Ý nghĩa dự đoán của biểu hiện protein 8 liên quan đến tủy thận ở bệnh nhân béo phì hoặc bệnh thận liên quan đến tiểu đường loại 2
Mar 16, 2022
Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Takashige Kuwabara1, Kiyoshi Mori1,2*, Masato Kasahara1,3, Hideki Yokoi1, Hirotaka Imamaki1, Akira Ishii1, Kenichi Koga1, Akira Sugawara4, Shinji Yasuno3, Kenji Ueshima3, Takashi Morikawa5, Yoshio Konishi5, Masahito Imanishi5, Akira Nishiyama6, Kazuwa Nakao1,2, Masashi Mukoyama1
1Khoa Y học và Khoa học Lâm sàng, Trường Cao học Y khoa Đại học Kyoto, Kyoto, Nhật Bản,
2Trung tâm Đổi mới Y tế, Cao học Đại học Kyoto Trường Y, Kyoto, Nhật Bản,
3Phòng Nghiên cứu EBM, Viện Tiến bộ Khoa học Lâm sàng và Dịch thuật, Bệnh viện Đại học Kyoto, Kyoto, Nhật Bản,
4Khoa Thận, Bệnh viện Chữ thập đỏ Osaka, Osaka, Nhật Bản,
5 Khoa Thận và Tăng huyết áp, Bệnh viện Đa khoa Thành phố Osaka, Osaka, Nhật Bản,
6 Khoa Dược, Trường Y Đại học Kagawa, Kagawa, Nhật Bản
trừu tượng
Cơ sở và Mục tiêu: Chúng tôi đã báo cáo rằng thụ thể giống số 4 (TLR4) và một trong những phối tử nội sinh của nó, protein 8 liên quan đến dòng tủy (MRP8 hoặc S100A8), đóng một vai trò quan trọng trong sự tiến triển của bệnh thận đái tháo đường ở chuột. Mục đích của nghiên cứu này là đánh giá tầm quan trọng củaquả thậnBiểu hiện MRP8 ở bệnh nhânbéo phì- hoặc liên quan đến bệnh tiểu đường loại 2bệnh thận. Phương pháp: Ở đối tượng mắc bệnh tiểu đường, béo phì hoặc đối chứng, mRNA MRP8 và mức độ biểu hiện protein trong mẫu sinh thiết thận được xác định bằng RT-PCR thời gian thực và hóa mô miễn dịch (n=28 và 65, tương ứng), và mối liên quan của chúng với cơ sở và các thông số tiên lượng đã được phân tích. Ảnh hưởng của MRP8 đối với các biểu hiện gen gây viêm đã được kiểm tra bằng cách sử dụng đại thực bào. Kết quả:Quả thậnMức độ biểu hiện gen và protein MRP8 tăng ở nhóm béo phì hoặc tiểu đường so với nhóm đối chứng. Trong số tất cả các đối tượng, bằng phân tích hồi quy tuyến tính đơn biến, MRP cầu thận 8- số lượng tế bào dương tính và MRP tế bào mô tế bào 8- dương tính tại điểm ban đầu, tương ứng, không chỉ tương quan với các yếu tố nguy cơ đã biết khác nhau đối với bệnh thận đái tháo đường (chẳng hạn như huyết áp tâm thu, protein niệu và creatinin huyết thanh) mà còn với mức độ xơ cứng cầu thận và xơ hóa mô kẽ. Các yếu tố độc lập dự đoán nồng độ protein trong nước tiểu một năm sau đó đã được kiểm tra bằng phân tích đa biến, và chúng bao gồm số lượng tế bào MRP ở cầu thận 8- dương tính (b=0. 59, P, 0. 001), protein niệu (b=0. 37, P=0. 002) và huyết áp tâm thu (b=0. 21, P=0. 04) tại thời điểm ban đầu, sau khi điều chỉnh nguy cơ đã biết các nhân tố. Biểu hiện MRP8protein được quan sát thấy trong các đại thực bào dương tính và các ống teo của CD 68-. Trong các đại thực bào chuột được nuôi cấy, các biểu hiện cytokine tiền viêm do protein MRP8 gây ra cũng kích hoạt tự động cảm ứng MRP8 theo cách phụ thuộc TLR 4-.
Kết luận: Biểu hiện MRP8 ở cầu thận có vẻ liên quan đến sự tiến triển của protein niệu ở bệnh nhân béo phì hoặc đái tháo đường týp 2, có thể do gây ra những thay đổi viêm trong đại thực bào thông qua tín hiệu TLR4.
Tác dụng của cây trạch tả: chữa các bệnh về thận
Giới thiệu
Viêm mãn tính đóng một vai trò quan trọng trong cơ chế bệnh sinh của bệnh tiểu đường hoặcbéo phìvà các biến chứng tim mạch của nó [1]. Có liên quan đến sự tham gia của các thụ thể miễn dịch bẩm sinh và các phối tử nội sinh trong quá trình viêm mãn tính. Protein 8 liên quan đến dòng tủy (MRP8, còn được gọi làS100A8 hoặc calgranulin A) ban đầu được xác định là một protein liên kết với canxi trong tế bào chất trong bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân [2] và đã được công nhận rộng rãi như một phối tử nội sinh mạnh đối với thụ thể giống số 4 (TLR4 ) trong các bệnh khác nhau bao gồm sốc nhiễm trùng, rối loạn mạch máu và tự miễn dịch [3,4,5]. Gần đây chúng tôi đã đề xuất rằng tín hiệu MRP8 / TLR4 đóng một vai trò quan trọng trong sự tiến triển do tăng lipid máu của bệnh thận do đái tháo đường [6]. Đại thực bào cầu thận và tế bào ống góp là nguồn chính của MRP8 trong các mô hình chuột bị bệnh thận do đái tháo đường [6] và bệnh xơ hóa thận [7], tương ứng. Nồng độ MRP8 trong huyết tương, thường tạo thành phức hợp dị phân tử với đối tác liên kết MRP14 trong máu, tăng lên ở những đối tượng béo phì [8,9]. Tuy nhiên, không có báo cáo nào điều tra về biểu hiện thận của MRP8 ở bệnh nhân béo phì hoặcloại hình2 bệnh tiểu đườngvà mối liên quan của nó với tiên lượng thận.
Mục đích của nghiên cứu này là xác định mức độ biểu hiện mRNA và protein của MRP8 trongquả thậnbệnh nhân Nhật Bản bị bệnh thận do đái tháo đường (DN),béo phì- bệnh cầu thận liên quan (ORG), hội chứng thận hư thay đổi tối thiểu (MCNS) hoặc bất thường cầu thận nhỏ (MGA), tất cả đều được chẩn đoán bằng sinh thiết thận và để đánh giá xem biểu hiện MRP8 ở thận có thể dự đoán kết quả thận hay không.
Cistanche có thể cải thiện chức năng thận
Nguyên liệu và phương pháp
Chuẩn mực đạo đức
Nghiên cứu trên người được thực hiện theo các nguyên tắc được nêu trong Tuyên bố Helsinki và đã được sự chấp thuận của Ủy ban đạo đức về Nghiên cứu con người của Đại học Kyoto, Trường Đại học Y khoa và Bệnh viện Đa khoa Thành phố Osaka. Tất cả những người tham gia đã đồng ý bằng văn bản. Đề cương nghiên cứu trên động vật đã được Ủy ban Nghiên cứu Động vật của Trường Đại học Y khoa Đại học Kyoto phê duyệt (Số giấy phép: Med Kyo 13318). Tất cả các cuộc phẫu thuật cho con vật đều được thực hiện dưới phương pháp gây mê natri pentobarbital, và mọi nỗ lực đã được thực hiện để giảm thiểu đau khổ.
