Hình ảnh vi tuần hoàn thận trong liệu pháp tế bào

Liên hệ: ali.ma@wecistanche.com

Katerina Apelt et

Cistanche gốc cho bệnh thận, bấm vào đây để lấy mẫu

Trừu tượng:

Thậnsự hiếm gặp vi mạch đóng một vai trò quan trọng trong quá trình tiến triểnquả thậndịch bệnh. Do đó, các phương thức hình dung vi tuần hoàn của thận sẽ làm tăng hiểu biết của chúng ta về cơ chế bệnh tật và do đó có thể cung cấp các phương pháp tiếp cận mới để đánh giá liệu pháp dựa trên tế bào. Tuy nhiên, hiện tại, thực hành lâm sàng đang thiếu các phương thức hình ảnh không xâm lấn, an toàn và hiệu quả để theo dõi những thay đổi vi mạch thận theo thời gian ở những bệnh nhân bị bệnh thận. Để nhấn mạnh tầm quan trọng, chúng tôi tóm tắt kiến ​​thức hiện tại về vi tuần hoàn thận và thảo luận về sự liên quan đến bệnh thận tiến triển. Hơn nữa, tổng quan về các kỹ thuật hình ảnh hiện có để khám phá hình thái, chức năng và hành vi vi mạch thận được trình bày với những lợi ích và hạn chế liên quan. Cuối cùng, sự cần thiết phải đánh giá và điều tra bệnh thận dựa trên các kết quả đọc in vivo với độ phân giải lên đến mức mao mạch có thể cung cấp một sự thay đổi mô hình cho chẩn đoán và điều trị trong lĩnh vựckhoa thận học.

Từ khóa: quả thận; vi tuần hoàn; vi mạchsự hiếm có; liệu pháp tế bào; hình ảnh

1. Giới thiệu

Hệ mạch thận có cấu trúc phức tạp về mặt giải phẫu, phản ánh chức năng sinh lý độc nhất của nó [1]. Bất chấp sự thích ứng năng động của mạng lưới vi mạch đối với những thay đổi huyết động, rối loạn chức năng mạch máu có thể là hậu quả hoặc thậm chí là nguyên nhân củaquả thậnsự phát triển và tiến triển của bệnh [2,3]. Do đó, rối loạn chức năng vi mạch có thể là dấu hiệu ban đầu của tổn thương thận xơ hóa, có nghĩa là đánh giá không xâm lấn và xác nhận cấu trúc và chức năng vi mạch thận sẽ là một cải tiến lớn để đánh giá hiệu quả của các liệu pháp nhằm giảm xơ hóa thận.

Trong thực hành lâm sàng, mức độ nghiêm trọng của bệnh mãn tínhquả thậnbệnh (CKD) được phân loại dựa trên mức lọc cầu thận (GFR) phản ánh mức độ nhẹ (60–89 mL / phút / 1,73 m2), trung bình (30–59 mL / phút / 1,73 m2) hoặc nặng (15–29 mL / tối thiểu / 1,73 m2) giảmquả thậnhàm sốdựa trên các danh mục được xác định trước [4]. Tiến triển của bệnh thành CKD tiến triển và bệnh thận giai đoạn cuối (ESRD) được xác định bằng sự xuất hiện của xơ cứng cầu thận và xơ hóa mô kẽ với GFR dưới 15 mL / phút / 1,73 m2. Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng hiện tượng mất mao mạch thận, tức là sự hiếm gặp của vi mạch thận, tương quan chặt chẽ với mức độ nghiêm trọng của bệnh thận và có liên quan đến sinh học của quá trình tiến triển tiếp theo đối với CKD [3,5-7]. Sự hình thành xơ hóa thận được đánh dấu là đặc điểm trung tâm của tình trạng mất mao mạch phúc mạc như vậy và sau đó là mất biểu mô thận. Nếu vi mạch của thận có thể được bảo vệ hoặc thậm chí phục hồi, tính toàn vẹn của mô cấu trúc thận sẽ được cải thiện và sự tiến triển của bệnh có thể được ngăn chặn [2,8]. Ngoài ra, một cửa sổ điều trị có thể được xác định để đánh giá mức độ nghiêm trọng của tổn thương trước khi mức độ tổn thương thận là không thể phục hồi. Đặc biệt, việc sử dụng các liệu pháp tế bào như các ứng dụng đầy hứa hẹn của tế bào mô đệm trung mô (MSC) có thể được đánh giá và tinh chế để điều trị các bệnh mạch máu thận. Tuy nhiên, sự hiểu biết chi tiết về sự hiếm gặp vi mạch thận vẫn còn bị cản trở do không có các phương thức hình ảnh cho phép theo dõi cấu trúc và chức năng của mạch với độ phân giải cao và không xâm lấn.

