Polysaccharides từ Cistanche có thể làm trì hoãn đáng kể quá trình lão hóa của chức năng phổi

Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Sun Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Viện Y học, Đại học Dương Châu, Dương Châu 225001)

Sự lão hóalà quá trình các mô và cơ quan trong cơ thể bị thoái hóa chức năng, hình thái, thậm chí lão hóa trong quá trình sống. Phổi được kết nối trực tiếp với môi trường bên ngoài và tiếp nhận lưu thông máu từ toàn bộ cơ thể. Nó dễ bị tổn thương nhất bởi các yếu tố có hại khác nhau trong môi trường và trong cơ thể. Đây là một trong những cơ quan sớm nhất trong cơ thể xảy ra quá trình lão hóa. Vai trò của các gốc tự do trong quá trình lão hóa đã được các nghiên cứu của nhiều học giả khẳng định. Thí nghiệm này sử dụng ozone để tạo ra một mô hình lão hóa thực nghiệm để quan sáttác động của polysaccharides từ Cistanche lên khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy, chức năng chống oxy hóa và siêu cấu trúc phổi của chuột già. Ảnh hưởng. Nó được kỳ vọng sẽ đặt nền tảng nghiên cứu chopolysaccharides từ Cistanchetrong việc trì hoãn những thay đổi thoái hóa phổi và chăm sóc sức khỏe hệ hô hấp người cao tuổi.

Mục đích của nghiên cứu này là quan sát những thay đổi thoái hóa trong siêu cấu trúc của tế bào mô phổi ở chuột già thí nghiệm và ảnh hưởng củapolysaccharides từ Cistanchetrên đó. Sử dụng ôzôn (Ozone, Ob) hít liên tục trong 4 tuần để gây ra phương pháp mô hình lão hóa phổi, sử dụng Polysaccharide từ Cistanche 50 và 100 gam để quản lý chuột mô hình trong 6 tuần để phát hiện tình trạng thiếu oxy dung nạp, phổi và huyết thanh superoxide ở chuột lão hóa Dismutase (SOD ) hoạt động và hàm lượng malondialdehyde (MDA). Những thay đổi của các bào quan và siêu cấu trúc của mô phổi đã được quan sát dưới kính hiển vi điện tử. Kết quả Những con chuột bị lão hóa thực nghiệm do ozone gây ra đã làm giảm đáng kể khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy; SOD phổi và huyết thanh giảm và MDA tăng. So với nhóm mô hình, Polysaccharide từ Cistanche có thể kéo dài đáng kể thời gian chịu đựng tình trạng thiếu oxy của chuột già (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">Polysaccharides từ Cistanche có thể đáng kểtrì hoãn thí nghiệm Thoái hóa sinh lý và hình thái tế bào của phổicủa chuột lão hóa sinh dục.

1 vật liệu

1.1 Động vật

3 con chuột sạch tuổi lớn thuộc chủng ICR, 18 ~ 22g, ¥ ^ mỗi nửa con, được cung cấp bởi Trung tâm Động vật Thực nghiệm của Đại học Dương Châu, số chứng chỉ: Su Dongzhi 98002 ^

1.2 Thuốc và thuốc thử

Polysaccharides từ Cistanche: Do Viện Nghiên cứu Thực vật Hoang dã Nam Kinh cung cấp, được điều chế với nước cất đến 2,5 g · LT, 5. 0 gL -1; Bộ dụng cụ kiểm tra SOD, MDA được cung cấp bởi Viện Nghiên cứu Kỹ thuật Y sinh Nanjing Juli.

1.3 Dụng cụ

Máy quang phổ tử ngoại UV755B, sản phẩm của Nhà máy Dụng cụ Phân tích Thượng Hải; máy tạo ozone, một sản phẩm của Nhà máy Dụng cụ Y tế Vô Tích; Kính hiển vi điện tử truyền qua H -300, một sản phẩm của Hitachi, Nhật Bản.

2 Phương pháp

2 1 Việc chuẩn bị một mô hình lão hóa phổi thực nghiệm với những con chuột ICR bị tổn thương do mùi hôi được lấy trong ngày và thiết kế thử nghiệm, và những con chuột trong nhóm mô hình và nhóm điều trị được phân nhóm ngẫu nhiên.

Mô hình lão hóa thử nghiệm được tạo ra trong 4 tuần liên tục. Đồng thời, nhóm đối chứng (lấy những con chuột bình thường được mua trong cùng một đợt) và nhóm mô hình được cho 20 ml-kg ^ d'1 với nước muối thông thường, Polysaccharide từ Cistanche nhóm I và II Polysaccharide từ Cistanche 50, 100 mg-kg -1- d- 'được dùng bằng đường tiêu hóa và thời gian dùng thuốc là 6 tuần. Sau lần quản lý cuối cùng, các bài kiểm tra chỉ số khác nhau đã được thực hiện.

2.2 Phương pháp kiểm tra khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy (2)

Mỗi nhóm chuột được cho vào một bình mài 250 ml có chứa 20g vôi soda. Vaseline đã được niêm phong, và thời gian từ khi cho chuột vào chai đến khi chết ngạt và chết được ghi lại trong điều kiện nhiệt độ và áp suất bình thường.

