưởng lẫn nhauchất chống oxy hóahoạt động. Tiêu chuẩn tinh khiết và hỗn hợp của các hợp chất thực vật phổ biến, cụ thể làaxit ascorbic, {{{0}} axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside (tổng 0,3 mM), có và không có sắt, được phân tích xử lý trước và sau khi xử lý nhiệt trong dung dịch nước. Hoạt tính chống oxy hóa được đo bằng tổng hàm lượng phenol (TPC), 1, 1- diphenyl -2- picrylhydrazyl (DPPH) và 2,2'-azino-bis (3- ethylbenzothiazoline {{14} } axit sulfonic) (TEAC) thử nghiệm thu dọn gốc. Sắt ion (Fe2 cộng) và sắt sắt (Fe) được đo quang. Để xác định chất lượng và định lượng các sản phẩm phản ứng, HPLC đã được sử dụng. Kết quả cho thấy quá trình xử lý nhiệt không nhất thiết dẫn đến giảm hoạt động chống oxy hóa, ngay cả khi nồng độ hợp chất giảm, vì bản thân các sản phẩm thoái hóa cũng có hoạt tính chống oxy hóa. Trong tất cả các thử nghiệm chống oxy hóa được sử dụng, tỷ lệ 2: 1 của axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic khi có mặt sắt có tác dụng hiệp đồng mạnh, trong khi tỷ lệ 1: 2 có tác dụng đối kháng mạnh. Sắt ủng hộ oxy hóa ảnh hưởng tích cực đến hoạt động chống oxy hóa kết hợp với các chất chống oxy hóa được sử dụng, trong khi bản thân sắt đen tương tác với các xét nghiệm in vitro thông thường về hoạt tính chống oxy hóa tổng thể. Những kết quả này chỉ ra rằng hoạt động chống oxy hóa của các hợp chất bị ảnh hưởng bởi các yếu tố như tương tác với các phân tử khác, nhiệt độ và các khoáng chất hiện diện.

Từ khóa: ABTS; đối kháng; axit ascorbic; các hợp chất hoạt tính sinh học; 5- axit caffeoylquinic; phức chất chelating; sắt màu; sắt sắt; HPLC; hợp lực quercetin -3- rutinoside; TPC

Nhấn vào đây để biết thêm chi tiết

flavonoids antioxidant

1. Giới thiệu

Trong chế độ ăn uống của con người, nhiều sản phẩm có nguồn gốc thực vật khác nhau được tiêu thụ trong ngày, ngay cả trong cùng một bữa ăn. Trái cây và rau quả có liên quan đến nhiều lợi ích sức khỏe khác nhau, do sự đa dạng của các hợp chất hoạt tính sinh học, tức là, vitamin, khoáng chất và các chất chuyển hóa thực vật thứ cấp|1]. So với vitamin và khoáng chất, các chất chuyển hóa thứ cấp của thực vật, chẳng hạn như phenol, không được coi là cần thiết cho sức khỏe con người theo kiến ​​thức ngày nay [2]. Tuy nhiên, nhiều chất chuyển hóa thực vật thứ cấp là chất chống oxy hóa mạnh, giúp bảo vệ hệ thống sinh học khỏi các loại oxy phản ứng (ROS) và các loại nitơ phản ứng (RNS) [3]. Các hợp chất hoạt tính sinh học này có thể tương tác với nhau trước khi tiêu thụ, dẫn đến nhiều sản phẩm hoặc phức hợp phản ứng tiếp theo. Do đó, đóng góp của chúng đối với sức khỏe người tiêu dùng và hoạt động chống oxy hóa (AOA) của chúng có thể bị thay đổi 4|hoặc bị mất trước khi ăn. Các cấu trúc phân tử khác nhau của các hợp chất và sự kết hợp đa dạng của chúng có thể dẫn đến các hiệu ứng bổ sung, hiệp đồng hoặc thậm chí đối kháng thông qua các tương tác. Ảnh hưởng của sự tương tác giữa các thành phần thực vật đến khả năng loại bỏ gốc rễ của chúng vẫn chưa được hiểu đầy đủ, đặc biệt là do nhiều giai đoạn oxy hóa khác nhau và khả năng tạo phức của chúng. Một hợp chất hoạt tính sinh học chính, được tìm thấy trong nhiều loài thực vật, là 5- axit caffeoylquinic (axit chlorogenic), một este axit hydroxycinnamic của axit caffeic và axit quinic. Nó có thể tạo thành phức hợp sắt sắt, thường liên quan đến việc giảm hấp thu sắt không phải heme ở người [5,6]. Sắt, là một thành phần của hemoglobin, là một khoáng chất cần thiết cho cơ thể con người, trong khi lượng sắt dư thừa có thể gây ra stress oxy hóa trong tế bào [7]. Tương tác với các chất dinh dưỡng khác có thể làm tăng hoặc giảm sự hấp thụ sắt, ví dụ, bằng cách tạo thành các phức hợp. Hơn nữa, sắt có khả năng chấp nhận và tặng các electron một cách dễ dàng.

