Các phân tử viêm liên quan đến lão hóa da qua trung gian bức xạ tia cực tím Phần 1

Xin vui lòng liên hệoscar.xiao@wecistanche.comđể biết thêm thông tin

Trừu tượng:Da là cơ quan lớn nhất và phức tạp nhất trong cơ thể con người bao gồm nhiều lớp với các loại tế bào khác nhau. Các loại tác nhân gây căng thẳng môi trường khác nhau, chẳng hạn như bức xạ tia cực tím (UVR), nhiệt độ, chất ô nhiễm không khí, hút thuốc và chế độ ăn uống, đẩy nhanh quá trình lão hóa da bằng cách kích thích các phân tử gây viêm. Lão hóa da do UJVR đặc trưng bởi mất độ đàn hồi, đường nhăn, nếp nhăn, giảm các thành phần biểu bì và hạ bì, tăng tính thấm của biểu bì, chậm lành vết thương và khoảng 90% lão hóa da. Các yếu tố bên ngoài này có thể gây lão hóa thông qua quá trình viêm do oxy phản ứng (ROS) gây ra, cũng như làn da lão hóa là nguồn cung cấp các phân tử viêm tuần hoàn làm tăng tốc độ lão hóa da và gây ra các bệnh liên quan đến lão hóa. Bài viết đánh giá này tập trung vào các con đường viêm liên quan đến lão hóa da qua trung gian UVR.

Từ khóa:viêm nhiễm; bức xạ tia cực tím (UVR); Lão hóa da

Vui lòng bấm vào đây để biết thêm

1. Giới thiệu

Da người là cơ quan lớn nhất trong cơ thể và bảo vệ các cơ quan nội tạng của chúng ta khỏi thế giới bên ngoài và do đó phải tiếp xúc với các loại kích thích môi trường độc hại khác nhau. Lão hóa da là một trong những dấu hiệu lão hóa dễ nhận thấy nhất của con người phụ thuộc vào hiện tượng thời gian (lão hóa nội tại) và các yếu tố bên ngoài (lão hóa bên ngoài hoặc lão hóa ảnh). Lão hóa bên trong là một quá trình sinh lý bình thường, đặc trưng bởi sự giảm sự tăng sinh tế bào ở các lớp cơ bản và sự tích tụ của các tế bào già ở lớp biểu bì và hạ bì, dẫn đến khô da, mỏng, nếp nhăn nhỏ, ngứa [] và dễ bị nhiều rối loạn về da, chẳng hạn như nhiễm trùng, rối loạn tự miễn dịch và bệnh ác tính [2]. Các yếu tố bên ngoài, bao gồm chất ô nhiễm, hút thuốc, chế độ ăn uống, nhiệt độ, và đặc biệt là bức xạ tia cực tím và tia hồng ngoại có ảnh hưởng lớn hơn đến sự trầm trọng hơn của chứng viêm và các kiểu hình lão hóa như nếp nhăn, sắc tố không đều, khô da, giảm độ dày của lớp bì và biểu bì [3]. Bức xạ tia cực tím (UVR) được phát ra tự nhiên từ mặt trời và các nguồn nhân tạo và có thể gây ra tổn thương nghiêm trọng cho da, được gọi là cháy nắng. Các nguồn UVR nhân tạo chủ yếu là đèn hơi thủy ngân, đèn làm mát bằng nước và đèn làm mát bằng không khí chủ yếu được sử dụng cho mục đích chẩn đoán và điều trị.lục bình sa mạcTiếp xúc lâu dài với UVR với liều lượng ít hơn gây ra rám nắng và làm tăng tốc độ lão hóa da, được gọi là hiện tượng ảnh hưởng. UVR từ ánh sáng mặt trời có thể được phân loại thành ba loại theo bước sóng của chúng: UVA (320-400 nm), UVB (280-320 nm) và UVC (100-280 nm) [4]. Trong số đó, hầu như tất cả UVC và một số UVB được hấp thụ bởi tầng ôzôn và không có bất kỳ tác động nào đến da của chúng ta [5,6]. Phần còn lại của UVB có thể xâm nhập vào biểu bì da và gây ra ban đỏ (cháy nắng), trong khi tia UVA có thể xâm nhập vào lớp hạ bì và khoảng 98% là nguyên nhân gây ra lão hóa da chính [7] (Hình 1).