Trong bài tổng quan này, chúng tôi tóm tắt kiến ​​thức hiện tại về hệ vi tuần hoàn thận và các cơ chế bệnh lý có thể ảnh hưởng đến vi tuần hoàn. Chúng tôi thảo luận về tầm quan trọng của pericytes và cung cấp những hiểu biết sâu sắc về vai trò trung tâm của chúng trong việc gây ra sự tiến triển của bệnh thận do rối loạn chức năng vi mạch và hiếm gặp, cũng như sự phát triển củaquả thậnxơ hóa. Sau đó, chúng tôi mô tả những phát triển mới trong kỹ thuật hình ảnh có thể theo dõi những thay đổi như vậy trong vi tuần hoàn thận.

2. Mạch máu thận

2.1. Tuần hoàn máu thận

Hệ vi tuần hoàn của cơ thể con người bao gồm các tiểu động mạch, mao mạch và tiểu tĩnh mạch và có tác dụng trao đổi oxy, chất dinh dưỡng và các chất chuyển hóa giữa máu và mô xung quanh [8,9]. Rõ ràng, chức năng quan trọng của vi tuần hoàn được điều chỉnh chặt chẽ dựa trên nhu cầu trao đổi chất của cơ quan. Trách nhiệm chính của các tiểu động mạch là điều hòa lưu lượng máu bằng cách điều chỉnh sức cản để đảm bảo có thể thực hiện được sự trao đổi chất sống ở mức độ mao mạch [10]. Về vấn đề này, sự thích nghi liên tục với nhu cầu nội môi của mô bên dưới chủ yếu phụ thuộc vào tính dẻo động của các tế bào nội mô. Đồng thời, sức khỏe nội mô của vi tuần hoàn dựa vào sự giao tiếp giữa các tế bào chặt chẽ với pericytes giúp ổn định về mặt vật lý các mạch máu, điều chỉnh sự hình thành mạch và kiểm soát lưu lượng máu [11,12].

Thận là một cơ quan có tính mạch máu cao thể hiện các đặc điểm hình thái và chức năng độc đáo phản ánh sự không đồng nhất đáng chú ý của mạng lưới mạch máu của nó [1,10]. Máu đi vào thận qua động mạch thận qua hilum (Hình 1), hệ thống này tiếp tục chia đôi trong bể thận thành các động mạch phân đoạn và các nhánh tăng dần ở mức đài hoa nhỏ thành các động mạch liên đốt, lan truyền giữa các tháp thận [1,13 ]. Tại ranh giới giữa vỏ và tủy, các động mạch liên đốt đổ vào động mạch cung, tạo thành một ngăn cách giải phẫu giữa cả hai ngăn thận [1]. Trong vỏ não, các động mạch liên cầu, còn được gọi là các động mạch phát xạ vỏ não hoặc các tiểu động mạch xuyên vỏ não, phát sinh vuông góc từ các động mạch cung và phân kỳ thành các tiểu động mạch hướng tâm để cung cấp cho các nhánh khác nhau của cây cầu thận. Tùy thuộc vào vị trí của các cầu thận, máu được lọc sẽ tập hợp lại trong đám rối mao mạch vỏ não bao quanh ống gần và ống xa hoặc đám rối mao mạch tủy ở mức độ quai Henle. Cuối cùng, máu chảy vào hệ thống tĩnh mạch chạy song song với mạng lưới động mạch ra khỏi thận qua các cơ liên cầu, cung, liên đốt, phân đoạn và cuối cùng là tĩnh mạch thận ngay trên niệu quản. Nói chung, mô hình mạch máu cơ bản này được bảo tồn trên các loài động vật có vú [14,15].