Một hợp chất hoạt tính sinh học thú vị khác trong thực vật làquercetin -3- rutinoside(rutin), mộtflavonoid glycoside, được tổng hợp chủ yếu bởi thực vật để bảo vệ chúng khỏi bức xạ UV [8,9]. Nó có độ hòa tan trong nước thấp [10] và không thể đi vào hệ tuần hoàn máu của con người trực tiếp, vì vậy hoạt tính sinh học của nó không bắt đầu cho đến sáu đến chín giờ sau khi tiêu thụ khi nó đi qua hệ vi sinh vật đường ruột. Trong thực phẩm bổ sung, quercetin -3- rutinoside thường được kết hợp với axit ascorbic [11].Axit ascorbiclà một loại vitamin thiết yếu đối với cơ thể con người và cần thiết trong nhiều quá trình trao đổi chất. Nó cũng là một chất chống oxy hóa hòa tan trong nước mạnh mẽ, nhưng cũng có thể hoạt động như một chất oxy hóa ủng hộ, do khả năng khử sắt sắt thông qua sự hình thành phức chất chelate, sau đó là sự biến đổi của sắt đen và một gốc ascorbic [12]. Tăng khả năng hấp thụ các hợp chất hoạt tính sinh học quercetin -3- rutinoside, 5- caffeoylquinic hoặc sắt trong cơ thể con người bằng cách thêm axit ascorbic [12], trong khi 5- axit caffeoylquinic làm giảm sự hấp thu sắt bằng cách tạo phức [6]. Để dự đoán lợi ích sức khỏe của các sản phẩm khác nhau, liên quan đến các hợp chất hoạt tính sinh học, các thử nghiệm chống oxy hóa trong ống nghiệm thường được sử dụng. Dự đoán về ảnh hưởng sức khỏe này bị hạn chế do khả dụng sinh học khác nhau của các hợp chất, sự chuyển hóa và các cơ chế chống oxy hóa khác nhau|13]. Tuy nhiên, những thử nghiệm này vẫn hữu ích để kiểm tra các hợp chất hoạt tính sinh học, chẳng hạn như polyphenol, hoặc, như trong nghiên cứu này, để đánh giá AOA của các hợp chất đơn lẻ và tương tác của chúng. Trái cây và rau quả có chứa một loạt các hợp chất hoạt tính sinh học, có thể tạo thành phức hợp với các hợp chất và protein khác có thể tương tác với chúng. Những tương tác này có thể ảnh hưởng đến hoạt động của các hợp chất và AOA tạo thành. Tuy nhiên, công trình này nhằm đóng góp kiến ​​thức về cách các hợp chất hoạt tính sinh học tương tác với nhau và tác động của chúng đối với AOA. Tính mới của nghiên cứu này là sự tương tác của các hợp chất phenol phổ biến, cụ thể là axit ascorbic, 5- axit caffeoylquinic, quercetin -3- rutinoside, với nhau và khoáng chất sắt trước và sau quá trình xử lý nhiệt. Trước nghiên cứu này, các yếu tố này được đánh giá riêng biệt, không kết hợp với nhau. Trọng tâm được đặt vào AOA và khả năng xây dựng các khu phức hợp của nó. Các giả thuyết là (1) quá trình xử lý nhiệt ảnh hưởng tiêu cực đến AOA do sự phân hủy chất chống oxy hóa, (2) hỗn hợp theo tỷ lệ khác nhau của axit ascorbic, 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside dẫn đến hiệp đồng ảnh hưởng liên quan đến AOA, và (3) việc bổ sung khoáng chất và sắt chống oxy hóa sẽ làm giảm hoạt động chống oxy hóa của các chất chống oxy hóa một mình hoặc trong hỗn hợp.

flavonoids clear free radicals

2. Kết quả

2.1.Những ảnh hưởng của quá trình xử lý nhiệt đối với hoạt động chống oxy hóa của Axit ascorbic, 5- Axit Caffeoylquinic và Quercetin -3- Tiêu chuẩn Rutinoside và Sắt khoáng

Không có mẫu nguyên chất nào có axit ascorbic, 5- axit caffeoylquinic, hoặcquercetin -3- rutinoside(Hình 1) hoặc hỗn hợp của chúng (Hình 2 và 3) là ảnh hưởng của thời gian nấu từ 0 đến 40 phút đối với AOA được quan sát thấy, ngoại trừ sự kết hợp của axit ascorbic và sắt. AOA thấp hơn trong các xét nghiệm TEAC và DPPH sau 40 phút nấu so với các mẫu chưa nấu (Hình 1). Các mẫu chứa axit ascorbic có xu hướng giảm AOA của chúng, trong khi các mẫu chứa quercetin -3- rutinoside có xu hướng tăng AOA của chúng với thời gian nấu kéo dài (Hình 1-3).