Môn học
Bệnh nhân proteinuric vớibéo phìhoặc bệnh tiểu đường loại 2 đã trải qua sinh thiết thận được ghi danh vào nghiên cứu này. Bệnh nhân mắc bệnh truyền nhiễm, ung thư, bệnh gan hoặc bệnh collagen đã được loại trừ. Protein niệu được định nghĩa là protein niệu lớn hơn 0. 5 g / g creatinine hoặc albumin niệu lớn hơn 300 mg / g creatinine trong ít nhất hai lần đo liên tiếp.Béo phìđược định nghĩa là chỉ số khối cơ thể (BMI) lớn hơn 25. 0 (kg / m2). Bệnh tiểu đường loại 2 được chẩn đoán theo các tiêu chí của Tổ chức Y tế Thế giới. Các phép đo sinh hóa khi nhập viện để sinh thiết thận được sử dụng làm đặc điểm cơ bản để phân tích mặt cắt. Mức lọc cầu thận ước tính (eGFR) được tính toán bằng một phương trình dự đoán đơn giản do Hiệp hội Thận học Nhật Bản đề xuất: eGFR (ml / phút / 1,73 m2)=1946 [age (years)] 20. 287 6 [serum creatinine (mg perdl)] 21. 094 60. 739 (dành cho nữ), là một biến đổi cục bộ đã được xác thực của MDRD [ 10]. Nồng độ creatinine trong huyết thanh được đo bằng phương pháp enzym.
Đối với hóa mô miễn dịch, 65 bệnh nhân Nhật Bản đã trải qua sinh thiết thận tại Khoa Y học và Khoa học Lâm sàng, Bệnh viện Đại học Kyoto từ năm 2000 đến năm 2011 đã được phân tích. Các chẩn đoán đã được chứng minh bằng sinh thiết của tất cả bệnh nhân trong giai đoạn này được liệt kê trong Bảng S1 trong Tập tin S1. Các đối tượng được kiểm tra trong nghiên cứu này bao gồm DN (n=19), ORG (n=10) và đối tượng kiểm soát không béo phì, không mắc bệnh tiểu đường đã được chẩn đoán là MGA (n=19) hoặc MCNS (n=17). Một số trường hợp trong các danh mục này đã bị loại trừ vì các mẫu còn lại có sẵn chứa ít hơn 10g chất đồng phân. Định nghĩa DN bao gồm (1) thời gian kéo dài hơn 5 năm sau khi khởi phát bệnh tiểu đường, (2) tồn tại albumin niệu vi mô hoặc vĩ mô, (3) các thay đổi mô bệnh học tương thích với DN như dày màng đáy cầu thận, giãn nở trung bì, nốt bệnh xơ cứng (nốt Kimmelstiel-Wilson) và / hoặc chứng hyalinosis của tiểu động mạch, và (4) loại trừ các nguyên nhân khác gây rối loạn thận [11]. ORG được định nghĩa về mặt hình thái là xơ cứng cầu thận phân đoạn khu trú và / hoặc cầu thận to ở những đối tượng có cả haibéo phìvà protein niệu, mà các định nghĩa đã được mô tả ở trên [12,13].
Đối với phân tích biểu hiện mRNA, các mẫu chất lượng thấp, trong đó mức RNA ribosome (rRNA) 18S thấp hơn giới hạn độ nhạy phát hiện bằng RT-PCR thời gian thực, đã bị loại trừ. Các đối tượng tham gia bao gồm 22 bệnh nhân tiểu đường loại 2 đã trải qua sinh thiết thận tại Bệnh viện Đa khoa Thành phố Osaka từ năm 2000 đến 2010, và 6 đối tượng kiểm soát không mắc bệnh tiểu đường, những người đã được chứng minh bằng sinh thiếtMGA.
Bảng 1 và 2 tóm tắt các đặc điểm lâm sàng cơ bản của những bệnh nhân được kiểm tra tương ứng bằng phân tích biểu hiện gen hoặc mô hóa miễn dịch. Đối với kính hiển vi ánh sáng, các mẫu mô được xử lý theo quy trình tiêu chuẩn. Các phần được nhuộm bằng hematoxylin-eosin, axit tuần hoàn-Schiff, bạc methenamine axit tuần hoàn hoặc Masson trichrome (Hình S1). Tỷ lệ số lượng cầu thận bị xơ cứng toàn cầu giữa tổng số cầu thận và các diện tích tương đối của xơ hóa mô kẽ được đánh giá độc lập bởi hai nhà bệnh lý học không biết về chẩn đoán và dữ liệu lâm sàng.
Tác dụng của cây trạch tả: chữa các bệnh về thận
Định nghĩa kết quả thận
Hai chỉ số tiên lượng sau đây được kiểm tra bằng phân tích hồi quy tuyến tính và hồi quy logistic, tương ứng: (1) mức độ protein niệu đo được sau sinh thiết một năm, và (2) biến cố thận được xác định là sự gia tăng hàng năm của creatinin huyết thanh 50%. từ cơ sở hoặc bắt đầu lọc máu mãn tính.
Hóa mô miễn dịch
Hóa mô miễn dịch của MRP8 và CD68 được thực hiện bằng cách sử dụngquả thậncác phần (độ dày 4 mm) được cố định bằng 4% paraformaldehyde có đệm. Sau khi thu hồi kháng nguyên bằng đệm citrate, các phần thận được ủ với 10% huyết thanh dê, tiếp theo là MRP8 kháng người (1: 100; BMA biomedicals, Augst, Thụy Sĩ) [14] hoặc kháng thể kháng CD68 của chuột (1:50 ; DAKO, Ely, UK), tương ứng. Các kháng thể chính được hình dung bằng kháng thể thứ cấp liên hợp với peroxidase củ cải ngựa và 3, 3- diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako USA, Carpinteria, CA). Các hạt nhân bị phản ứng với hematoxylin. Các tế bào MRP 8- dương tính được đếm trong hơn 10 cầu thận và vùng MRP 8- dương tính trong tubulointerstitium được đo định lượng để thu được mức trung bình cho mỗi đối tượng bằng cách sử dụng phần mềm MetaMorph 7.5 (Molecular Devices, Downingtown, PA, USA ). Định vị các ô dương tính của CD 68- và MRP 8- được đánh giá bằng các phần nối tiếp. Không có tín hiệu MRP8 và CD68 trong các đối chứng âm tính được nhuộm mà không có kháng thể đầu tiên (Hình S2). Bằng cách ủ trước kháng thể kháng MRP8 với lượng dư thừa 20 mol của protein MRP8 tái tổ hợp ở người (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) ở 4uC qua đêm, sự nhuộm màu giảm rõ rệt, nếu không phải là hoàn toàn, hỗ trợ thêm cho tính đặc hiệu của kháng thể (Hình 3) .
