Đầu đọc RNA M6 A YTHDF2 kiểm soát khả năng chống ung thư và miễn dịch chống vi-rút của tế bào NK Phần 6

Mô hình khối u ác tính di căn và thách thức MCMV

Tế bào B16F10 (105) được tiêm iv vào chuột. 14 ngày sau khi tiêm, những con chuột được tiêu hủy để phân tích sau khi chết. Các nốt di căn trong phổi được phân tích vĩ mô và đếm. Dòng tế bào B16F10 được cung cấp bởi Hua Yu (City ofHope, Los Angeles, CA). Chuột Ythdf2ΔNK và Ythdf2WT đã bị tiêm ip của chủng Smith MCMV (2,5 × 104 PFU), được mua từ Bộ sưu tập Văn hóa Kiểu Mỹ (VR{11}}). Các mẫu máu ngoại vi được lấy bằng cách chọc dò dưới hàm vào ngày 0, 4 và 7 sau khi bị nhiễm trùng.

Các nốt di căn phổi đề cập đến các nốt được hình thành bởi các tế bào khối u ác tính từ các vị trí khác di chuyển đến phổi qua máu hoặc hệ bạch huyết. Đối với nhiều bệnh nhân, đây là biểu hiện thường gặp của bệnh ung thư phổi.

Tuy nhiên, mặc dù các nốt di căn phổi gây ra mối đe dọa cho sức khỏe thể chất của bệnh nhân nhưng không có mối liên hệ trực tiếp nào giữa nó và trí nhớ. Vì vậy, chúng ta nên tích cực đối mặt với những thách thức của bệnh ung thư phổi và các nốt di căn ở phổi, đồng thời không để những cảm xúc tiêu cực, lo lắng ảnh hưởng đến sức khỏe thể chất và tinh thần của mình.

Đồng thời, chúng ta có thể duy trì và cải thiện trí nhớ thông qua một số phương pháp tích cực. Ví dụ, thực hiện một số rèn luyện trí nhớ, chẳng hạn như tính toán, đọc sách, nghe nhạc, chơi trò chơi, v.v. Ngoài ra, việc tuân thủ các thói quen sinh hoạt tốt như tập thể dục thường xuyên, ngủ đủ giấc, ăn uống lành mạnh, v.v., cũng có thể cải thiện trí nhớ của chúng tôi

Điều quan trọng nhất là giữ thái độ tích cực. Dù gặp phải khó khăn gì, bạn cũng phải tin vào sức mạnh và sự linh hoạt của hệ thần kinh, thông qua những điều chỉnh và phản ứng tích cực, cuối cùng bạn sẽ vượt qua khó khăn thành công.

Nói tóm lại, mặc dù các nốt di căn ở phổi gây ra mối đe dọa cho sức khỏe thể chất nhưng chúng không liên quan trực tiếp đến trí nhớ. Chúng ta nên đối mặt với nó một cách tích cực, đồng thời duy trì và cải thiện trí nhớ bằng cách điều chỉnh lối sống và duy trì một thái độ tốt. Có thể thấy rằng chúng ta cần cải thiện trí nhớ và Cistanche Deserticola có thể cải thiện đáng kể trí nhớ, bởi vì Cistanche Deserticola cũng có thể điều chỉnh sự cân bằng của các chất dẫn truyền thần kinh, chẳng hạn như tăng mức độ acetylcholine và các yếu tố tăng trưởng. Những chất này rất quan trọng cho trí nhớ và học tập. Ngoài ra, Cistanche Deserticola cũng có thể cải thiện lưu lượng máu và thúc đẩy quá trình cung cấp oxy, điều này có thể đảm bảo não nhận đủ chất dinh dưỡng và năng lượng, từ đó cải thiện sức sống và sức bền của não. Có thể thấy rằng chúng ta cần cải thiện trí nhớ và Cistanche Deserticola có thể cải thiện đáng kể trí nhớ, bởi vì Cistanche Deserticola cũng có thể điều chỉnh sự cân bằng của các chất dẫn truyền thần kinh, chẳng hạn như tăng mức độ acetylcholine và các yếu tố tăng trưởng. Những chất này rất quan trọng cho trí nhớ và học tập. Ngoài ra, Cistanche Deserticola cũng có thể cải thiện lưu lượng máu và thúc đẩy quá trình cung cấp oxy, điều này có thể đảm bảo não nhận đủ chất dinh dưỡng và năng lượng, từ đó cải thiện sức sống và sức bền của não.