2.2. Mạng lưới mao mạch của thận

Sự phức tạp của kiến ​​trúc vi mạch thận được phản ánh bởi hình thái đa dạng của các mạch máu thận khác nhau (Hình 2). Sự không đồng nhất về cấu trúc và chức năng của nội mô thận và các tế bào quanh mạch xung quanh của chúng song hành chặt chẽ với kiểu mạng lưới mao mạch [15–17]. Trên thực tế, sự hiện diện của các giường mao mạch khác nhau là một đặc điểm đáng chú ý đảm bảo quá trình lọc qua mạng mao mạch cầu thận, cũng như bài tiết và tái hấp thu qua mạng mao mạch phúc mạc và mạng mao mạch tủy [1,13,14]. Vi tuần hoàn vỏ não chủ yếu đảm bảo tái hấp thu dịch lọc ở cầu thận, trong khi sự bài tiết muối và nước chủ yếu được điều hòa bởi ngăn vi mạch tủy [14]. Điều thú vị là mặc dù tủy tạo ra khoảng 30% tổng khối lượng mô thận, nhưng chỉ có 10% tổng lưu lượng máu qua thận (RBF) bao gồm phần này [10]. Dựa vào vị trí giải phẫu, có thể chia vi tuần hoàn thận thành (i) vi tuần hoàn vỏ não; và (ii) vi tuần hoàn tủy [13,14].

Vi tuần hoàn vỏ não được ngăn cách về mặt vật lý bởi các động mạch vòng cung làm phát sinh các động mạch liên cầu mà các động mạch này phân nhánh xa hơn từ cả hai bên thành một số tiểu động mạch hướng tâm để cung cấp cho mạng lưới mao mạch cầu thận [14]. Sự phân nhánh xảy ra ở một góc độ khác nhau tùy thuộc vào vị trí của các cầu thận trong vỏ não. Qua tiểu động mạch hướng tâm, mạng lưới mao mạch cầu thận bao gồm 6–8 vòng mao mạch được cung cấp máu để thoát ra ngoài qua tiểu động mạch hướng tâm sau khi được lọc [10]. Các mao mạch cầu thận (Hình 2a) được hình thành bởi một lớp nội mô mỏng, liên tục và chủ yếu là phẳng, được bao phủ bởi các tế bào nang. Các khu vực bị sốt có thể chiếm tới 20–50 phần trăm toàn bộ bề mặt tế bào của chúng [16]. Cầu thận vỏ não chiếm 90% tổng số cầu thận có trong thận, và do đó không có gì ngạc nhiên khi hầu hết RBF chủ yếu chảy qua [13]. 10% còn lại của tất cả các cầu thận nằm ở biên giới vỏ-tủy và có kích thước lớn hơn. Bên cạnh sự khác biệt về kích thước của các cầu thận, sự khác biệt về cấu trúc của tiểu động mạch hướng tâm và tiểu động mạch hướng tâm cung cấp cho cầu thận vỏ não và tủy thận có thể được giải thích bởi tầm quan trọng của việc bảo toàn áp lực mao mạch.

Để đảm bảo lọc máu thích hợp, sự khác biệt về đường kính giữa tiểu động mạch hướng tâm (Hình 2b) và tiểu động mạch vỏ não (Hình 2c) là 15 µm so với 10 µm [13]. Huyết áp được điều chỉnh ở phía bên của các tiểu động mạch hướng tâm thông qua các phương tiện thay đổi sức đề kháng giải thích cho nội mô liên tục được bao bọc bởi các tế bào cơ trơn (SMC) [18]. Kiểm tra kỹ hơn tiểu động mạch hướng tâm cho thấy sự hiện diện của hai đoạn mạch máu hơn là một lớp nội mạc đồng nhất dọc theo toàn bộ chiều dài mạch máu như thường gặp. Phần gần của tiểu động mạch hướng tâm bao gồm một nội mô không thấm với các SMC sắp xếp chặt chẽ, cần thiết cho sự co mạch. Ngược lại với phần xa, phần này nằm gần cầu thận và bao gồm một nội mô thấm do sự hiện diện của quá trình hấp thụ. Điều thú vị là hiện tượng sốt này là một đặc điểm không phổ biến ở các mạch có áp lực nội mạch cao. Bên cạnh đó, các pericytes sản xuất renin hình khối bao bọc phần xa của tiểu động mạch hướng tâm để làm trung gian điều hòa huyết áp cục bộ trong cầu thận [17,19].