Cistanche để điều trị thận
Đánh giá biểu hiện mRNA
Đông cứngquả thậncác phần được phân tách thành các mô cầu thận và không cầu thận bằng phương pháp vi phẫu thuật bắt tia laze (LM200; Olympus, Tokyo, Nhật Bản) như đã mô tả trước đây [15]. RNA tổng số được chiết xuất bằng kit mini RNeasy (Qiagen, Tokyo, Nhật Bản). Mức độ biểu hiện của mRNA được xác định bằng phương pháp PCR thời gian thực TaqMan (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) [16,17]. Mức độ biểu hiện của tất cả các gen được bình thường hóa bởi mức rRNA 18S (kiểm soát nội bộ). Xem Bảng S2 trong Tập tin S1 để biết trình tự mồi và mẫu dò. RNA 18S của sinh vật nhân chuẩn được phát hiện bằng Thuốc thử xét nghiệm TaqMan được phát triển trước (Hệ thống sinh học ứng dụng).
Bảng 1. Đặc điểm lâm sàng cơ bản của bệnh nhân khi sinh thiết thận được phân tích biểu hiện protein MRP8 bằng hóa mô miễn dịch.
MGA: bất thường cầu thận nhỏ, MCNS: hội chứng thận hư thay đổi tối thiểu, ORG:béo phì- bệnh cầu thận liên quan, DN: bệnh thận do đái tháo đường, BMI: chỉ số khối cơ thể, BUN: nitơ urê máu, CRP: protein phản ứng C. Dữ liệu có nghĩa là 6 SD. * Sự khác biệt tổng thể giữa các nhóm MGA, MCNS, ORG và DN được so sánh bởiANOVA.doi: 10.1371 / journal.pone.0088942.t001
MRP8 điều trị đại thực bào
Đại thực bào có nguồn gốc từ tủy xương được tạo ra từ chuột loại hoang dã hoặc TLR4 (KO) [18] trên nền tảng di truyền C57BL / 6J (Oriental BioService, Kyoto, Japan) như đã mô tả trước đây [6]. Tóm lại, sau quá trình ly giải tế bào hồng cầu, các tế bào tủy xương được tiếp tục trong môi trường chứa 20% huyết thanh bê thai nhi và 50 ng / ml yếu tố kích thích đại thực bào tái tổ hợp ở người (Peprotech, Rocky Hill, NJ, Hoa Kỳ), và được nuôi cấy tại 37uC trong khí quyển 5 phần trăm CO2. Vào ngày thứ 7, đại thực bào được ủ với chuột tái tổ hợp MRP8 (Abnova, Đài Bắc, Đài Loan) hoặc xe trong 4 giờ. Polymyxin B (25 mg / ml, NacalaiTesque, Kyoto, Nhật Bản) được thêm vào mỗi giếng để giảm thiểu ô nhiễm nội độc tố như đã mô tả trước đây [3,19]. Noendotoxin được phát hiện ở bất kỳ nồng độ MRP8 nào được thử nghiệm sau khi ủ với 25 mg / ml polymyxin B bằng Bộ xét nghiệm nội độc tố ToxinSensorChromogenic LAL (GenScript, Piscataway, NJ, USA). RNA tổng số từ các tế bào được chiết xuất bằng RNeasy MiniKit và mức độ biểu hiện mRNA của interleukin -1 beta (IL {-1 b), yếu tố hoại tử khối u-alpha (TNFa) và MRP8 được xác định bởi TaqMan theo thời gian thực RT-PCR. Mức độ biểu hiện của tất cả các gen được bình thường hóa bằng mức GAPDH của loài gặm nhấm (kiểm soát nội bộ, Thuốc thử TaqMan được phát triển trước). Trình tự Primer và Probe cho PCR thời gian thực được liệt kê trong Bảng S2 trong Tệp S1.
Phân tích thống kê
Dữ liệu được biểu thị dưới dạng trung bình 6 SD, hoặc nghĩa là khoảng tin cậy 695 phần trăm (CI) khi thích hợp. Để so sánh giữa bốn nhóm, ANOVA một chiều hoặc hai chiều với phân tích post-hoc của Bonferroni đã được sử dụng và các biến phân loại được so sánh bằng phép thử x2. Bài kiểm tra t không ghép đôi của học sinh được áp dụng để so sánh giữa hai nhóm sao cho phù hợp. Hệ số tương quan Spearman được ước tính để xác định mối liên hệ giữa hai biến. Để kiểm tra ảnh hưởng của các hiệp biến cơ bản xác định mức độ biểu hiện MRP8 ở cầu thận hoặc mô kẽ hoặc nồng độ protein trong nước tiểu một năm sau sinh thiết, các phân tích hồi quy tuyến tính đơn biến và đa biến đã được thực hiện. Phân tích hồi quy logistic được sử dụng để phân tích các biến giải thích dự đoán sự xuất hiện của các biến cố thận. Tất cả dữ liệu được phân tích bằng phần mềm StatView 5. 0 (SAS InstituteInc., Cary, NC, USA). Giá trị P, 0. 05 được coi là có ý nghĩa thống kê.
Tác dụng của cây trạch tả: chữa các bệnh về thận
Kết quả
Chúng tôi đã so sánh mức độ biểu hiện protein MRP8 trongquả thậngiữa các nhóm DN, ORG, và nhóm kiểm soát không béo phì, không tiểu đường (MGA và CNS). Phân tích hóa mô miễn dịch cho thấy cả số lượng tế bào dương tính MRP 8- cầu thận (Hình 1A) và vùng dương tính MRP 8- tubulointerstitial (Hình 1B) ở DN lớn hơn đáng kể so với các nhóm khác bao gồm MGA, MCNS, và ORG (P<0.01). org="" subjects="" also="" showed="" a="" tendency="" of="" elevated="" mrp8expression="" compared="" to="" mga="" and="" mcns="" (fig.="" 1a,="" 1b).="" furthermore,="" glomerular="" mrp8="" mrna="" expression="" levels="" in="" dn="" subjects="" were="" significantly="" higher="" compared="" to="" non-dm="" control="" subjects="" (p,0.01,="" fig.="" 1c).="" in="" non-glomerulus="" tissues,="" mrp8mrna="" expression="" levels="" were="" much="" lower="" than="" those="" in="" glomeruli,="" both="" in="" non-dm="" and="" dm="" groups.="" abundant="" mrp8="" protein="" expression="" in="" the="" tubulointerstitium="" of="" dn="" cases="" was="" not="" clearly="" reflected="" into="" increased="" mrna="" expression,="" which="" may="" be="" partly="" caused="" by="" deposition="" of="" blood-derived="" proteins="" in="" the="" tubulointerstitium="" as="" discussed="" in="" the="" next="" section.="" as="" shown="" in="" representative="" photos="" (fig.="" 1d–g,="" see="" fig.="" s4="" in="" detail),="" renal="" biopsy="" samples="" from="" mga="" and="" mcns="" subjects="" showed="" few="" mrp8-positive="" cells="" in="" glomeruli="" (fig.="" 1d,="" 1e="" and="" fig.="" s4).="" in="" org="" subjects,="" somemrp8-positive="" cells="" appeared="" in="" glomeruli="" and="" tubulointerstitium(fig.="" 1f="" and="" fig.="" s4).="" in="" dn="" subjects,="" a="" marked="" increase="" of="" mrp8-expressing="" cells="" in="" glomeruli="" and="" significant="" expansion="" of="" mrp8-positive="" areas="" in="" the="" tubulointerstitium="" were="" observed="" in="" a="" focal="" manner="" (fig.="" 1g="" and="" fig.="" s4).="" of="" note,="" mrp8-positive="" cells="" were="" absent="" in="" nodular="" sclerosing="" lesions="" of="" diabetic="" glomeruli="" (fig.="" s4:dn="" case="" 2,="" 3)="" as="" described="" previously="" for="" sclerotic="" lesions="" in="" anca-associated="" glomerulonephritis="" [20].="" paired="" immunohistochemistry="" for="" cd68="" and="" mrp8="" in="" serial="" sections="" suggested="" thatmrp8="" signals="" were,="" at="" least="" in="" part,="" observed="" in="" macrophages="" expressing="" cd68="" (fig.="" 2),="" as="" we="" reported="" in="" a="" mouse="" model="" of="" diabetic="" nephropathy="" [6].="" besides,="" focally="" injured="" atrophic="" tubular="" epithelial="" cells="" also="" strongly="" expressed="" mrp8,="" which="" were="" surrounded="" by="" mrp8(+)-,="" cd68(+)-positive="" macrophages="" (fig.="" 2,="" fig="" s4:="" dn="" case="" 3-5).="" in="" the="" cases="" with="" nephrotic="" range="" proteinuria,="" mrp8="" staining="" was="" also="" observed="" along="" brush="" borders="" of="" proximal="" tubules="" both="" in="" mcns="" and="" dn="" cases="" (fig.="" s4).="" since="" the="" sample="" number="" of="" mrna="" expression="" was="" too="" small="" for="" multivariate="" analysis,="" the="" following="" analyses="" were="" performed="" using="" data="" from="" patients="" studied="" by="">
Bảng 2. Đặc điểm lâm sàng cơ bản của bệnh nhân khi sinh thiết thận được phân tích biểu hiện mRNA MRP8 bằng RT-PCR thời gian thực.