Bấm vào biết thực phẩm bổ sung để tăng cường trí nhớ

Để đo lượng virus trong máu ngoại vi, lá lách và gan, DNA được phân lập bằng cách sử dụng Bộ mô và máu QIAGEN DNeasy để phân tích qPCR. Các đoạn mồi sau đã được sử dụng: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (chuyển tiếp) và MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (đảo ngược).

Điều trị chuột in vivo bằng IL-15

Để điều trị chuột in vivo bằng IL-15, chuột Ythdf2ΔNK và Ythdf2WT đã được tiêm 2 µg ip tái tổ hợp IL của con người-15 (cat.no. 745101; Viện Ung thư Quốc gia) trong 5 ngày. Những con chuột được điều trị và kiểm soát sau đó được tiêu hủy để phân tích tế bào học dòng chảy.

Tế bào học dòng chảy

Huyền phù tế bào đơn được điều chế từ BM, máu, lá lách, gan và phổi của chuột Ythdf2ΔNK và Ythdf2WT như đã mô tả trước đây (Wang và cộng sự, 2018b). Phân tích tế bào học dòng chảy và phân loại tế bào lần lượt được thực hiện trên LSRFortessa X-20 và Máy đo tế bào dòng chảy FACSAriaFusion (BD Bioscatics).

Dữ liệu được phân tích bằng phần mềm NovoExpress (Agilent Technologies).

Các kháng thể được dán nhãn thuốc nhuộm huỳnh quang sau đây của BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen hoặc Cell Signaling Technology đã được sử dụng: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5 ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7),CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70),CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1),KLRG1 (2F1), CD45 ({{46 }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzyme B (QA16A02), perforin(S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), phụ lục V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) và Eomes(WD1928), phospho-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101),phospho-Akt (Ser473, #5315), protein ribosome phospho-S6 ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) và phospho-Stat5 (Tyr694,#9539).

Để đánh giá khả năng tăng sinh tế bào NK, các tế bào được dán nhãn bằng 5 µM CTV (Invitrogen) theo quy trình của nhà sản xuất trước khi chuyển chúng vào chuột nhận. Nhuộm nội bào của Ki67, Tbet và Eomes được thực hiện bằng cách cố định và thẩm thấu bằng Bộ nhuộm màu yếu tố phiên mã Foxp3/(eBioscience).

Để phát hiện các protein bị phosphoryl hóa, các tế bào NK lách đã được tinh chế được xử lý trước bằng IL{0}} tái tổ hợp của người (50 ng/ml) trong 1 giờ và sau đó được cố định bằng Phosflow Fix Buffer I, sau đó là khả năng thẩm thấu bằng Phosflow Perm Buffer III (BD Bioscatics) và nhuộm màu bằng kháng thể.

Chuyển tế bào nhận nuôi

Để đánh giá ảnh hưởng của sự thiếu hụt Ythdf2 đối với sự trưởng thành của tế bào NK, hỗn hợp gồm 5 × 10 tế bào BM với tỷ lệ 1: 1 từ chuột CD45.1 hoặc Ythdf2ΔNK CD45.2 đã được chuyển vào chuột Rag2−/−Il2rg−/−. Sự phục hồi của người nhận được đánh giá bằng phương pháp tế bào học dòng chảy 8 tuần sau khi ghép.

Đối với các thí nghiệm tăng sinh cân bằng nội môi do giảm bạch cầu, số lượng tế bào NK lách đã được tinh chế bằng nhau từ chuột CD45.1 hoặc Ythdf2ΔNK CD45.2 đã được chuyển vào chuột Rag2−/−Il2rg-/− sau đó đánh giá tỷ lệ phần trăm tương đối của các tế bào NK WT và Ythdf2ΔNK được chuyển trong lá lách của người nhận Rag2−/−Il2rg-/− bằng phương pháp tế bào học dòng chảy tại các thời điểm được chỉ định.

Đối với mô hình u ác tính di căn, 106 tế bào NK được mở rộng IL-2 từ chuột Ythdf2ΔNK hoặc Ythdf2WT đã được tiêm iv vào chuột Rag2−/−Il2rg-/−. 1 ngày sau, tế bào B16F10 (105) được tiêm iv vào chuột. 14 ngày sau khi tiêm, chuột được tiêu hủy để phân tích sau khi chết. Trong một số thí nghiệm, các tế bào được dán nhãn CTV (5 µM, Invitrogen) để theo dõi quá trình tăng sinh tế bào trước khi chuyển.