UVB được hấp thụ bởi các tế bào biểu bì gây ra tổn thương DNA, làm tăng stress oxy hóa và các loại oxy phản ứng (ROS), và dẫn đến lão hóa sớm [8,9]. Ngược lại, tia UVA có bước sóng cao hơn có thể gây tổn thương DNA gián tiếp cùng với sự suy thoái sợi collagen và elastin thông qua con đường stress oxy hóa [4]. Nhìn chung, tiếp xúc mãn tính với UVR dẫn đến sự gia tăng nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase và tạo ra ROS, làm tăng chứng viêm, cytokine, chemokine và lão hóa da [10]. Tình trạng viêm mãn tính và dai dẳng do UVR có thể làm suy yếu cơ chế bảo vệ da và làm suy giảm các sợi collagen và elastin, và cuối cùng dẫn đến lão hóa sớm. Mục đích của bài đánh giá này là thảo luận về các phân tử gây viêm liên quan đến lão hóa da qua trung gian UVR.phương pháp chiết xuất flavonoid pdfTrong bài đánh giá này, trọng tâm chính của chúng tôi là trình bày chi tiết về tác động của UVR đối với tế bào sừng biểu bì và nguyên bào sợi ở da trong quá trình lão hóa da.

2. Phản ứng viêm do UVR gây ra

Người ta hiểu rõ rằng phản ứng cấp tính của da với UVR là tình trạng viêm, chẳng hạn như ban đỏ và phù nề, tổn thương DNA và ty thể do ROS gây ra [11]. Các loài ROS chính tham gia vào quá trình này là anion gốc superoxide (O, -), gốc hydroxyl (OH), hydrogen peroxide (H, O,) và các loại oxy đơn (O,) [12]. Người ta đã báo cáo rằng tiếp xúc với tia UVB (290-320 nm) gây ra sự gia tăng đáng kể trong sản xuất ROS trong tế bào sừng biểu bì (HaCaT) của con người cùng với sự giảm khả năng sống của tế bào [13]. ROS là một sản phẩm phụ của quá trình chuyển hóa oxy thường xuyên và có liên quan đến nhiều chức năng sinh lý, chẳng hạn như tín hiệu tế bào, tạo cơ chế bảo vệ chống lại các tác nhân gây bệnh và tăng sinh tế bào. Tuy nhiên, việc tiếp xúc với tia UVR trên da có thể tạo ra lượng ROS tăng lên, gây mất cân bằng giữa sản xuất ROS và cơ chế bảo vệ chống oxy hóa, dẫn đến stress oxy hóa [10,14]. Trong một chu kỳ luẩn quẩn, căng thẳng oxy hóa này có thể làm tăng sản xuất ROS và có thể bắt đầu cả viêm và kích hoạt cytokine tiền viêm, chẳng hạn như interleukin -2 (IL -2), interleukin -6 (IL { {12}}) và yếu tố hoại tử khối u (TNF-), liên quan đến nhiều con đường bao gồm yếu tố hạt nhân tăng cường chuỗi nhẹ kappa của yếu tố B hoạt hóa (NF-kB), yếu tố gây giảm oxy máu 1- alpha (HIF {{17} } a), yếu tố hạt nhân erythroid 2- liên quan đến yếu tố 2 (Nrf -2) và protein hoạt hóa 1 (AP -1) [15,16]. Viêm liên quan đến UVR cũng liên quan đến thiếu klotho. Klotho là một protein xuyên màng còn được biết đến như một loại hormone chống lão hóa bảo vệ chống lại các tác nhân gây căng thẳng khác nhau [17]. Một số nghiên cứu đã xác nhận rằng chức năng của klotho là trung gian của con đường NF-kB. Chiếu xạ tia cực tím gây ra giảm biểu hiện mRNA và protein klotho cùng với tăng biểu hiện cytokine tiền viêm, chẳng hạn như interleukin -1 (IL -1), interleukin -6 (IL -6 ), và TNF- trong ô HaCaT. Hơn nữa, sự biểu hiện quá mức của klotho trong tế bào sừng của người làm giảm tổn thương tế bào do tia UV gây ra và tình trạng viêm bằng cách ức chế sự chuyển vị của hạt nhân NF-kB và nó cũng làm giảm sự viêm nhiễm gây ra H2O 2- bằng cách ức chế sự biểu hiện của Toll-like Receptor 4 [18,19]. Sirtuins, một nicotinamide adenine dinucleotide (NAD (cộng)) - phụ thuộc histone deacetylase, cũng đang được chú ý nhờ khả năng tăng tuổi thọ vì chúng có thể trì hoãn sự lão hóa của tế bào và thúc đẩy quá trình sửa chữa tổn thương DNA. Nó đã được chứng minh rằng SIRT1, một thành viên của gia đình Sirtuins, có tác dụng chống viêm bằng cách ức chế tín hiệu NF-kB. UVR cũng có thể gây viêm mãn tính bằng cách điều chỉnh giảm biểu hiện SIRT1 trong tế bào sừng của người [20,21] (Hình 2).