Máu đã lọc thoát ra khỏi từng tiểu cầu thận qua tiểu động mạch để đến với nhau trong đám rối mao mạch vỏ não dày đặc bao quanh ống thận [10]. Ngoài hệ thống mao mạch cầu thận, ngăn mao mạch thứ hai này được gọi là hệ thống mao mạch phúc mạc [16]. Các mao mạch phúc mạc (Hình 2d) được nung chảy và có thành mỏng với đường kính trung bình khoảng 7 µm [13,15]. Các mao mạch đó cung cấp oxy và chất dinh dưỡng cho các ống nằm trong vỏ thận, nhưng không nhất thiết phải cung cấp cho các ống mà chúng bắt nguồn từ [10,15]. Mao mạch phúc mạc có nội mô liên tục hơn, cũng như đường kính nhỏ hơn so với mao mạch tủy của trực tràng vasa [13,16]. Trong bệnh thận, tổn thương cầu thận cuối cùng sẽ ảnh hưởng đến các mao mạch phúc mạc được sắp xếp theo trình tự ở hạ lưu, và do đó đẩy nhanh tiến triển của bệnh thận [10,20].

Tiểu động mạch hướng tâm bên cạnh (Hình 2e) có đường kính xấp xỉ 20 µm, trong khi đó, tiểu động mạch hướng tâm bên cạnh (Hình 2f) có đường kính trong dày hơn 20–25 µm [13]. Tiểu động mạch tràn ra khỏi cầu thận tủy được bao quanh bởi một số SMC. Sự khác biệt đáng chú ý này về đường kính mạch, cũng như sự gia tăng cơ bắp, đang làm dấy lên cuộc tranh luận về sự liên quan của loại cầu thận này trong bệnh thiếu máu cục bộ. Có vẻ như kiến ​​trúc mạch thận được tổ chức theo một cách nhất định để bảo tồn tủy khỏi tổn thương do thiếu máu cục bộ. Có giả thuyết cho rằng tiểu động mạch hướng tâm và tiểu động mạch hướng tâm của cầu thận phụ có thể không chịu trách nhiệm điều hòa đồng máu trong tủy (MBF), nhưng điều này cũng có thể mâu thuẫn với vai trò của chúng trong việc kiểm soát mức lọc cầu thận [21]. Thay vào đó, dường như ống dẫn tinh (DVR) đi xuống của các bó mạch nằm ở dải bên trong của tủy ngoài chịu trách nhiệm kiểm soát MBF, điều này có thể giải thích cho số lượng cao các pericytes bao bọc khoang mạch này. Do đó, DVR đóng một vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh lâu dài áp lực động mạch [13]. Các tiểu động mạch kéo dài kết nối với các tiểu cầu thận bên trong chảy qua các bó mạch, nằm ở dải trong của tủy ngoài biến thành DVR. DVR làm phát sinh mạng lưới mao mạch tủy được kết nối với ống dẫn tinh tăng dần (AVR) [1].

Vi tuần hoàn tủy bắt đầu khi các tiểu động mạch tràn ra ngoài bắt nguồn từ các tiểu cầu thận xâm nhập sâu hơn vào mô để cung cấp cho 30% mô thận còn lại được gọi là tủy [13,14]. Tủy của một tháp thận về mặt giải phẫu được chia thành hai phần: tủy ngoài nằm ngay dưới vỏ, tiếp theo là tủy trong lan rộng cho đến đỉnh của nhu mô, được gọi là nhú. Nói chung, số lượng các mao mạch tủy tăng lên từ đỉnh tháp thận. Quan sát kỹ hơn cho thấy rằng phần tủy ngoài có thể được chia nhỏ thành dải bên ngoài và dải bên trong có tính mạch máu cao chứa đám rối mao mạch dày đặc và đám rối liên bó [15]. Các mao mạch liên bó được đặc trưng bởi một lớp nội mạc nóng chảy và được liên kết với tĩnh mạch cung [14,22].

Mỗi tiểu động mạch tràn dịch màng phổi tách thành nhiều bó, được gọi là bó mạch, để tạo thành các nhánh của DVR (Hình 2g) có đường kính lớn hơn so với các mao mạch phúc mạc của vỏ não [15,23]. Một số pericyte được gắn vào nội mạc của DVR của bó mạch [17]. Điều thú vị là số lượng pericyte quấn quanh mạch giảm trong DVR (Hình 2h) của tủy trong [15,17]. Sự sắp xếp hình thái này của DVR trong khoang tủy ngoài và trong phản ánh chức năng kép của nó [10]. Nói rõ hơn, sự co mạch của DVR chủ yếu xuất hiện ở phần gần, nằm ở phần tủy ngoài [15]. Tuy nhiên, ở phần xa, tức là nội tủy, chủ yếu diễn ra quá trình trao đổi chất điện giải. Sự khác biệt về mặt giải phẫu này trực tiếp ngụ ý một quần thể nhỏ riêng biệt của pericytes về hình thái và đặc tính chức năng [15,17].