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red),  quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with  and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked  with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and  are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.  In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant  or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA  of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the  ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their  iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid  with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence  of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic  acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron,  being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA  of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or  cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid  mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was  found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside.  Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid  (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate  the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences  (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and  without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a  triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times  and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.  In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of  iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in  the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of  the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher  Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2 Sự thiếu hụt sắt và các sự kết hợp khác nhau của Axit Ascorbic, 5- Axit Caffeoylquinic và Quercetin -3- Tiêu chuẩn Rutinoside về Hoạt động Chống Oxy hóa

Phân tích với xét nghiệm TEAC (Hình la) cho thấy AOA của axit ascorbic tinh khiết thấp hơn AOA của quercetin {{0}} rutinoside. Khi có sắt, AOA của axit ascorbic thậm chí còn thấp hơn AOA của quercetin -3- rutinoside và 5- axit caffeoylquinic. Thêm sắt làm tăng AOA của quercetin -3- rutinoside và 5- caffeoylquinic acid. Tại thời điểm nấu 0 phút, chỉ có AOA của 5- axit caffeoylquinic là cao hơn khi có mặt và không có sắt. Xét nghiệm DPPH (Hình 1b) phát hiện AOA của quercetin -3- rutinoside cao hơn khi không có sắt so với 5- axit caffeoylquinic và axit ascorbic. Sự hiện diện của sắt dẫn đến sự gia tăng AOA đối với axit caffeoylquinic 5- và AOA giảm đối với các mẫu rutinoside quercetin -3-. Ở thời gian nấu 0 phút, chỉ có quercetin -3- rutinoside khi không có sắt cao hơn khi không có sắt. Chỉ trong xét nghiệm TPC (Hình lc), sắt không ảnh hưởng đến AOA, và thứ tự của ba chất được giữ nguyên.

Trong các hỗn hợp nhị phân, được phát hiện bằng xét nghiệm TEAC (Hình 2a-c), sắt dẫn đến sự gia tăng đáng kể hoặc có xu hướng trong AOA. Trong số các mẫu không có sắt, không tìm thấy sự khác biệt giữa AOA của các hỗn hợp hoặc tỷ lệ. Khi có sắt ở thời gian nấu 0 phút, tỷ lệ 1: 1 và 1: 2 của axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic, và tỷ lệ 2: 1 của {{10} } hỗn hợp axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside, có hàm lượng AOA cao hơn so với các chất không chứa sắt. Trong xét nghiệm DPPH (Hình 2d-f), sự kết hợp của axit ascorbic với 5- axit caffeoylquinic, cũng như với quercetin -3- rutinoside, cho thấy sự hiện diện của sắt trong tất cả các tỷ lệ, AOA cao hơn AOA của axit ascorbic tinh khiết. Tuy nhiên, axit ascorbic kết hợp với quercetin -3- rutinoside cho thấy AOA cao hơn khi không có sắt, có thể so sánh với quercetin -3- rutinoside tinh khiết. Trong thử nghiệm TPC (Hình 2g-i), AOA của cả ba hỗn hợp nhị phân cho thấy các mẫu giống hệt nhau. Không có ảnh hưởng của bàn ủi hoặc thời gian nấu ăn đối với AOA. Những kết quả này tương ứng với những phát hiện trước đó ở các chất tinh khiết (Hình 1): AOA thấp nhất được phát hiện trong hỗn hợp axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic, tiếp theo là axit ascorbic với quercetin -3- rutinoside, và AOA cao nhất là được tìm thấy trong sự kết hợp của 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside.