Xét nghiệm buôn bán in vivo

Để phát hiện sự di chuyển tế bào NK từ BM sang máu ngoại vi, kháng thể kháng CD45 có nhãn APC 1 µg iv đã được tiêm vào chuột C57BL/6. Hai phút sau khi tiêm kháng thể, chúng được tiêu hóa ngay lập tức và các tế bào BM được thu thập để đo tế bào theo dòng chảy sau khi các tế bào được nhuộm bằng kháng thể CD3 và NK1.1. Các tế bào NK nhu mô được xác định nhờ không nhuộm CD45, trong khi các tế bào NK hình sin được xác định bằng sự hiện diện của nhãn CD45. Do đó, tỷ lệ tế bào NK trong các xoang (CD45+) so với tế bào ở vùng nhu mô (CD45−) cho thấy sự di chuyển tế bào NK từ máu ngoại vi BM ở trạng thái ổn định.

RT-qPCR thời gian thực và phương pháp miễn dịch

RNA được phân lập bằng cách sử dụng RNeasy Mini Kit (QIAGEN) và sau đó được phiên mã ngược thành cDNA bằng PrimeScript RT Reagent Kitvới gDNA Eraser (Takara Bio) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Mức độ biểu hiện mRNA được phân tích bằng SYBRGreen PCR Master Mix và Hệ thống QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR (cả hai đều của Thermo Fisher Scientific). Trình tự mồi được liệt kê trong Bảng S1.

Quá trình miễn dịch được thực hiện theo quy trình tiêu chuẩn, như đã mô tả trước đây (Denget al., 2015; Yu và cộng sự, 2006). Các kháng thể sau đã được sử dụng:METTL3 (cat. no. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (cat. no.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (cat. no. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (cat. no. RN123PW; MBL), YTHDF3 (cat. no.25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (cat. no. ab195377; Abcam),FTO (cat. no. ab124892; Abcam), MDM2 (cat. no. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (cat. no. PA5-29949; Invitrogen) và -actin(cat. no. {{20 }}Ig; Proteintech).

xét nghiệm hạ gục siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% được đo bằng phương pháp tế bào học dòng chảy. Hiệu quả phân hủy gen được xác định bằng qPCR và phương pháp miễn dịch. 3 ngày sau khi truyền máu, quá trình apoptosis của tế bào và sự tăng sinh được phân tích bằng phương pháp tế bào học dòng chảy như mô tả ở trên.

Xét nghiệm phóng viên Luciferase

Vùng quảng bá Ythdf2 có phạm vi từ –2,000 bp đến +100 bpof TSS được khuếch đại từ các tế bào NK của chuột và được sao chép vào apGL4-Vectơ báo cáo Luciferase cơ bản (Promega) để tạo ra apGL{ {5}}plasmid báo cáo Ythdf2. Các tế bào HEK293T được mua từ ATCC đã được đồng truyền với plasmid báo cáo pGL4-Ythdf2 cũng như các plasmid biểu hiện quá mức STAT5a hoặc STAT5b hoặc vectơ trống, cùng với plasmid báo cáo pRL-TK Renilla (Promega) để bình thường hóa hiệu suất truyền máu. Các tế bào được thu hoạch để ly giải 24 giờ sau khi truyền máu và hoạt tính luciferase được định lượng bằng phương pháp đo huỳnh quang bằng Hệ thống Dual-Luciferase (Promega). Trình tự mồi để nhân bản các plasmid biểu hiện quá mức Ythdf2promoter và STAT5a và STAT5b được liệt kê trong Bảng S1.

xét nghiệm ChIP

Các xét nghiệm ChIP được thực hiện bằng cách sử dụng Bộ công cụ ChIP từ tính Pierce (cat. No. 26157; Thermo Fisher Scientific) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Tóm lại, một lượng tương đương ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694, cat. No. 9351; Cell Signaling Technologies) hoặc IgG bình thường đối chứng tương ứng của thỏ đã được sử dụng riêng để kết tủa phức hợp DNA--protein liên kết ngang có nguồn gốc từ 5 × 106 tế bào NK sơ cấp của chuột đã được tinh chế và được xử lý trước bằng IL{10}} (50 ng/ml) trong 1 giờ. Sau khi đảo ngược liên kết ngang, DNA được kích thích miễn dịch bằng kháng thể chỉ định đã được kiểm tra bằng qPCR. Trình tự của tất cả các mồi được liệt kê trong Bảng S1.