Nằm sâu trong tủy bên trong, các nhánh khác nhau của DVR tách thành một mạng lưới mao mạch phức tạp trước khi kết nối với AVR nhỏ hơn đáng kể [10]. Nội mô của DVR là liên tục, trái ngược với các tế bào nội mô của AVR (Hình 2i), chúng bị sốt cao. Cuối cùng, tất cả máu được thu thập từ AVR, cũng như các mao mạch phúc mạc của đám rối mao mạch vỏ não vào hệ thống tĩnh mạch. Nói chung, các tĩnh mạch thận hiển thị một thành mạch cực kỳ mỏng và các tĩnh mạch liên đốt, hình cung, và các tĩnh mạch liên thanh được tạo ra và chứa các màng ngăn. Đáng ngạc nhiên là các tĩnh mạch liên tế bào nhìn chung có sự tương đồng lớn hơn với các mao mạch phúc mạc hơn là với các tĩnh mạch do biểu mô mỏng và đặc.

Các phân đoạn vi mạch thận khác nhau và hình thái trang nhã của chúng ở cấp độ tế bào làm dấy lên nghi ngờ rằng sự phức tạp hiện có được chuyển thành một cơ chế bệnh thậm chí còn phức tạp hơn. Do đó, phần sau tập trung vào các quá trình cơ bản liên quan đến trục trặc vi mạch thận.

3. Trục trặc vi mạch thận

3.1. Rối loạn chức năng nội mô

Nội mạc thận hầu như không hoạt động trong các điều kiện sinh lý; tuy nhiên, để phản ứng với những thay đổi vi môi trường, tức là căng thẳng cắt, thiếu oxy, stress oxy hóa, hoặc viêm tinh hoàn, sự hoạt hóa tế bào nội mô xảy ra và các yếu tố tăng trưởng tạo mạch được tạo ra [24]. Tùy thuộc vào yếu tố kích hoạt, sự hoạt hóa tế bào nội mô có thể tạo ra kiểu hình tiền viêm và tiền huyết khối để thúc đẩy sự kết dính và xâm nhập của tế bào miễn dịch để hình thành microthrombi. Tuy nhiên, để duy trì hàng rào mạch máu cho chức năng điều hòa rộng lớn phù hợp và tính thấm để vận chuyển chất tan, điều cần thiết là phải điều chỉnh chặt chẽ trạng thái trao đổi chất của tĩnh lặng, cũng như các tế bào nội mô hoạt hóa.

Tính toàn vẹn của mô và chức năng cơ quan chủ yếu phụ thuộc vào sự tưới máu phù hợp của mạng lưới vi mạch [8]. Do đó, không có gì ngạc nhiên khi các tế bào nội mô thể hiện tính dẻo cao để đảm bảo sự thích nghi năng động với những thay đổi của môi trường bằng cách điều chỉnh số lượng, hình thái và chức năng của mao mạch [1,2,8]. Tuy nhiên, một thời gian dài huyết áp tăng cao gây ra những thay đổi không thể đảo ngược trong vi tuần hoàn, làm phát sinh các tế bào nội mô bị tổn thương, đặc trưng bởi các đặc tính thích nghi bị suy giảm. Sự cân bằng nội môi bị gián đoạn này được phản ánh bởi sự giảm nitric oxide (NO), yếu tố gây thiếu oxy -1 (HIF -1) và yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF), cùng với sự gia tăng của các yếu tố khác như như angiostatin, endostatin và thrombospondin [1]. Đáng chú ý, tính nhạy cảm với rối loạn chức năng nội mô ở thận rất đa dạng và phụ thuộc vào loại tế bào nội mô nằm trong các ngăn khác nhau của vi tuần hoàn thận [16,24]. Để làm sáng tỏ các kiểu hình không đồng nhất của tế bào nội mô thận và phản ứng khác nhau của chúng đối với những thay đổi vi mạch, Dumas et al. [25] gần đây đã cung cấp một bản đồ có độ phân giải cao của nội mô thận bằng cách sử dụng giải trình tự RNA đơn bào.