Mối liên hệ giữaquả thậnCác tín hiệu MRP8 và các thông số lâm sàng cơ bản tại thời điểm sinh thiết thận được phân tích cắt ngang (Bảng 3). Bằng cách phân tích đơn biến, biểu hiện protein MRP8 ở cầu thận và / hoặc mô tế bào tuỷ có tương quan đáng kể với tuổi tác, huyết áp tâm thu và huyết áp tâm trương, protein niệu, nồng độ creatinine, BUN và HDL cholesterol, eGFR, và mức độ xơ cứng cầu thận toàn cầu và xơ hoá mô ống tuỷ. Các thông số này được kiểm tra thêm bằng phân tích đa biến sau khi loại trừ huyết áp tâm trương, eGFR và BUN vì tính cộng tuyến. Tỷ lệ phần trăm xơ hóa mô kẽ có tương quan độc lập với tín hiệuMRP8 của cầu thận (b=0. 62, điều chỉnh P=0. 0 2) và tín hiệu tubulointerstitialMRP8 (b=0. 85, điều chỉnh P , 0,001), tương ứng. Ngoài ra, các tín hiệu MRP8 ở mô tế bào cũng tương quan độc lập với protein niệu ban đầu (b=0. 20, P=0. 01 đã được điều chỉnh). một kiểu phân bố khác biệt với các nhóm khác, đặc biệt là đối với protein nước tiểu và mức cholesterol LDL trong huyết thanh (Hình. S5A – D, S6A – D). Loại trừ nhóm MCNS đã cải thiện mối tương quan giữa tín hiệu MRP8 và protein nước tiểu hoặc mức LDL-cholesterol huyết thanh (Hình. S5E – F, S6E – F). Do đó, chúng tôi đã thực hiện một phân tích phụ loại trừ bệnh nhân MCNS và nhận thấy rằng protein trong nước tiểu là một yếu tố độc lập tương quan với tín hiệuMRP8 của cầu thận bằng phân tích đa biến (Bảng 4; b=0. 36, điều chỉnh P=0. 03 ).
Tiếp theo, chúng tôi thực hiện phân tích hồi quy tuyến tính hoặc hồi quy logistic để xác định các yếu tố giải thích dự đoán kết quả thận là mức độ protein niệu một năm sau đó và biến cố thận trong vòng một năm. Vì có mối liên hệ tốt giữa các tín hiệu MRP8 ở mô cầu thận và mô tuỷ (Hình. S7; R=0. 67, P, 0. 0 01), các thông số này được đưa vào các phân tích sâu hơn. . Chúng tôi đánh giá mối liên quan giữa các thông số cơ bản và protein niệu ở thời điểm 1 năm sau sinh thiết thận bằng phân tích hồi quy bội. Như được trình bày trong Bảng 5, tín hiệu MRP8 ở cầu thận (b=0. 59, P hiệu chỉnh, 0,001) là yếu tố dự đoán mức độ protein niệu một năm sau đó, cũng như huyết áp tâm thu ban đầu (b {{13} } .21, điều chỉnh P=0. 04) và protein niệu ban đầu (b=0. 37, điều chỉnh P=0. 002) là. Các thông số này độc lập với các yếu tố nguy cơ bệnh thận đái tháo đường khác bao gồm rối loạn chức năng thận (creatinin huyết thanh) và mức độ xơ cứng toàn cầu và xơ hóa mô kẽ [11,21–24]. Mặt khác, tín hiệu MRP8 mô đệm (b=0. 34, đã điều chỉnh P=0. 09) không phải là một yếu tố dự đoán độc lập về nồng độ protein trong nước tiểu một năm sau đó. Các biến cố về thận xảy ra ở 7 bệnh nhân (6 ở DN và 1 ở ORG) trong vòng một năm sau khi sinh thiết thận. Bằng cách phân tích đơn biến, không chỉ mức độ xơ cứng cầu thận và xơ hóa mô ống thận, và các tín hiệu MRP8 cầu thận và mô ống thận, mà còn cả huyết áp, rối loạn chức năng thận và nồng độ protein trong nước tiểu tại thời điểm ban đầu là những yếu tố dự báo quan trọng cho sự xuất hiện của các biến cố thận. Tuy nhiên, bằng cách phân tích đa biến, các hiệp biến của chúng đã bị loại bỏ lẫn nhau (Bảng S3 trong Tập tin S1), có thể là do sự tương quan cao giữa các tham số này.
Cuối cùng, chúng tôi đã kiểm tra hiệu lực của MRP8 như một phối tử nội sinh cho TLR4 bằng cách sử dụng các đại thực bào được nuôi cấy. Ở các đại thực bào có nguồn gốc từ tủy xương từ chuột hoang dã, sự điều hòa do protein MRP8 gây ra đối với các gen cytokine tiền viêm như IL -1 b vàTNFa và cũng kích hoạt tự động cảm ứng MRP8, theo cách phụ thuộc vào liều lượng giữa 1 {{ 15}} - 1000 ng / ml. Những tác động này củaMRP8 đã bị triệt tiêu khoảng 2/3 trong các đại thực bào thu được từ chuột TLR4 KO (P, 0,01) (Hình 3).