Xét nghiệm độc tế bào ex vivo

Độc tính tế bào ex vivo của tế bào NK được đánh giá bằng xét nghiệm tiêu chuẩn 51Crrelease. Các dòng tế bào ung thư hạch ở chuột RMA-S (thiếu hụt loại MHC) và tế bào RMA (đủ loại MHC loại I), một món quà của Andre'Veillette (Đại học McGill, Montreal, Canada), đã được sử dụng làm tế bào đích. Chuột được điều trị bằng cách tiêm ip polyinosinic: axit polycytidylic [poly (I: C); 200 µg/con chuột] trong 18 giờ. Các tế bào NK được kích hoạt bằng poly(I:C) được phân lập từ lá lách bằng Bộ cách ly tế bào EasySepMouse NK (STEMCELL Technologies). Các tế bào PurifiedNK được kết hợp với các tế bào đích theo tỷ lệ 5:1, 2,5:1 và 1,25:1 với sự có mặt của IL-2 (50 U/ml).

m6A-seq

Các tế bào NK lách tinh khiết được nhân rộng bằng IL-2 (1,000 U/ml,cat. no. Bulk Ro 23-6019; Viện Ung thư Quốc gia) trong ống nghiệm trong 7 ngày. RNA tổng số được phân lập bằng thuốc thử TRIzol (Thermo FisherScientific) từ 50 triệu tế bào NK được mở rộng IL{6}}. RNA polyadenylat hóa được làm giàu thêm từ RNA tổng số bằng cách sử dụng Bộ làm sạch Dynabeads mRNA (Invitrogen). các mẫu mRNA được phân mảnh thành các đoạn 100-dài nt bằng thuốc thử phân mảnh RNA (Invitrogen).

MRNA phân mảnh (5 µgmRNA) đã được sử dụng để kích thích miễn dịch m6A bằng cách sử dụng kháng thể m6A (202003; Synaptic) theo giao thức chuẩn của Bộ Magna MeRIP m6A (Merck Millipore). RNA được làm giàu thông qua RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) để tạo thư viện với Bộ công cụ HyperPrep RNA KAPA (Roche). Trình tự được thực hiện tại cơ sở gen của City of Hope trên máy Illumina HiSeq 2500 với chế độ 50-bp đọc một lần. Việc đọc trình tự được ánh xạ tới bộ gen chuột bằng phần mềm HISAT2 v101 (Kim và cộng sự, 2015).

Các bản đồ đọc của thư viện đầu vào và kích thích miễn dịch đã được cung cấp bằng gói R exomePeak (Meng và cộng sự, 2014). m6Apeaks được hiển thị bằng phần mềm Trình xem Genomics tích hợp (//www.igv.org). Mô-đun liên kết m6A đã được MEME (//meme-suite.org) và HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif) phân tích. Các đỉnh được gọi được chú thích bằng sự giao thoa với kiến ​​trúc gen bằng cách sử dụng Rpackage ChIPseeker (Yu và cộng sự, 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2(thay đổi lần)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 triệu IL-2-tế bào NK đã được nhân rộng đã được thu hoạch và rửa hai lần bằng PBS lạnh, và viên tế bào được ly giải bằng dung dịch đệm phân giải 2 thể tích (10 mM Hepes, pH 7,6, 150 mM KCl, 2 mM EDTA,0,5% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol, cocktail ức chế protease 1:100 [Thermo Fisher Scientific] và Chất ức chế SUPERase-In RNase 400 U/ml [Thermo Fisher Scientific]).

Lysate được ủ trên đá trong 5 phút và ly tâm trong 15 phút để loại bỏ thelysate. Một phần mười khối lượng lysate tế bào đã được lưu làm đầu vào. Phần lysate còn lại của tế bào được ủ với 5 µg anti-YTHDF2 (cat.no. RN123PW; MBL) được kết hợp với Protein A Hạt từ tính (cat. no. 10001D; Invitrogen) ở 4 độ trong 2 giờ với vòng quay nhẹ nhàng. Sau đó, các hạt được rửa năm lần với 1 ml dung dịch đệm rửa lạnh bằng đá (50 mM HEPES, pH 7,6.200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol và 200 U/ml RNase chất ức chế).