Rối loạn chức năng nội mô thường đồng thời xảy ra với sự suy giảm cấp tính và tiến triển của chức năng thận [24]. Sự cố này gây ra tăng sức cản mạch máu, kèm theo giảm RBF [26]. Thời gian co mạch kéo dài gây tưới máu mô không đầy đủ và kích hoạt các yếu tố căng thẳng và tăng trưởng dẫn đến thay đổi hình thái [1]. Tùy thuộc vào mức độ nghiêm trọng và đặc biệt là khoảng thời gian của bất kỳ sự xúc phạm nhất định nào, RBF có thể bị thay đổi không thể phục hồi bằng cách tạo ra những thay đổi cấu trúc trong vi tuần hoàn. Những thay đổi hình thái đó là do một quá trình được gọi là tu sửa vi mạch. Tái tạo vi mạch được định nghĩa là phản ứng với những thay đổi chức năng của vi mạch, do đó có thể gây ra sự thay đổi cấu trúc vi mạch ở cấp độ cấu trúc trong một nỗ lực cuối cùng để đạt được cân bằng nội môi huyết động [1,2,8]. Cuối cùng, rối loạn chức năng nội mô có thể dẫn đến một hiện tượng gọi là 'không tái tạo dòng chảy, theo đó sự tưới máu không thể được phục hồi, cuối cùng dẫn đến tổn thương tế bào biểu mô ống dẫn đến chấn thương thận cấp tính (AKI) [24].

Điều quan trọng cần nhấn mạnh là rối loạn chức năng nội mô không chỉ liên quan đến bệnh thận mà còn tích cực thúc đẩy sự tiến triển của bệnh [24]. Trục trặc vi mạch thận được phản ánh bởi rối loạn chức năng nội mô gây ra bởi tổn thương tế bào, làm rối loạn sự tương tác chặt chẽ của pericytes với lớp nội mô và cản trở sự giao tiếp của tế bào.

3.2. Pericyte tham gia vào trục trặc thận

Đặc điểm trung tâm của CKD là mất dần dần mạng lưới mao mạch phúc mạc, một quá trình được gọi là quá trình hiếm gặp [27]. Bệnh xơ hóa mô kẽ ống dẫn trứng, cũng như biểu mô ống bị tổn thương, có trước sự hiếm gặp mao mạch này ở thận [27], trong khi sự hiếm gặp vi mạch này có tương quan trực tiếp với mức độ nghiêm trọng của xơ hóa [28,29]. Hơn nữa, mức độ hiếm gặp đã được tìm thấy để dự đoán mức độ tổn thương mô kẽ cũng như sự thay đổi mức lọc cầu thận ở bệnh nhân CKD [28]. Những phát hiện này gợi ý vai trò giới hạn tỷ lệ sớm, đối với sự mất ổn định / mất ổn định vi mạch trong sự phát triển của CKD và cơ chế bệnh sinh của xơ hóa [30]. Sự hoạt hóa tế bào nội mô mãn tính bởi các yếu tố nguy cơ tim mạch có thể làm mất đi các pericytes đóng vai trò quan trọng trong sự ổn định và tăng sinh của các mao mạch thông qua tương tác với các tế bào nội mô [31]. Thật vậy, việc tích lũy bằng chứng xác định tầm quan trọng của pericytes và sự liên quan của chúng đối với sức khỏe vi mạch thận [17].

Pericytes là các tế bào hình thành quanh mạch với các quá trình kéo dài bao phủ lớp nội mô được nhúng trong màng đáy của mao mạch [32]. Chúng là các tế bào có nguồn gốc trung mô và phát sinh từ hộp Forkhead D1 (FoxD1) cộng với quần thể tiền thân mô đệm, chúng cũng làm phát sinh các tế bào mô đệm khác của hệ mạch thận bao gồm SMC, nguyên bào sợi thường trú, tế bào renin và tế bào trung bì [33], trong khi tất cả các tế bào nội mô của hệ mạch thận đều có nguồn gốc từ bệnh bạch cầu tế bào gốc (SCL) cộng với tiền nhân [34]. Pericytes khác với nguyên bào sợi thường trú (quanh mạch) vì chúng được nhúng vào màng đáy mạch máu, nhưng hầu hết các nghiên cứu ở thận không phân biệt giữa pericytes và nguyên bào sợi quanh mạch [31,35], có thể là do thiếu dấu hiệu cụ thể. Các dấu hiệu thường được sử dụng để xác định pericytes bao gồm thụ thể yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu- (PDGFR), chondroitin sulfat proteoglycan NG2, -smooth actin (SMA), cụm biệt hóa 73 (CD73) và PDGFR, nhưng các dấu hiệu này xác định khác nhau ( chồng chéo) các tập con của pericyte khu trú ở các vùng giải phẫu khác nhau, phản ánh tính không đồng nhất của quần thể tế bào này [17] và rất có thể là cả sự không đồng nhất về chức năng. Pericytes điều chỉnh chặt chẽ sự phát triển, ổn định, trưởng thành và tái tạo mạch máu [11] và kiểm soát lưu lượng máu bằng cách co mạch. Pericytes được điều chỉnh chức năng bởi các yếu tố co mạch như angiotensin II và adenosine triphosphate (ATP), cũng như bởi các yếu tố giãn mạch như NO và prostaglandin [17]. Sự trưởng thành của các mạch máu phụ thuộc vào việc tuyển dụng các tế bào quanh mạch để ổn định mạch và kiểm soát huyết áp [12].