2.1 Phản ứng viêm của Major ở biểu bì khi tiếp xúc với tia cực tím

Lớp da ngoài cùng là lớp biểu bì, nó không ngừng đổi mới và biệt hóa. Nó cũng hoạt động như một rào cản chống lại thế giới bên ngoài và chịu tác động trực tiếp nhất từ ​​môi trường xung quanh, chủ yếu là UVR. Lớp biểu bì chủ yếu bao gồm bốn loại tế bào: chủ yếu là tế bào sừng (~ 90%), tế bào hắc tố, Tế bào Langerhans và Tế bào Merkel [22]. Tế bào sừng tạo thành một rào cản nước nhờ lớp sừng (SC), được tạo ra trong lớp đáy biểu bì, và các điểm nối chặt chẽ tạo thành một rào cản trong lớp hạt [23]. Hầu như tất cả UVB được hấp thụ bởi SC, lớp ngoài cùng của biểu bì. Một số bài báo đã nghiên cứu tác động của UVR trong lớp biểu bì [24-26]. Tổn thương SC chính do tiếp xúc với tia cực tím bao gồm kết cấu thô ráp và mất nước, giảm bong vảy và chức năng rào cản, cũng như các tác động bất lợi đối với sự gắn kết của tế bào [27]. Biểu bì bị chiếu tia UV mãn tính được đặc trưng bởi lớp biểu bì mỏng đi, nếp nhăn nhỏ, khô và chức năng hàng rào biểu bì bị gián đoạn [26,28].flavonoidCác nghiên cứu trong ống nghiệm đã chứng minh sự gia tăng độ dày biểu bì khi chiếu tia UV trên mẫu người, trong khi trong một nghiên cứu lâm sàng, độ dày biểu bì giảm dần ở những nơi tiếp xúc với ánh sáng mặt trời tối thiểu đã được báo cáo [29-32]. Sự khác biệt này phụ thuộc vào thời gian tiếp xúc với tia cực tím. Kích thích cấp tính với tia cực tím giúp tăng sinh tế bào sừng thông qua việc kích hoạt thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR), trong khi tiếp xúc mãn tính với ánh sáng mặt trời làm tăng tốc quá trình lão hóa, làm cho lớp biểu bì mỏng hơn với các nếp nhăn phẳng (Hình 3). Mặt khác, những vùng da không tiếp xúc với ánh nắng của người già có độ dày tương đương với vùng da của người trẻ [33].