Hình 1. Phân tích mô miễn dịch và mRNA cho MRP8 trongquả thậnmẫu sinh thiết. Định lượng MRP cầu thận {{0}} số lượng tế bào dương tính (A) và MRP tế bào mô tế bào 8- dương tính (B). mRNA biểu hiện của MRP8 trong các phân đoạn cầu thận và không cầu thận (C). Thanh mở: kiểm soát không béo phì, không tiểu đường là MGA hoặc MCNS, thanh đóng: ORG hoặc DN (A – C). Hình ảnh đại diện của các nhóm MGA, MCNS, ORG và DN (D – G). MGA: bất thường cầu thận nhỏ, MCNS: hội chứng thận hư thay đổi tối thiểu, ORG: bệnh cầu thận liên quan đến béo phì, DN: bệnh thận do tiểu đường. * P, 0.01.doi: 10.1371 / journal.pone.0088942.g001
Thảo luận
Nghiên cứu hiện tại đã chứng minh rằng MRP8 được biểu hiện nhiều trong tiểu cầu thận và tubulointerstitium của bệnh nhân bị DNas so với ORG và nhóm kiểm soát không béo phì, không tiểu đường (MGAand MCNS). Hơn nữa, trong đối tượng ORG, mức độ biểu hiện MRP8 có xu hướng cao hơn đối tượng MGA hoặc MCNS. Trong điều tra cắt ngang cơ bản bao gồm tất cả các đối tượng, bằng phân tích hồi quy tuyến tính đơn biến, MRP cầu thận 8- số lượng tế bào dương tính và MRP mô tế bào thận 8- dương tính cả hai đều tương ứng không chỉ với các yếu tố nguy cơ đã biết khác nhau đối với bệnh thận do đái tháo đường (chẳng hạn như huyết áp tâm thu, protein niệu và creatinin huyết thanh) mà còn với mức độ xơ cứng cầu thận và xơ hóa mô kẽ. Bằng phân tích đa biến, vùng dương tính của MRP 8- tubulointerstitial có tương quan đáng kể với protein niệu và xơ hóa mô ống tubulointerstitial. Số lượng tế bào dương tính MRP 8- cầu thận có tương quan đáng kể với xơ hóa mô kẽ trong phân tích chính và với protein niệu trong phân tích phụ loại trừ nhóm MCNS. Hóa mô miễn dịch chỉ ra rằng MRP8 được biểu hiện, ít nhất một phần, bởi CD68 (cộng) biểu hiện đại thực bào và các ống teo. Những phát hiện này làm tăng khả năngquả thậnTín hiệu MRP8 trong cầu thận hoặc tubulointerstitium có thể đóng vai trò là dấu hiệu mới của bệnh thận do đái tháo đường.
Hình 2. Bản địa hóa biểu hiện protein CD68 và MRP8 trong các phần nối tiếp của các trường hợp bệnh thận do đái tháo đường. Biểu hiện CD68 (A, B) và biểu hiện MRP8 (C, D) trong các mẫu thận ghép (A và C, orB và D). Các mũi tên chỉ ra sự chỉnh màu của tín hiệu CD68 và MRP8. Doi: 10.1371 / journal.pone.0088942.g002
Trong nghiên cứu tiên lượng, phân tích đa biến cho thấy nồng độ protein trong nước tiểu một năm sau khi sinh thiết thận có liên quan độc lập với số lượng tế bào MRP 8- cầu thận, protein niệu và huyết áp tâm thu lúc ban đầu. Đáng lưu ý, biểu hiện MRP8 ở cầu thận cho thấy mối tương quan mạnh nhất với protein niệu một năm sau đó (b=0. 87), thậm chí còn mạnh hơn protein niệu ban đầu (b=0. 78), bằng phân tích đơn biến. Một phần là do biểu hiện MRP8 ở cầu thận không tăng phần lớn ở dạng protein niệu 'lành tính' như những trường hợp được quan sát thấy ở bệnh nhân MCNSpati, có mức độ protein niệu rất cao khi được chẩn đoán bằng sinh thiết thận nhưng thường được giải quyết trong vòng một năm sau khi bắt đầu điều trị ức chế miễn dịch. Những phát hiện này cho thấy biểu hiện MRP8 ở cầu thận có thể có tính chất tiên đoán duy nhất như một dấu hiệu bệnh, không thể thay thế bằng protein niệu ban đầu hoặc phân tích bệnh lý thường quy đánh giá xơ cầu thận toàn thể và xơ hóa mô kẽ. Hơn nữa, chúng tôi suy đoán rằng biểu hiện MRP8 ở cầu thận không phải là một dấu hiệu đơn giản hoặc một dấu hiệu bên ngoài mà là một tác nhân tích cực trong chấn thương cầu thận như được thảo luận dưới đây.
Hệ số xác định (R2) được tính toán với các tham số giải thích được đăng ký trong phân tích hồi quy bội lần lượt là 0. 52 * và 0. 74 #. y, năm; HA, huyết áp; gCr, g creatinin; T-chol, cholesterol toàn phần; HDL-Chol, HDL cholesterol; LDL-chol, LDL cholesterol; GS, bệnh xơ vữa cầu thận; TI, tubulointerstitial.doi: 10.1371 / journal.pone.0088942.t003
Bảng 4. Phân tích phụ về mối quan hệ giữa các thông số lâm sàng cơ bản và tín hiệu MRP8, sau khi loại trừ nhóm MCNS.
Bảng 5. Phân tích hồi quy bội để xác định các yếu tố dự đoán nồng độ protein trong nước tiểu 1 năm sau sinh thiết thận
Hình 3. Ảnh hưởng của MRP8 lên các đại thực bào có nguồn gốc từ tủy xương. Các đại thực bào có nguồn gốc từ tủy xương (BMDM) được kích thích bằng MRP8 chuột tái tổ hợp trong 4 giờ. Các thanh lỗi chỉ ra 95% CI và các phân tích thống kê đã được thực hiện với các giá trị được biến đổi theo nhật ký. ANOVA hai chiều tiết lộ ảnh hưởng đáng kể của kiểu gen, nồng độ MRP8 và tương tác của chúng đối với sự biểu hiện của cả 3 gen (P, 0. 0 0 1 cho tất cả các so sánh). n=4. WT, kiểu hoang dã; KO, loại trực tiếp; IL -1 b, interleukin 1 beta; TNFa, yếu tố hoại tử khối u-alpha. * P, 0,01 giữa các nồng độ khác nhau, # P, 0,01 giữa các kiểu gen. Doi: 10.1371 / journal.pone.0088942.g003
Trong một nỗ lực khác của một nghiên cứu dọc, phân tích hồi quy logistic không tìm ra được bất kỳ yếu tố dự báo độc lập nào cho sự xuất hiện của biến cố thận trong vòng một năm. Chúng tôi suy đoán rằng điều này một phần là do biểu hiện MRP8 ở mô tế bào và xơ hóa mô ống dẫn trứng là hai yếu tố dự báo mạnh mẽ cho biến cố thận trong phân tích đơn biến nhưng ý nghĩa của chúng đã bị loại bỏ lẫn nhau trong phân tích đa biến. Hai thông số này cho thấy mối tương quan chặt chẽ (R=0. 68, P, 0. 001) (Hình. S8), cho thấy rằng hai thông số này có thể tương đương với việc dự đoán các biến cố thận. Thật vậy, biểu hiện MRP8 ở kẽ cho thấy một mô hình khá giống với xơ hóa kẽ được đánh giá bằng phương pháp nhuộm Masson trichrome. Số lượng MRP8 ở kẽ phần lớn phụ thuộc vào các tín hiệu tích cực trong các ống teo hơn là các tín hiệu trong đại thực bào, có đặc điểm khác với MRP8 ở cầu thận ở sự phân bố theo dấu chấm. Hơn nữa, cỡ mẫu nhỏ, thời gian quan sát ngắn và ít đối tượng phát triển các biến cố về thận có thể làm giảm khả năng phát hiện. Vì sự biểu hiện MRP8 trong tế bào biểu mô ống đóng một vai trò gây bệnh trong sự tiến triển của viêm mô kẽ ống thận ở mô hình chuột bị xơ hóa thận [7], nên cần phải phân tích thêm để làm rõ vai trò của MRP8 mô kẽ trong DN.