Các mẫu bị ức chế miễn dịch được đưa vào quá trình tiêu hóa Proteinase K trong dung dịch đệm rửa được bổ sung 1% SDS và 2 mg/ml Proteinase K (ThermoFisher Scientific) được ủ trong điều kiện lắc ở tốc độ 1.200 vòng/phút ở 55 độ trong 1 giờ. Tổng RNA được chiết xuất từ ​​​​cả RNA đầu vào và RNA bị kích thích miễn dịch bằng cách thêm thuốc thử TRIzol 5 vol, sau đó là Direct-zol RNA Miniprep (Nghiên cứu Zymo).

Thư viện cDNA được tạo bằng KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) và được giải trình tự trên nền tảng Illumina HiSeq 2500. Kết quả gọi cao nhất với khả năng kích thích miễn dịch và thư viện đầu vào được tạo bởi gói R RIPSeeker (Li và cộng sự, 2013). HOMER được sử dụng để tìm mô típ phân bố dữ liệu ở các vùng cực đại. Các đỉnh được gọi là được chú thích bằng sự giao thoa với kiến ​​trúc gen và bản phiên mã bằng ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

xét nghiệm độ ổn định của mRNA

Các tế bào NK lách đã được tinh chế từ chuột Ythdf2ΔNK và Ythdf2WT được nuôi cấy bằng IL-15 (50 ng/ml). 3 ngày sau khi nuôi cấy, các tế bào được xử lý bằng Actinomycin D (5 µg/ml, cat. No. A9415; Sigma) trong thời gian chỉ định. Các tế bào không được xử lý được sử dụng ở 0 giờ. Các tế bào được thu thập tại thời điểm được chỉ định và tổng số RNA được chiết xuất từ ​​​​các tế bào cho qPCR. Thời gian bán hủy của mRNA được tính toán bằng phương pháp được mô tả trước đây bởi Weng và cộng sự (2018). Trình tự mồi được liệt kê trong Bảng S1.

Phân tích cơ sở dữ liệu trực tuyến

Chúng tôi đã sử dụng tài nguyên trực tuyến BioGPS (//biogps.org) để phân tích biểu hiện đặc hiệu mô của Ythdf2. Các bộ dữ liệu RNA-seqdata là từ GEO dưới sự gia nhập số. GSE106138, GSE113214 và GSE25672. Dữ liệu được chuẩn hóa từ các phân tích RNA-seq đã được xuất và điểm z biểu hiện gen được hiển thị bằng hàm Heatmap.2 trong Thư viện gplots R

Số liệu thống kê

Các bài kiểm tra t của Học sinh chưa ghép đôi (hai đuôi) được thực hiện bằng phần mềm GraphPad Prism. ANOVA một chiều hoặc hai chiều được thực hiện khi so sánh ba hoặc nhiều nhóm độc lập. Giá trị P được điều chỉnh để so sánh nhiều lần bằng quy trình Holm-Sˇ`ıdak. P < 0.05 được coi là có ý nghĩa quan trọng. *, P < {{10}}.05; **, P < 0,01; và ***, P < 0,001.

Tài liệu bổ sung trực tuyến

Hình S1 cho thấy mức protein của YTHDF2 trong các tế bào miễn dịch, bao gồm cả tế bào NK để đáp ứng với kích thích IL-15, nhiễm trùng MCMV và sự tiến triển của khối u; thế hệ chuột bị xóa Ythdf2 dành riêng cho NKcell. Hình S2 cho thấy hiệu giá virus ở lá lách và gan của chuột bị nhiễm MCMV cũng như tỷ lệ phần trăm và số lượng tuyệt đối của tế bào Ly49H+ và/hoặc Ly49D+ NK ở chuột bị nhiễm MCMV. Hình S3 cho thấy sự tăng sinh, sống sót, trưởng thành và biểu hiện các thụ thể kích hoạt và ức chế của tế bào NK từ chuột Ythdf2WT và Ythdf2ΔNK. HìnhS4 thể hiện sự điều chỉnh biểu hiện YTHDF2 bằng tín hiệu IL{14}}STAT5 và sự biểu hiện của các thành phần của thụ thể IL-15, đường dẫn PI3K–AKT và đường dẫn MEK–ERK trong các ô NK từ Ythdf2WT và Ythdf2ΔNK chuột. Hình. S5 thể hiện các xét nghiệm RNA-seq, m6A-seq và RIP-seq trên toàn bộ phiên mã trong các tế bào NK. Bảng S1 liệt kê các đoạn mồi được sử dụng trong nghiên cứu.