Nó đã được chứng minh rằng tiếp xúc với tia UVB làm gián đoạn chức năng hàng rào biểu bì ở chuột đực không lông Balb / c theo cách phụ thuộc vào liều lượng [34,35], và sự gián đoạn hàng rào da có thể dẫn đến phản ứng viêm cấp tính hoặc làm trầm trọng thêm các bệnh viêm da mãn tính, chẳng hạn như như viêm da dị ứng [36]. Mất nước qua biểu bì (TEWL) thường được biết đến như một thông số để đo sự phá vỡ hàng rào bảo vệ da và nhiều báo cáo đã xác nhận rằng các liều lượng UV khác nhau có thể gây ra sự gia tăng TEWL trong mẫu thí nghiệm của người và chuột [37-40]. Trong lớp biểu bì, có một số con đường truyền tín hiệu viêm kết nối với các thụ thể bề mặt khác nhau, chẳng hạn như EGFR [41, thụ thể yếu tố tăng trưởng biến đổi (TGFR) [42, A43], thụ thể giống số (TLR) [44], IL {{ 10}} thụ thể và thụ thể TNF (TNFR) [45-47]. Nguồn chủ yếu của cytokine trong biểu bì là tế bào sừng và các cytokine chính được tiết ra từ tế bào sừng khi chiếu tia UVR là Interleukins (IL -1, IL -3, IL -6, IL -8 , IL -33), yếu tố kích thích thuộc địa (GM-CSF, M-CSF, G-CSF) và yếu tố tăng trưởng chuyển đổi (TGF-), yếu tố tăng trưởng biến đổi (TGF-), TNF-c, cao- nhóm di động box1 (HMGB1) và yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF) [48-50]. UVR có thể kích hoạt tín hiệu trực tiếp bằng cách sản xuất ROS hoặc gián tiếp bởi DNA hoặc tổn thương ty thể và sau đó kích hoạt viêm. Các nghiên cứu trước đây về tình trạng viêm qua trung gian UVR được tóm tắt trong Bảng 1.

Tín hiệu EGFR đóng một vai trò quan trọng trong tăng sinh tế bào sừng, biệt hóa, kết dính tế bào, di chuyển và tồn tại. Tuy nhiên, vai trò của EGFR đối với phản ứng viêm khi UVR là rất phức tạp. Một báo cáo đã chứng minh rằng chuột được chiếu xạ tia UV và tế bào sừng được điều trị bằng chất ức chế EGFR cho thấy các phản ứng viêm bị ức chế, chẳng hạn như giảm thâm nhập tế bào miễn dịch và giảm mức độ các cytokine gây viêm (TNF-, IL -8, IL -1 a, Cyclooxygenases (COX2)) [77]. Kết quả cũng cho thấy EGFR chịu trách nhiệm một phần cho phản ứng viêm kích hoạt p38 mitogen-kinase (MAPK) [77]. Ai cũng biết rằng tín hiệu p38 MAPK liên quan đến quá trình sản xuất cytokine gây viêm đa dạng, dẫn đến các bệnh sinh da khác nhau, bao gồm cả hình ảnh. Sự biểu hiện COX -2 do UV gây ra chủ yếu phụ thuộc vào con đường tín hiệu p38 MAPK [78] và điều chỉnh sự tiết ra prostaglandin 2 (PGE2), là những cytokine gây viêm chủ yếu chịu trách nhiệm cho sự xâm nhập tế bào miễn dịch, sưng và phù [79 ].sử dụng hesperidinTuy nhiên, một số báo cáo gần đây đã chỉ ra rằng điều trị bằng chất ức chế EGFR kéo dài có thể dẫn đến kiểu hình lão hóa da sớm do stress oxy hóa do ROS gây ra hoặc sự lão hóa tế bào do ngừng chu kỳ tế bào [80]. Do đó, vai trò của EGFR đối với lão hóa da qua trung gian UVR là rất phức tạp và vẫn chưa được làm sáng tỏ. NF-kB là một trong những chất trung gian chính của quá trình viêm tế bào và đã có cơ sở rõ ràng rằng chiếu tia UV có thể làm tăng hoạt động phiên mã NF-kB, dẫn đến các tín hiệu viêm mãn tính [81]. Tế bào sừng của người được chiếu tia UV cho thấy sự biểu hiện của các cytokine gây viêm IL -1, IL -6, IL -8 và TNF- tăng lên thông qua con đường NF-kB [82,83]. TLR được biểu hiện trong tế bào sừng biểu bì và tế bào Langerhans và rất quan trọng trong việc xác định mầm bệnh và phản ứng miễn dịch. Nó đã được chứng minh TLR có một chức năng quan trọng trong tình trạng viêm qua trung gian UV thông qua con đường tín hiệu hạ lưu của nó liên quan đến NF-kB. Cụ thể, các tế bào sừng bị tổn thương do tia UV tiết ra RNA không mã hóa có thể kích hoạt TLR3 và gây ra các phản ứng viêm, chẳng hạn như TNF- và I -6 [84]. Biểu bì da có biểu hiện chủ yếu của TNFR, và TNF- có thể kích hoạt các con đường viêm khác nhau thông qua NF-kB và MAPK. Người ta đã báo cáo rằng chiếu tia UV làm tăng đáng kể cả TNF hòa tan và có chiều dài đầy đủ trong tế bào sừng biểu bì [85]. Mặc dù biểu bì liên tục đổi mới và quá trình chết rụng tế bào là một yếu tố cần thiết cho cân bằng nội môi của biểu bì, nhưng cũng cần lưu ý rằng quá trình chết rụng, chết sớm hoặc quá mức có thể dẫn đến rối loạn điều hòa cân bằng nội môi của biểu bì và thúc đẩy các kiểu hình lão hóa, chẳng hạn như tế bào cháy nắng.đế chế mất tích cistancheNgười ta đã chứng minh rằng TNF- có thể gây chết tế bào sừng bằng con đường thụ thể TNFR -1 hoặc p55 do tia cực tím gây ra [86, 87]. Sự biểu hiện của TGF- tương đối thấp hơn ở lớp biểu bì của con người, phần lớn được biểu hiện ở các lớp đáy biểu bì và chịu trách nhiệm về cân bằng nội môi của biểu mô, chữa lành vết thương và phản ứng chống viêm [88]. Chiếu xạ UV mãn tính có thể làm giảm tổng hợp TGF - 2 bằng cách giảm biểu hiện mRNA của thụ thể TGF-type II (T RII) [89,90].