Theo nghiên cứu trước đây của chúng tôi [6], mRNA MRP8 được điều chỉnh chủ yếu ở phần cầu thận của đối tượng DN là người so với đối tượng đối chứng với MGA. Mặt khác, biểu hiện protein MRP8 không chỉ được quan sát thấy ở cầu thận mà còn ở tubulointerstitium. Về vấn đề này, cần lưu ý rằng có hai kiểu nhuộm MRP8 riêng biệt trong tubulointerstitium của DN. Một là màu đậm và khu trú trong các ống dẫn bị teo nghiêm trọng. Loại còn lại là sự nhuộm màu nhẹ phân bố dọc theo đường viền bàn chải của các ống lượn gần, cũng được tìm thấy trong ORG và MCNS. Các tín hiệu sau có khả năng đại diện cho protein MRP8 có nguồn gốc từ máu và được tái hấp thu bởi các ống gần, không nên đi kèm với biểu hiện mRNA MRP8 tăng lên. Liên quan đến các protein khác ngoài MRP8, chúng tôi và những người khác gần đây đã báo cáo các hiện tượng tương tự về phát hiện protein phản ứng miễn dịch trong các ống gần gây ra bởi sự tái hấp thu chứ không phải do tổng hợp ở thận [25,26]. Mặt khác, vì một ít nhuộm MRP8 vẫn còn trong xét nghiệm hấp thụ kháng thể, đặc biệt là trong các tổn thương xuất tiết ở cầu thận và các tổn thương xơ hóa, sẹo nghiêm trọng xung quanh các ống dẫn bị teo, nên không thể phủ nhận hoàn toàn sự hiện diện của các tín hiệu không đặc hiệu (Hình S3).
Các tín hiệu MRP8 ở cầu thận chủ yếu cho thấy các mô hình chấm câu ở các đối tượng DN (Hình 1, Hình S4). Vì cả CD68 và MRP8 đều được phát hiện bằng kháng thể đơn dòng của chuột, nên sự định vị của các phân tử này được đánh giá bằng các phần nối tiếp, không phải bằng phương pháp nhuộm miễn dịch kép. Các kiểu nhuộm của MRP8 tương thích với những kiểu nhuộm trong các rối loạn thận do viêm khác bao gồm viêm thận IgAneph, viêm cầu thận tăng sinh màng [14] và viêm cầu thận liên quan đến ANCA [20], trong đó đại thực bào được cho là nguồn chính của MRP8, như chúng tôi đã báo cáo trong một mô hình động vật gặm nhấm [6]. Ngoài ra, bạch cầu trung tính có thể được coi là một nguồn MRP8 khác ảnh hưởng đến các biến chứng mạch máu [28]. Hiện tại, chúng tôi đang nghiên cứu cơ chế phân tử tại saoMRP8 chủ yếu được điều hòa trong các tế bào dòng tủy thâm nhập vào cầu thận. Nghiên cứu in vitro cho thấy MRP8 gây ra biểu hiện cytokine gây viêm và cũng làm tăng khả năng biểu hiện của chính MRP8 trong đại thực bào theo cách phụ thuộc TLR 4-. Ngoài ra, tế bào MRP 8- dương tính không có trong tổn thương xơ cứng dạng nốt, cho thấy MRP8 cầu thận có thể phản ánh tổn thương cầu thận đang diễn ra [20]. Điều quan trọng là, một nghiên cứu quy mô lớn nhất trên người đã báo cáo rằng biểu hiện gen MRP8 trong tế bào đơn nhân máu của bệnh nhân đái tháo đường týp 1 tăng lên đáng kể ở những đối tượng có biến chứng đái tháo đường bao gồm cả bệnh thận [29].
Vì sự ức chế hệ thống renin-angiotensin (RAS) là một yếu tố quan trọng quyết định đến kết quả thận, chúng tôi đã kiểm tra tác dụng của RASblockade trênquả thậnBiểu thức MRP8. Chúng tôi không tìm thấy sự khác biệt đáng kể về biểu hiện mRNA MRP8 ở thận giữa các bệnh nhân DN được điều trị có hoặc không có phong tỏa RAS (Hình S9), có thể là do các trường hợp được điều trị bằng phong tỏa RAS có xu hướng tăng huyết áp và protein niệu nặng hơn so với các trường hợp không phong tỏa RAS.
Ở người và chuột béo phì, tăng MRP8 / 14complex trong huyết tương có thể phản ánh mức độbéo phìvà có nguồn gốc từ tế bào mỡ cũng như bạch cầu [8,9]. Các trường hợp ORG của chúng tôi có MRP8 nhuộm nhẹ ở các ống gần, cho thấy nồng độ MRP8 trong huyết tương tăng lên. Ngược lại, không có mối tương quan có ý nghĩa giữa biểu hiện MRP8 mô kẽ và chỉ số khối cơ thể (Hình S6G). Do đó, biểu thức MRP8 cục bộ trongquả thậncó thể phục vụ tốt hơn như một dấu hiệu cho tổn thương thận hơn làbéo phì[8,9].
Cistanche để cải thiện rối loạn chức năng thận
Ngành học của chúng tôi có một vài hạn chế. Số lượng mẫu của mỗi nhóm được nghiên cứu là nhỏ. Các đối tượng không giống nhau đã được ghi danh vào phân tích mRNA và hóa mô miễn dịch. Vì chúng tôi chỉ phân tích những bệnh nhân được sinh thiết thận, thành phần bệnh nhân được điều tra ở đây có thể không phản ánh những bệnh nhân tiểu đường loại 2 nói chung hoặc mãn tính nói chung.quả thậnđối tượng bệnh. Mặc dù tuổi tác không được lưu giữ như một yếu tố độc lập liên quan đến tín hiệu MRP8 trong dữ liệu của chúng tôi (Bảng 3), người ta đã biết rằng lão hóa liên quan đến viêm mãn tính [30]. Không thể bỏ qua hoàn toàn ảnh hưởng của tuổi tác. Mặc dù hầu hết các tín hiệu MRP8 đã bị mất trong thử nghiệm hấp thụ kháng thể, nhưng vẫn còn một số tín hiệu dương tính, nguyên nhân có thể là do liên kết không đặc hiệu của kháng thể đầu tiên. Như đã thảo luận ở trên, việc khảo sát biểu hiện MRP8 ở thận bằng sinh thiết thận giúp chúng ta hiểu được sinh lý bệnh và tiên lượng của các bệnh thận mãn tính, đặc biệt là liên quan đếnbéo phìvà bệnh tiểu đường, nhưng có một bất lợi cho việc sử dụng thường xuyên và lặp đi lặp lại ở các phòng khám ngoài bệnh nhân
Tóm lại, nghiên cứu này cho thấy rằng biểu hiện củaMRP8 trongquả thậnphản ánh tình trạng bệnh lý hiện tại và cũng dự đoán kết quả thận ở bệnh nhânbéo phìhoặcloại 2diabetes. Các cuộc điều tra sâu hơn nghiên cứu mức MRP8 trong nước tiểu ở bệnh nhân béo phì hoặc tiểu đường trên quy mô lớn có thể được đảm bảo
Thông tin hỗ trợ