Trong tất cả các hỗn hợp bậc ba, không có sự khác biệt giữa các tỷ lệ, bất kể sự có mặt của sắt, trong các xét nghiệm TEAC và DPPH đã được tìm thấy (Hình 3a-f). AOAs cao hơn được tìm thấy trong xét nghiệm TEAC (Hình 3a-c) với sự hiện diện của sắt. Tại thời gian nấu 0 phút tối thiểu, AOA của hỗn hợp đẳng cực và tỷ lệ 1: 2: 1 của axit ascorbic, 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside cao hơn khi có mặt sắt . Xét nghiệm DPPH cho thấy AOA cao hơn trong các mẫu có sắt theo tỷ lệ 1: 2: 1 (Hình 3e). Phù hợp với hỗn hợp nhị phân, xét nghiệm TPC không bị ảnh hưởng bởi sắt cũng như thời gian nấu (Hình 3g-i). Hơn nữa, hỗn hợp đẳng cực khi không có sắt có AOA thấp hơn tỷ lệ 1: 2: 2. Trong hỗn hợp không đẳng cực với một hợp chất nhân đôi, tỷ lệ 1: 1: 2 ở AOA cao hơn so với tỷ lệ 2: 1: 1 (Hình 3h) và trong hỗn hợp không đẳng cực với hai hợp chất nhân đôi, tỷ lệ 1: 2: Tỷ lệ 2 trong AOA cao hơn so với tỷ lệ 2: 1: 2 và 2: 2: 1 (Hình 3i) khi có và không có sắt.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. Tác dụng hiệp đồng và đối kháng của hoạt động chống oxy hóa

Tất cả các thử nghiệm kiểm tra chủ yếu cho thấy tác dụng hiệp đồng và đối kháng yếu với các tác động giữa các tác nhân dưới 10 phần trăm (Hình 4). Đáng lưu ý, trong số tất cả các xét nghiệm kiểm tra đã sử dụng, tỷ lệ 2: 1 của axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic khi có mặt sắt có tác dụng hiệp đồng mạnh mẽ, trong khi tỷ lệ 1: 2 của axit ascorbic và 5- caffeoylquinic axit có tác dụng đối kháng mạnh. Trong xét nghiệm TPC, những hiện tượng này cũng xuất hiện trong hỗn hợp không có sắt. Trong xét nghiệm DPPH, một hiệu ứng đối kháng mạnh khác đã được phát hiện trong tất cả các tỷ lệ hỗn hợp nhị phân không chứa sắt 5- caffeoylquinic acid và quercetin -3- rutinoside (Hình 4b). Đối với hỗn hợp axit ascorbic bậc ba, 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside, xét nghiệm TEAC cho thấy tác dụng đối kháng mạnh mẽ với sắt theo tỷ lệ 2: 2: 1 (Hình 4a). Trong hỗn hợp bậc ba với sắt, xét nghiệm DPPH cho thấy tác dụng đối kháng mạnh mẽ trong các mẫu nấu chín theo tỷ lệ 1: 2: 1,1: 1: 2,2: 1: 1 và 2: 2: 1, cũng như trong các hỗn hợp không có sắt theo tỷ lệ 1: 1: 2, 1: 2: 2 và 2: 1: 1 (Hình 4b). Thử nghiệm TPC cho thấy tác dụng hiệp đồng mạnh mẽ trong các hỗn hợp không có sắt theo tỷ lệ 1: 2: 1 (Hình 4c).

demostraction as the chart

2.4 Sắt tổng và logic

Sắt ion đã được thêm vào dưới dạng hỗn hợp đều của 5 0 phần trăm sắt sắt (Fe3 cộng) và 50 phần trăm sắt đen (Fe2 cộng) vào hỗn hợp tinh khiết, nhị phân và bậc ba nói trên. Trong tất cả các mẫu, tỷ lệ sắt chuyển sang sắt đen so với tỷ lệ cân bằng được thêm vào ban đầu. Bất cứ khi nào có axit ascorbic trong mẫu, sắt liên kết giảm theo thời gian nấu và sau đó biến mất hoặc ổn định (Bảng 1). Mối tương quan Pearson trên dữ liệu xét nghiệm TEAC cho thấy mối tương quan âm mạnh mẽ (-0. 641, p Nhỏ hơn hoặc bằng 2,2 * 10-16) giữa AOA và các ion sắt đen và mối tương quan thuận giữa AOA và sắt sắt (0,377, p<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

Trong các mẫu axit ascorbic tinh khiết, chỉ có thể phát hiện thấy dấu vết của sắt sắt, bất kể thời gian nấu của chúng. Ngoài ra, lượng sắt đen tăng lên, trong khi sắt liên kết giảm trong tất cả các mẫu axit ascorbic sau khi nấu. Trong các mẫu axit 5- caffeoylquinic, sắt sắt giảm 13,3 phần trăm sau 40 phút xử lý nhiệt, đồng thời sắt đen tăng nhẹ. sắt màu. Sắt liên kết tăng khi thời gian nấu kéo dài, trong khi sắt nung giảm 20,49 phần trăm sau 40 phút nấu (Bảng 1).