2.3 Phổi và máu

Xác định hàm lượng SOD ^ MDA của mỗi nhóm chuột 1 giờ sau lần tiêm cuối cùng, loại bỏ nhãn cầu và lấy máu để tách huyết thanh; sau đó những con chuột được hiến tế, các mô phổi được lấy ra và nước muối được thêm vào bộ đồng nhất thủy tinh để chuẩn bị 100 g -f1 đồng nhất mô phổi, hoạt động SOD của phổi và huyết thanh được xác định bằng phương pháp Huangsuyin oxidase, và hàm lượng MDA được xác định bằng phương pháp ngưng tụ axit thiobarbituric.

2.4 Phương pháp chuẩn bị mẫu vật bằng kính hiển vi điện tử (3)

Thí nghiệm được chia thành nhóm đối chứng, nhóm mô hình và nhóm liều cao. Các phương pháp mô hình hóa và quản trị tương tự như trên. Sau lần quản lý cuối cùng, 3 con chuột từ mỗi nhóm được chọn ngẫu nhiên, và chúng bị giết bằng cách siết cổ, và các bên phải được lấy tương ứng. Mô đỉnh phổi, 0. 4 mmol, L -1 glutaraldehyde và 0. 04 mmol, cố định kép với L'1 OfeO4, khử nước gradient axeton, nhúng Epon 812, chì-uranium nhuộm điện tử, kính hiển vi điện tử truyền qua Hitachi H -300 với độ phóng đại 10, 000 đến 20, 000 Quan sát sự thay đổi và biến đổi cấu trúc của các bào quan chính dưới bội số.

2.5 Kết quả xử lý thống kê được biểu thị bằng hàng chục s đất và việc so sánh hai phương tiện mẫu sử dụng phép thử t.

3. Kết quả

3.1 Tác dụng của Polysaccharide từ Cistanche đối với khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy ở chuột già

Một giờ sau lần dùng cuối cùng của những con chuột trong mỗi nhóm, thời gian chịu đựng tình trạng thiếu oxy đã được kiểm tra. Kết quả cho thấy thời gian những con chuột già có thể chịu đựng được tình trạng thiếu oxy ngắn hơn đáng kể so với những con chuột bình thường. Thời gian kéo dài đáng kể so với nhóm mô hình, nhưng không có sự khác biệt đáng kể so với nhóm đối chứng, cho thấy Polysaccharide từ Cistanche có thể cải thiện đáng kể khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy của chuột già, xem Bảng 1

3.2 Tác dụng của Cistanche polysaccharide đối với chức năng chống oxy hóa của chuột lão hóa

Máu (huyết thanh) và mô phổi (phổi đồng nhất) của những con chuột trong mỗi nhóm được thu thập sau lần sử dụng cuối cùng, và SOD và MDA được xác định. Kết quả Hoạt động SOD trong huyết thanh và phổi của chuột già giảm, và hàm lượng MDA tăng lên. So với nhóm đối chứng, sự khác biệt là đáng kể. Polysaccharides từ Cistanche có thể làm tăng hoạt động của SOD trong huyết thanh và phổi ở những con chuột lão hóa, và làm giảm hàm lượng MDA. So với nhóm đối chứng, không có sự khác biệt đáng kể và sự khác biệt với nhóm mô hình già hóa là đáng kể, xem Bảng 2 & 3.

3.3 Ảnh hưởng của Polysaccharide từ Cistanche đối với bóng tối nội bào của tế bào biểu mô phế nang⑷

Phương pháp sản xuất kính hiển vi điện tử vẫn giống như trước đây. Phân tích hình thái: Dưới kính hiển vi điện tử, mỗi mẫu vật được quan sát trong 10 trường nhìn để đo các bào quan. Kết quả cho thấy, các ty thể và thể lam của nhóm mô hình bị tiêu giảm, màng đáy dày lên và tăng các polysome. So với nhóm đối chứng, có sự khác biệt đáng kể. Polysaccharides từ nhóm Cistanche liều cao đã cải thiện nó. So với nhóm mô hình, sự khác biệt là đáng kể và về cơ bản nó gần với nhóm đối chứng. Xem Tab 4.

3.4 Những thay đổi trong cấu trúc siêu tế bào biểu mô phổi ở chuột lão hóa thực nghiệm và ảnh hưởng của polysaccharid Cistanche