Trong thận, các pericyte đang bao bọc các phần xa của tiểu động mạch hướng tâm của cầu thận vỏ và chủ yếu hiện diện tại các mao mạch phúc mạc và tại trực tràng vasa [13,19]. Ngoài ra, tế bào trung bì là một tập hợp con (chuyên biệt) của pericytes thận, rất quan trọng trong việc duy trì cấu trúc hỗ trợ cho các mao mạch cầu thận và điều hòa huyết động cầu thận. Hơn nữa, các pericyte cầu thận co lại nằm ở các tiểu động mạch làm trung gian huyết áp cầu thận cục bộ và ảnh hưởng đến huyết áp hệ thống thông qua bài tiết renin [19]. Điều thú vị là, các tế bào tiền thân renin có nguồn gốc từ khoang mô đệm được liên kết về mặt không gian với sự phát triển mạch máu trong khi sự hình thành nhánh động mạch được chứng minh là có trước sự xuất hiện của các tế bào biểu hiện renin tại điểm phân nhánh [33,36]. Hơn nữa, bằng cách sử dụng cá ngựa vằn báo cáo renin chuyển gen, người ta đã chỉ ra rằng các tế bào biểu hiện renin trước các mầm tạo mạch [37]. Ở thận chuột trưởng thành, các tế bào có nguồn gốc renin cũng được quan sát thấy ở các vị trí quanh mạch và đồng nhuộm với các dấu hiệu pericyte (PDGFR / NG2) [38], cho thấy vai trò có thể quan trọng của tập hợp con này trong việc duy trì mạch máu.

3.3. Tương tác tín hiệu tế bào nội mô-Pericyte

Pericytes tương tác với các tế bào nội mô thông qua vô số các hành động tương hỗ qua lại để điều chỉnh các con đường tín hiệu cần thiết cho sự ổn định và hình thành mạch. Pericyte truyền tín hiệu đến nội mô thông qua các yếu tố được tiết ra như VEGF, PDGF, yếu tố tăng trưởng biến đổi- (TGF-), và angiopoietin -1 (Ang -1), cũng như bởi xuyên âm trực tiếp nội mô-pericyte [39 ]. Tương tự, nội mô phát tín hiệu đến các tế bào mô đệm xung quanh bằng cách sử dụng các yếu tố như angiopoietin -2 (Ang -2) ​​và PDGF. Ang -2 can thiệp tiêu cực vào tín hiệu Ang -1- qua trung gian Tie -2, dẫn đến gián đoạn tương tác giữa tế bào pericyte-nội mô và gây mất ổn định mạch sau đó và tái tạo vi mạch bất thường [40,41]. Tầm quan trọng thiết yếu của sự tương tác giữa các tế bào mô đệm quanh mạch và tế bào nội mô trong việc duy trì mạng lưới mao mạch cũng được chứng minh bằng các nghiên cứu trên chuột, chứng minh rằng, khi sự đầu tư của pericytes bị cản trở, mạng lưới mao mạch bị mất ổn định và hiếm xảy ra [42]. Ví dụ, tăng đường huyết làm tăng biểu hiện Ang -2 nội mô khiến các tế bào mô đệm quanh mạch di chuyển khỏi mao mạch [43]. Các nghiên cứu gần đây từ phòng thí nghiệm của chúng tôi đã chứng minh rằng cả ở chuột [44] và ở người hiến tặng thận [45], chấn thương tái tưới máu do thiếu máu cục bộ dẫn đến tăng nhanh cân bằng Ang -2 / Ang -1, có liên quan mất tính toàn vẹn vi mạch. Hơn nữa, ở những bệnh nhân mắc bệnh tiểu đường, sự đảo ngược sức khỏe của mao mạch và giảm tỷ lệ Ang -2 / Ang -1 và thrombomodulin hòa tan (dấu hiệu tổn thương tế bào nội mô) đã được quan sát thấy trong vòng 12 tháng sau khi ghép thận-tụy đồng thời [46 ]. Bên cạnh các con đường angiopoietin / Tie2 [47], nhiễu xuyên âm nội mô-pericyte được điều chỉnh bởi tín hiệu siêu họ TGF [48], VEGF [49] và sphingosine -1- phosphate (S1P) [50].