Hình S1 Hình ảnh đại diện cho thấy phần sinh thiết thận của một bệnh nhân DN được nhuộm bằng (A) axit tuần hoàn Schiff, (B) bạc methenamine axit tuần hoàn hoặc (C) Masson trichrome. Tỷ lệ giữa số lượng cầu thận bị xơ cứng toàn thể (mũi tên) giữa tổng số cầu thận và diện tích tương đối của xơ hóa mô kẽ ở bệnh nhân này lần lượt là 33% và 65%. (TIFF)
Hình S2 Hóa mô miễn dịch cho các protein MRP8 và CD68 ở bệnh nhân DN. Ảnh ở cột bên phải cho thấy các thí nghiệm đối chứng âm tính không có kháng thể thứ nhất. (TIF)
Hình S3 Thử nghiệm hấp thụ kháng thể để nhuộm MRP8.PBS: nước muối đệm phosphat, rhMRP8: người tái tổ hợpMRP8. (TIF)
Hình S4 Các ảnh đại diện của biểu thức MRP8 trong các nhóm MGA, MCNS, ORG và DN. (TIF)
Hình S5 Mối tương quan giữa số lượng tế bào MRP 8- dương tính ở cầu thận và các thông số lâm sàng. Các giá trị được biến đổi nhật ký của tín hiệu MRP8 đã được sử dụng. Các mối tương quan được phân tích bằng cách sử dụng tất cả 4 nhóm (A – D, G) hoặc 3 nhóm không bao gồm nhóm MCNS (E, F). Vòng tròn mở: bất thường cầu thận nhỏ (MGA), vòng tròn đóng: hội chứng thận hư thay đổi tối thiểu (MCNS), hình tam giác mở:béo phì-bệnh cầu thận liên quan (ORG), tam giác kín: bệnh thận do đái tháo đường (DN). (TIF)
Hình S6 Tương quan giữa diện tích dương tính MRP 8- tubulointerstitial và các thông số lâm sàng. Các giá trị được biến đổi nhật ký của tín hiệu MRP8 đã được sử dụng. Các mối tương quan này được phân tích bằng cách sử dụng tất cả 4 nhóm (A – D, G) hoặc 3 nhóm không bao gồm nhóm MCNS (E, F). (TIF)
Hình S7 Mối tương quan giữa biểu hiện MRP8 ở cầu thận và tubulointerstitial. Các giá trị được biến đổi nhật ký của tín hiệuMRP8 đã được sử dụng. (TIF)
Hình S8 Mối tương quan giữa vùng dương tính MRP 8- tubulointerstitial và xơ hóa mô tế bào tubulointerstitial. Các giá trị được biến đổi nhật ký của tín hiệu MRP8 đã được sử dụng. (TIF)
Hình S9 Biểu hiện mRNA ở thận của MRP8 ở bệnh nhân DN có hoặc không có sự phong tỏa renin-angiotensin.NS: không đáng kể. n=15 (Có), 6 (Không). Trong số 22 trường hợp DN, một bệnh nhân không có thông tin về thuốc. (TIF)
Bảng hỗ trợ tệp S1.
Bảng S1, Chẩn đoán bệnh lý của tất cả các trường hợp đã làm sinh thiết thận tại Khoa Y và Khoa học Lâm sàng, Bệnh viện Đại học Kyoto từ năm 2000 đến năm 2011. Bảng S2, Trình tự đầu dò và đầu dò cho RT-PCR thời gian thực TaqMan. Bảng S3, Phân tích hồi quy logistic cho sự xuất hiện của biến cố thận trong vòng một năm. (DOC) Lời cảm ơn Chúng tôi chân thành cảm ơn S. Tanaka về tư vấn thống kê, Y. Ogawa, N.Igarashi, và C. Kimura về hỗ trợ kỹ thuật, và A. Yamamoto và SOgino về hỗ trợ thư ký. Đóng góp của tác giả Xây dựng và thiết kế các thí nghiệm: TK KM MK HY MI AN KNMM. Đã thực hiện các thí nghiệm: TK HI AI KK TM YK MI AN. Đã phân tích số liệu: TK KM MK HY AS SY KU KN MM. Thuốc thử / vật liệu / dụng cụ phân tích đóng góp: TK KM. Đã viết bài: TK KMMM.
Tác dụng của cây trạch tả: chữa các bệnh về thận
Người giới thiệu
1. Donath MY, Shoelson SE (2011) Bệnh tiểu đường loại 2 như một bệnh viêm.Nat Rev Immunol 11: 98–107.
2. Odink K, Cerletti N, Bruggen J, Clerc RG, Tarcsay L, et al. (1987) Các protein liên kết với Twocalcium trong việc xâm nhập vào các đại thực bào của bệnh viêm khớp dạng thấp. Đặc tính 330: 80–82.
3. Vogl T, Tenbrock K, Ludwig S, Leukert N, Ehrhardt C, và cộng sự. (2007) Mrp8 và Mrp14 là các chất hoạt hóa nội sinh của thụ thể Toll-like 4, thúc đẩy sốc gây chết người do nội độc tố gây ra. Nat Med 13: 1042–1049.
4. Croce K, Gao H, Wang Y, Mooroka T, Sakuma M, et al. (2009) Protein liên quan đến dòng tuỷ -8 / 14 rất quan trọng đối với phản ứng sinh học đối với tổn thương mạch máu. Tuần hoàn 120: 427–436.
5. Kẻ thất bại K, Vogl T, Voskort M, Lueken A, Kupas V, et al. (2010) 4 phối tử của thụ thể Toll-like Mrp8 và Mrp14 đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển của tế bào T CD8 cộng với tự hoạt động. Nat Med 16: 713–717.
6. Kuwabara T, Mori K, Mukoyama M, Kasahara M, Yokoi H, et al. (2012) Đợt cấp của bệnh thận do đái tháo đường do tăng lipid máu được trung gian bởi thụ thể Toll-like 4 ở chuột. Diabetologia 55: 2256–2266.
7. Fujiu K, Manabe I, Nagai R (2011) Tế bào biểu mô ống góp thận điều chỉnh tình trạng viêm trong tổn thương mô ống thận ở chuột. J Clin Đầu tư 121: 3425–3441.
8. Sekimoto R, Kishida K, Nakatsuji H, Nakagawa T, Funahashi T, et al. (2012) Mức độ lưu hành cao của phức hợp S100A8 / A9 (calprotectin) ở nam giới Nhật Bản bị béo bụng và biểu hiện rối loạn điều hòa của S100A8 và S100A9 trong mô mỡ của chuột béo phì. Biochem Biophys Res Commun 419: 782–789.
9. Mortensen OH, Nielsen AR, Erikstrup C, Plomgaard P, Fischer CP, et al. (2009) Calprotectin — một điểm đánh dấu mới củabéo phì. PLoS One 4: e7419.
10. Matsuo S, Imai E, Horio M, Yasuda Y, Tomita K, et al. (2009) Các phương trình đã sửa đổi cho GFR ước tính từ creatinine huyết thanh ở Nhật Bản. Là JQuả thậnDis53: 982–992.
11. Gross JL, de Azevedo MJ, Silveiro SP, Canani LH, Caramori ML, et al. (2005) Bệnh thận do đái tháo đường: chẩn đoán, phòng ngừa và điều trị. Chăm sóc bệnh tiểu đường 28: 164–176.
12. Kambham N, Markowitz GS, Valeri AM, Lin J, D'Agati VD (2001)Béo phì-bệnh cầu thận liên quan: một dịch bệnh mới nổi.Quả thậnInt 59: 1498–1509.