Với sự có mặt của axit ascorbic, 0 mẫu nhị phân đã nấu chín tối thiểu chứa từ 18,9 phần trăm đến 28,9 phần trăm sắt liên kết, được tách ra khi nấu chín. Sắt liên kết được tìm thấy trong hỗn hợp nhị phân sau 20 và 40 phút nấu chỉ khi không có axit ascorbic. Hỗn hợp axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic chứa một lượng sắt đen cao hơn so với hỗn hợp axit ascorbic và quercetin -3- rutinoside. Sự kết hợp của 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside trong tất cả các tỷ lệ cho thấy các mô hình tương tự, sắt đen tăng nhẹ và sắt sắt giảm khi thời gian nấu kéo dài. Sắt liên kết được tìm thấy trong hỗn hợp này chỉ sau 20 và 40 phút nấu (Bảng 2).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

Trong hỗn hợp bậc ba, lượng sắt cao hơn và lượng sắt thấp hơn, so với nồng độ bằng nhau tăng đột biến ban đầu của mỗi loại. Tổng hàm lượng sắt cao nhất được tìm thấy trong các mẫu khi nồng độ axit ascorbic tăng gấp đôi (tỷ lệ 2: 1: 1, 2: 1: 1, 2: 2: 1). Quá trình nấu tiếp tục làm tăng lượng sắt đen và sắt sắt, trong khi sắt liên kết giảm (Bảng 3).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5.Phân tích định lượng và định lượng hỗn hợp chất bằng HPLC

Dữ liệu HPLC cho thấy rằng trong tất cả các mẫu nấu chín 0 phút, có và không có sắt, chỉ có các chất được đưa vào ban đầu của axit ascorbic, 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside là có mặt (dữ liệu không được hiển thị). Sau khi nấu trong 40 phút, hai cực đại bổ sung (đỉnh 3 và 4) được tạo ra từ axit ascorbic, bất kể sự có mặt của sắt (Hình 5). Khi có mặt sắt, hai sản phẩm mới của 5- axit caffeoylquinic (các đỉnh 6 và 7) và một từ quercetin -3- rutinoside (đỉnh 8) đã được phát hiện (Hình 5b).

Khi không có sắt, nồng độ axit ascorbic giảm trong tất cả các hỗn hợp theo quan hệ liều lượng-phản ứng từ nồng độ ban đầu là 0. 3 mM sau 4 0 phút nấu xuống còn 26,79 phần trăm nồng độ ban đầu và với 0. 2 mM ban đầu từ 44. 0 8 phần trăm đến 51,67 phần trăm, với 0. 15 mM ban đầu từ 60,49 phần trăm đến 65,47 phần trăm, với 0,1 mM ban đầu là 77,84 phần trăm và 86. 41 phần trăm và tăng lên đến 90,05 phần trăm với 0,06 mM ban đầu (Bảng S1).

Khi có sắt, chỉ trong các mẫu axit ascorbic tinh khiết, nồng độ được tìm thấy giảm sau 4 0 phút nấu, cao hơn so với mẫu axit ascorbic không có sắt (Bảng S1). Trái ngược với các mẫu axit ascorbic không có sắt, nồng độ axit ascorbic cao hơn dẫn đến tỷ lệ phân hủy cao hơn (Bảng S1). Trong tất cả các hỗn hợp nhị phân, chỉ có nồng độ axit ascorbic giảm trong các mẫu nấu chín 0 phút. Sau 40 phút nấu, nồng độ rutinoside 5- caffeoylquinic hoặc quercetin -3- được tìm thấy khi kết hợp với axit ascorbic. Cả hai chất đều giảm thiểu sự giảm nồng độ axit ascorbic. Nồng độ axit caffeoylquinic 5- cao hơn dẫn đến giảm thiểu sự phân hủy axit ascorbic. Trong hỗn hợp nhị phân của 5- axit caffeoylquinic và quercetin -3- rutinoside, 5- axit caffeoylquinic giảm nồng độ của nó, trong khi quercetin -3- rutinoside vẫn ổn định sau 40 phút nấu. Trong hỗn hợp bậc ba, quercetin -3- rutinoside vẫn ổn định sau 40 phút nấu, trong khi nồng độ axit ascorbic và 5- axit caffeoylquinic giảm.

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract


Để biết thêm thông tin, hãy nhấp vào liên kết bên dưới cho phần 2:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactive-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html



Bạn cũng có thể thích