Tính khả dụng của dữ liệu

Dữ liệu RNA-seq, m6A-seq và RIP-seq đã được gửi vào Trung tâm Thông tin Công nghệ sinh học Quốc gia GEO theo số gia nhập. GSE174027. Dữ liệu còn lại hỗ trợ cho kết quả của nghiên cứu này có sẵn từ các tác giả tương ứng theo yêu cầu.

Sự nhìn nhận

Công trình này được hỗ trợ bởi Viện Y tế Quốc gia (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 và CA210087), Hiệp hội Bệnh bạch cầu và Ung thư hạch (1364-19), Viện Y học Tái tạo California (DISC2Covid{{ 9}}) và Giải thưởng Dự án Đặc biệt năm 2021 của Liên minh Ung thư Vú. Công việc này cũng được hỗ trợ một phần bởi USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Đóng góp của các tác giả: S. Ma, J. Yu và MA Caligiuri Hình thành và thiết kế dự án. S. Ma, J. Yan, J. Zhang và J. Yu đã thực hiện các thí nghiệm và/hoặc phân tích dữ liệu. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun và J. Chen đã đóng góp thuốc thử và hỗ trợ vật chất. S. Ma, J. Yu, J. Chen và MA Caligiuri đã viết, xem xét và/hoặc sửa đổi bài báo. Tất cả các tác giả đã thảo luận về kết quả và nhận xét về bản thảo.

Tiết lộ: J. Chen đã báo cáo "khác" từ Genovel BiotechCorp. ngoài công việc đã nộp và là người sáng lập khoa học của Genovel Biotech Corp. và là cố vấn khoa học về ung thư chủng tộc. Không có tiết lộ nào khác được báo cáo.

Người giới thiệu

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill và LL Lanier. 2002. Nhận biết trực tiếp cytomegalovirus bằng cách kích hoạt và ức chế thụ thể tế bào NK. Khoa học. 296:1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli và FE Baralle. 2008. TDP-43 điều chỉnh quá trình phosphoryl hóa protein u nguyên bào võng mạc thông qua việc ức chế biểu hiện kinase 6 phụ thuộc cyclin. Proc. Natl. Học viện. Khoa học. HOA KỲ. 105:3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, `D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han và những người khác. 2017. METTL3 gắn với chất xúc tác duy trì bệnh bạch cầu dòng tủy bằng phương pháp kiểm soát dịch mã phụ thuộc m6A. Thiên nhiên. 552:126–131.

4.Becknell, B. và MA Caligiuri. 2005. Interleukin-2, interleukin-15 và vai trò của chúng trong các tế bào tiêu diệt tự nhiên của con người. Khuyến cáo. Miễn dịch. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim và RA de Bruin. 2013. Kiểm soát quá trình sao chép chu kỳ tế bào trong giai đoạn G1 và S. Nat. Linh mục Mol. Tế bào sinh học. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura,JA Best, AW Goldrath và LL Lanier. Hiệp hội dự án bộ gen miễn dịch. 2012. Định nghĩa phân tử về nhận dạng và kích hoạt các tế bào tiêu diệt tự nhiên. Nat. Miễn dịch. 13:1000–1009.

7.Carson, CHÚNG TÔI, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein và MA Caligiuri. 1994. Interleukin (IL) 15 là một cytokine mới kích hoạt các tế bào tiêu diệt tự nhiên của con người thông qua các thành phần của thụ thể IL-2. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann và MA Caligiuri. 1997. Vai trò tiềm năng của interleukin-15 trong việc điều hòa sự sống sót của tế bào tiêu diệt tự nhiên ở người.J. Phòng khám. Đầu tư. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth và L. Martinet. 2014. Cơ chế phân tử kích hoạt tế bào tiêu diệt tự nhiên để ứng phó với căng thẳng tế bào. Cái chết của tế bàoKhác biệt. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, et al. 2016. Liệu pháp kết hợp tế bào EGFR-CAR NK và vi rút herpes simplex 1 điều trị ung thư vú di căn não.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com