Cistanche có thể chống lão hóa

2.2 Phản ứng viêm của Major ở da khi tiếp xúc với tia cực tím

Lớp hạ bì chủ yếu bao gồm collagen, sợi đàn hồi, dây thần kinh, mạch máu, nang lông và các tuyến, trong đó thành phần chính của lớp hạ bì là collagen [91]. Các loại tế bào chính trong lớp hạ bì là nguyên bào sợi, tế bào cơ trơn mạch máu, đại thực bào, tế bào mỡ, tế bào mast, tế bào Schwann và tế bào gốc nang [91,92]. Nguyên bào sợi cung cấp cho lớp hạ bì một ma trận ngoại bào giàu collagen (ECM) và sự thâm nhập tế bào miễn dịch được duy trì bởi các mạch máu và mạch bạch huyết [93,94]. Lớp hạ bì bị ảnh hưởng chủ yếu có đặc điểm là lớp hạ bì mỏng, hàm lượng collagen giảm, các sợi collagen phân mảnh và vô tổ chức, suy thoái sợi đàn hồi và tổn thương mô liên kết da nghiêm trọng, dẫn đến các dấu hiệu lão hóa da dễ thấy nhất, chẳng hạn như hình thành nếp nhăn, da teo mỏng manh , chậm lành vết thương và chảy xệ [95]. Có nhiều nghiên cứu in-vivo và in-vitro đã khám phá tác động của UVR trên lớp hạ bì (Bảng 1).

Các sợi collagen và sợi elastin bị hư hỏng là thành phần rõ ràng nhất của lớp hạ bì già qua trung gian UVR, nguyên nhân chủ yếu là do sự tổng hợp metalloproteinase phân hủy ma trận (MMPs) thông qua tín hiệu MAP kinase [14]. MMPs là một họ endopeptidase phổ biến và tham gia vào các quá trình viêm bằng cách điều chỉnh hoạt động chemokine [96,97]. Người ta đã báo cáo rằng MMP chịu trách nhiệm cho sự suy thoái collagen, chủ yếu thông qua collagenase -1 (MMP -1), stromelysin -1 (MMP -3) ​​và gelatinase B (MMP { {9}}), làm phân hủy trực tiếp và hoàn toàn collagen [98]. Một báo cáo cho thấy sự biểu hiện gia tăng của MMP -1, MMP -2, MMP -3, MMP -9, MMP -11, MMP -17 và MMP -27 ở cẳng tay người được chụp ảnh có tương quan với giảm biểu hiện procollagen loại I [99]. Collagen loại I là protein phong phú nhất trong ECM, và các sợi collagen được tổng hợp bởi procollagens (phân tử tiền chất collagen) thông qua một loạt các phản ứng [100]. Một báo cáo khác cho thấy biểu hiện MMP -1 tăng lên ở da người được chiếu xạ tia cực tím cùng với sự suy thoái collagen [101]. UVR cũng có thể bắt đầu suy thoái collagen bằng cách giảm tổng hợp procollagen, và đã có báo cáo rằng UVR có thể làm giảm tổng hợp procollagen bằng cách điều chỉnh giảm con đường tín hiệu TGF- / Smad [102]. TGF- bắt đầu truyền tín hiệu thông qua liên kết với các thụ thể trên bề mặt tế bào (TGF- loại I và loại II), sau đó phiên mã các gen liên kết TGF - - bằng cách phosphoryl hóa phức hợp Smad2 / Smad3. Người ta đã báo cáo rằng TGF- có thể kích hoạt hoạt động promoter của gen collagen loại I (COL1A2) thông qua con đường tín hiệu Smad [103]. Một báo cáo cho thấy rằng chiếu tia UV ức chế sự chuyển vị hạt nhân Smad2 / Smad3, dẫn đến giảm sự phiên mã và tổng hợp protein của thụ thể TGF-type II và biểu hiện procollagen type I ở chuột không có lông và ở nguyên bào sợi da của người [76.102.104] (Hình 4).