Chuột mô hình lão hóa có thể được nhìn thấy dưới kính hiển vi điện tử: tế bào biểu mô phế nang loại I là một lớp đơn loại dẹt với độ dày khoảng {{0}}. 2 giờ chiều. Hạt nhân nhỏ và đặc. Có một vài ti thể, phức hợp Golgi, và lưới nội chất rải rác trong tế bào chất quanh nhân. Tương đối thưa thớt, có ít vi sợi và vi ống hơn. Những thay đổi mô học của phổi của những con chuột già được quan sát dưới kính hiển vi điện tử. Những thay đổi chính là tế bào biểu mô phế nang loại II. Các vi nhung mao trên bề mặt tự do của tế bào giảm hoặc biến mất, các thể phiến bị yếu đi, cấu trúc phiến bị mờ, một số ít tế bào có các tế bào hình phiến nhỏ. Cơ thể biến mất, và nó là một chất giống dải vô định hình rỗng hoặc đồng nhất với mật độ điện tử thấp. Ti thể và lưới nội chất thô bị tiêu giảm trong cơ thể tế bào. Màng đáy của các tế bào biểu mô phế nang dày lên rõ ràng, và sự tăng sinh của các tế bào màng và nguyên bào sợi có thể được nhìn thấy trong khoảng kẽ phế nang (Hình 1,2). Mặc dù màng nhân bên trong và sự phồng lên của ty thể được nhìn thấy ở nhóm Cistanche polysaccharide, mức độ đã giảm đáng kể so với nhóm mô hình (Hình 3.4). Quan sát dưới kính hiển vi điện tử của nhóm thuốc cho thấy tế bào biểu mô loại phẳng, bề mặt nhẵn, không có nhân, một số dày khoảng 0,1. Có một vài bào quan trong nhân, và có thể nhìn thấy các hạt radium. Tế bào loại II có nhung mao ngắn trên bề mặt, một số lượng lớn các ti thể, lưới nội chất thô và phức hợp Golgi trong tế bào chất (Hình 5,6)

Mô hình lão hóa do tác hại của tầng ozone dựa trên lý thuyết lão hóa gốc tự do. Tổn thương gốc tự do oxy đóng một vai trò quan trọng trong quá trình lão hóa phổi. Phổi là cơ quan duy nhất giao tiếp với môi trường bên ngoài. Trong một khoảng thời gian nhất định, động vật liên tục được hít phải khí ôzôn. Phổi là bộ phận đầu tiên tiếp xúc với ozone và dễ bị tổn thương nhất. Sau khi ozone đi vào cơ thể, nó nhanh chóng tạo ra các gốc tự do anion superoxide hoạt động mạnh. Các gốc tự do dư thừa vượt quá khả năng lọc của cơ thể, phá hủy và tiêu thụ các enzym thu gom gốc tự do (như SOD) trong cơ thể, sau đó khiến các cơ quan và thậm chí cả cơ thể bị lão hóa. Trong thí nghiệm này, khả năng chống thiếu oxy của chuột lão hóa do ozone giảm đáng kể, hoạt tính của chất chống oxy hóa SOD trong huyết thanh và mô phổi giảm, và chất chuyển hóa peroxy hóa lipid MDA tăng lên đáng kể. Với việc sử dụng Rongrong Duojing 50,100 mg-kg1 truyền liên tục trên những con chuột già thí nghiệm, những con chuột già có khả năng chịu đựng tình trạng thiếu oxy rõ ràng Tăng lên, hoạt động của superoxide dismutase để loại bỏ các gốc tự do được tăng cường. Hàm lượng các chất chuyển hóa peroxy hóa lipid bị giảm xuống, cho thấy polysaccharid từ Cistanche có thể tăng cường chức năng chống oxy hóa của chuột lão hóa.

Các thể lam trong tế bào chất của tế bào biểu mô loại n phế nang thường được sử dụng để đo chức năng của tế bào biểu mô. Chất tiết của các thể phiến đói được gọi là chất hoạt động bề mặt phế nang, tồn tại ở mặt phân cách không khí-lỏng của phế nang và có thể làm giảm sức căng bề mặt của phế nang. Sự thay đổi lão hóa của các thể phiến có thể dẫn đến giảm các chất hoạt động bề mặt phế nang. Sức căng bề mặt của phế nang tương đối cao, và lực rút của phế nang tăng lên, dẫn đến co rút phế nang. Các quan sát bằng kính hiển vi điện tử cho thấy các tế bào biểu mô phế nang loại n của những con chuột lão hóa đã thay đổi đáng kể. Có thể thấy rằng các tiểu thể phiến bị yếu đi, cấu trúc bị mờ đi, các ty thể bị sưng và tiêu giảm, lưới nội chất thô ráp cũng giảm, màng đáy dày lên rõ rệt. Mặc dù những thay đổi cấu trúc tương tự có thể được nhìn thấy sau khi sử dụng Polysaccharide từ Cistanche, mức độ giảm đáng kể, cho thấy rằng Polysaccharide từ Cistanche có thể cải thiện đáng kể hoặc trì hoãn những thay đổi thoái hóa hình thái trong cơ thể tế bào biểu mô phổi và thoái hóa ty thể ở chuột già. Hầu hết cấu trúc tế bào về cơ bản là nguyên vẹn, trì hoãn những thay đổi của siêu cấu trúc phổi. Kết quả của nghiên cứu này cho thấy rằng polysaccharides từ Cistanche có thể làm giảm những thay đổi về cấu trúc và chức năng do tổn thương oxy hóa phổi do ozone gây ra, làm chậm quá trình lão hóa phổi và cung cấp bằng chứng thực nghiệm cho nghiên cứu ứng dụng.