13. Praga M, Morales E (2006)Béo phì, protein niệu và sự tiến triển của suy thận.Curr Opin Nephrol Hypertens 15: 481–486.
14. Kawasaki Y, Hosoya M, Takahashi A, Isome M, Tanji M, et al. (2005) Biểu hiện protein 8 liên quan đến dòng tủy trên đại thực bào là một dấu hiệu tiên lượng hữu ích cho rối loạn chức năng thận ở trẻ em mắc MPGN týp 1. Am JQuả thậnDis 45: 510–518.
15. Nishiyama A, Konishi Y, Ohashi N, Morikawa T, Urushihara M, et al. (2011) Angiotensinogen niệu phản ánh hoạt động của hệ thống renin-angiotensin trong tuyến thượng thận ở bệnh nhân bệnh thận IgA. Ghép số Nephrol 26: 170–177.
16. Ogawa Y, Mukoyama M, Yokoi H, Kasahara M, Mori K, et al. (2012) Thụ thể peptide tự nhiên guanylyl cyclase-A bảo vệ tế bào podocytes khỏi tổn thương cầu thận do aldosterone gây ra. J Am Soc Nephrol 23: 1198–1209.
17. Yokoi H, Mukoyama M, Mori K, Kasahara M, Suganami T, et al. (2008) Sự biểu hiện quá mức của yếu tố tăng trưởng mô liên kết trong tế bào vỏ làm trầm trọng thêm bệnh thận do đái tháo đường ở chuột.Quả thậnInt 73: 446–455.
18. Hoshino K, Takeuchi O, Kawai T, Sanjo H, Ogawa T, et al. (1999) Cạnh tranh: Những con chuột thiếu thụ thể giống như thụ thể 4 (TLR4) không đáp ứng với lipopolysaccharide: bằng chứng cho TLR4 là sản phẩm của gen Lps. J Immunol162: 3749–3752.
19. Suganami T, Tanimoto-Koyama K, Nishida J, Itoh M, Yuan X, et al. (2007) Vai trò của con đường Toll-like receptor 4 / NF-kappaB trong các thay đổi viêm do axit béo bão hòa gây ra trong tương tác giữa tế bào mỡ và đại thực bào. Arterioscler Thromb Vasc Biol 27: 84–91.
20. Pepper RJ, Hamour S, Chaosystem KM, Todd SK, Rasmussen N, et al. (2013) Biểu hiện S100A8 / S100A9 của bạch cầu và huyết thanh phản ánh hoạt động của bệnh trong viêm mạch máu liên quan đến ANCA và viêm cầu thận.Quả thậnInt 83: 1150–1158.
21. Ravid M, Brosh D, Ravid-Safran D, Levy Z, Rachmani R (1998) Các yếu tố nguy cơ chính của bệnh thận ở đái tháo đường týp 2 là nồng độ cholesterol trong huyết tương, huyết áp trung bình và tăng đường huyết. Arch Intern Med 158: 998–1004.
22. Adler AI, Stratton IM, Neil HA, Yudkin JS, Matthews DR, et al. (2000) Hiệp hội huyết áp tâm thu với các biến chứng mạch máu vĩ mô và vi mạch của bệnh tiểu đường loại 2 (UKPDS 36): một nghiên cứu quan sát tiền cứu.BMJ 321: 412–419.
23. Ruggenenti P, Remuzzi G (1998) Bệnh thận của bệnh đái tháo đường loại -2. J PGS Nephrol 9: 2157–2169.
24. Taft JL, Nolan CJ, Yeung SP, Hewitson TD, Martin FI (1994) Tương quan lâm sàng và mô học của sự suy giảm chức năng thận ở bệnh nhân đái tháo đường có protein niệu. Bệnh tiểu đường 43: 1046–1051.
25. Matsusaka T, Niimura F, Shimizu A, Pastan I, Saito A, et al. (2012) Liverangiotensinogen là nguồn chính của angiotensin II ở thận. J Am Soc Nephrol23: 1181–1189.
26. Kuwabara T, Mori K, Mukoyama M, Kasahara M, Yokoi H, et al. (2009) Mức độ lipocalin liên quan đến gelatinase của bạch cầu trung tính trong nước tiểu phản ánh tổn thương cầu thận, ống lượn gần và nephron xa.Quả thậnInt 75: 285–294.
27. Kawasaki Y, Suyama K, Go H, Imamura T, Ushijima Y, et al. (2009) Sự tích tụ của các đại thực bào biểu hiện protein 8 liên quan đến dòng tủy có liên quan đến sự tiến triển của những thay đổi xơ cứng ở trẻ em mắc bệnh thận IgA. Tohoku J Exp Med 218: 49–55.
28. Nagareddy PR, Murphy AJ, Stirzaker RA, Hu Y, Yu S, et al. (2013) Tăng đường huyết thúc đẩy quá trình tạo tủy và làm suy yếu quá trình phân giải xơ vữa động mạch. Metab tế bào 17: 695–708.
29. Jin Y, Sharma A, Carey C, Hopkins D, Wang X, et al. (2013) Sự biểu hiện của các gen viêm được điều chỉnh trong máu ngoại vi của bệnh nhân tiểu đường loại 1. Chăm sóc bệnh tiểu đường.
30. Longo VD, Finch CE (2003) Y học tiến hóa: từ hệ thống mô hình người lùn đến người sống trăm tuổi khỏe mạnh? Khoa học 299: 1342–1346.
Trích dẫn: Kuwabara T, Mori K, Kasahara M, Yokoi H, Imamaki H, et al. (2014) Ý nghĩa dự đoán củaQuả thậnProtein liên quan đến tủy 8 Biểu hiện ở bệnh nhânBéo phì- hoặc Bệnh thận liên quan đến tiểu đường loại 2. PLoS ONE 9 (2): e88942. doi: 10.1371 / journal.pone.0088942
Biên tập viên: Utpal Sen, Đại học Louisville, Hoa Kỳ
Nhận ngày 11 tháng 9 năm 2013; Chấp nhận ngày 14 tháng 1 năm 2014; Xuất bản ngày 18 tháng 2 năm 2014
Bản quyền: 2014 Kuwabara et al. Đây là một bài báo truy cập mở được phân phối theo các điều khoản của Giấy phép Ghi nhận tác giả Creative Commons, cho phép sử dụng, phân phối và sao chép không hạn chế ở bất kỳ phương tiện nào, miễn là tác giả và nguồn gốc được ghi công.
Tài trợ: Công việc này được hỗ trợ một phần bởi Viện trợ không hoàn lại cho bệnh thận do tiểu đường và nghiên cứu xơ vữa thận từ Bộ Y tế, Lao động và Phúc lợi Nhật Bản (cho KM), tài trợ nghiên cứu từ Bộ Giáo dục, Văn hóa, Thể thao, Khoa học Nhật Bản , và Công nghệ (tới TK, KM và MM), từ Quỹ Nghiên cứu Enzym Ứng dụng Nhật Bản (tới TK) và từ Tổ chức Nghiên cứu Hút thuốc (tới MM). Các nhà tài trợ không có vai trò gì trong việc thiết kế nghiên cứu, thu thập dữ liệu và phân tích, quyết định xuất bản hoặc chuẩn bị bản thảo.
Các lợi ích cạnh tranh: Các tác giả đã tuyên bố rằng không có lợi ích cạnh tranh nào tồn tại.
* E-mail: keyem@kuhp.kyoto - u.ac.jp