Các yếu tố gây căng thẳng khác nhau bao gồm bức xạ UV có thể kích hoạt phản ứng tổn thương DNA có thể bắt đầu quá trình bắt giữ chu kỳ tế bào thông qua con đường p53 / p21 liên quan đến dòng thác P38 / MAPK và con đường NF-kB [105]. Nó đã được chứng minh rằng da người tiếp xúc với tia cực tím có sự tích tụ cao đáng kể của các tế bào già [106]. Sự tích tụ của các nguyên bào sợi tuổi già có thể đẩy nhanh quá trình lão hóa da bằng cách tiết ra các yếu tố kiểu hình bài tiết liên quan đến sự lão hóa (SASP), bao gồm IL -1 a, IL -1, IL -6, IL -8, và các yếu tố MMPs.SASP được tiết ra từ các nguyên bào sợi tuổi già là nguyên nhân gây ra tình trạng viêm mãn tính cũng như suy thoái ECM, dẫn đến hiện tượng hình ảnh [107]. Hình 5 giải thích các con đường tín hiệu chính liên quan đến quá trình quang ảnh qua trung gian UV.

3. Kết luận

Bài đánh giá này đã tóm tắt mối liên hệ giữa các phân tử gây viêm và quá trình lão hóa da qua trung gian UVR. Quá trình lão hóa tự nhiên có thể được đẩy nhanh bởi các yếu tố bên ngoài, chủ yếu là UVR, gây tổn thương trực tiếp đến DNA hoặc gián tiếp bằng cách tạo ra các gốc. Ở da, tế bào sừng biểu bì là nguồn chính sản xuất cytokine và nguyên bào sợi ở da là nguồn chính của MMPs và người ta đã chứng minh rằng tổn thương DNA dẫn đến việc giải phóng các phân tử gây viêm từ tế bào sừng biểu bì (IL -1, IL { {1}}, IL -6, IL -8, GM-CSF, M-CSF, G-CSF, TGF-, TGF-, TNF- và PDGF) và từ các nguyên bào sợi ở da (MMP { {10}}, MMP -2, MMP -3, MMP -9, MMP -11, MMP -17 và MMP -27) [48 ]. Viêm mãn tính có thể làm trầm trọng thêm quá trình lão hóa và dẫn đến việc bài tiết các yếu tố SASP trong nguyên bào sợi da và tế bào hắc tố [108,109]. Sự bài tiết yếu tố SASP mãn tính là nguyên nhân của nhiều bệnh lý liên quan đến tuổi tác, ví dụ, xơ vữa động mạch, bệnh tiểu đường loại 2, béo phì, bệnh tim mạch, bệnh suy giảm thần kinh, bệnh thoái hóa thần kinh và bệnh Alzheimer [110-113]. Vì người ta đã chứng minh rằng các phản ứng viêm sau khi tiếp xúc với tia cực tím có thể đẩy nhanh quá trình lão hóa cũng như sinh lý bệnh liên quan đến tuổi tác, các phương pháp tiếp cận mới nhắm vào các phân tử gây viêm này cần được phát triển.

Bài viết này được trích từ Int. J. Mol. Khoa học. 2021, 22, 3974. https://doi.org/10.3390/ijms22083974 https://www.mdpi.com/journal/ijms