3.4. Pericytes là tiền thân của nguyên bào sợi Myofi

Các mô hình truy tìm dòng dõi di truyền Murine đã chứng minh rằng pericytes (và các tế bào quanh mạch khác) là nguồn chính của nguyên bào sợi dương tính -SMA trong các mô hình chuột bị xơ hóa thận [51,52]. Trên thực tế, một nghiên cứu thanh lịch gần đây liên quan đến giải trình tự RNA đơn bào đã xác định chính xác ba nguồn chính của nguyên bào sợi trong thận người: (i) NOTCH3 cộng với RGS5 cộng với PDGFR - pericytes; (ii) MEG3 cộng với PDGFR cộng với nguyên bào sợi; và (iii) COLEC11 cộng với CXCL12 cộng với nguyên bào sợi [53]. Trong quá trình biệt hóa pericyte-to-myofibroblast, những thay đổi trong chu kỳ tế bào được quan sát thấy phù hợp với sự biệt hóa và mở rộng, và các con đường làm giàu bao gồm tín hiệu WNT chuẩn và protein hoạt hóa -1 (AP -1), cũng như kích hoạt phiên mã yếu tố 2 (ATF2), PDGFR, tích phân, tương tác với thụ thể chất nền ngoại bào (ECM), và các con đường tín hiệu TGF [53]. Trước đây, người ta đã chỉ ra rằng một phần nhỏ của quần thể tế bào PDGFR cộng với các tế bào sinh trưởng cộng gộp Gli1 quanh mạch đánh dấu một quần thể tế bào giống MSC quanh mạch được chứng minh là cũng góp phần quan trọng vào quá trình xơ hóa cơ quan do chấn thương thông qua việc tạo ra các nguyên bào sợi cơ [54] . Hơn nữa, sự tương đồng gen sinh ung thư 1 (Gli1) liên quan đến u thần kinh đệm cộng với mất pericyte được chứng minh là gây ra sự hiếm gặp của mao mạch và tổn thương ống thận gần [55]. Lưu ý, vì pericytes trước đây đã được liên kết và có liên quan chặt chẽ với MSC [56], điều này cũng đặt ra câu hỏi liệu một tập hợp con của pericytes có thể là MSC hay không, và như vậy góp phần tái tạo thận. Trên thực tế, nhiều nghiên cứu đã tìm thấy vai trò giống như tiền thân đa năng của pericytes trong các mô khác nhau [35,57,58].

Kết hợp lại, sự hiếm gặp vi mạch trực tiếp góp phần vào nhóm nguyên bào sợi, nguyên nhân tạo ra quá nhiều protein ECM, thành phần chính của mô sẹo trong xơ hóa. Ngoài ra, quá trình chuyển đổi pericyte-myofibroblast gây ra sự tách rời của pericyte khỏi thành mạch, dẫn đến các mao mạch không ổn định mà bản thân nó sẽ gây ra hiện tượng hiếm gặp [52]. Tuy nhiên, tác động chính của bệnh hiếm gặp đối với cơ chế bệnh sinh của suy thận mạn là do mất tưới máu thận làm trầm trọng thêm tình trạng thiếu máu cục bộ tủy và thúc đẩy sự phát triển của xơ hóa kẽ, được trung gian bởi sự biểu hiện gia tăng của TGF- và yếu tố tăng trưởng mô liên kết (CTGF) [59]. Do đó, hiếm gặp vi mạch cũng có thể hoạt động như một công tắc chuyển mạch tiền xơ giới hạn tỷ lệ trong cơ chế bệnh sinh của suy thận mạn tính. Thật vậy, các liệu pháp nhắm mục tiêu tương tác tế bào nội mô-pericyte, ví dụ, nhằm vào tín hiệu của thụ thể PDGFR- hoặc VEGF, có thể ngăn chặn quá trình chuyển đổi nguyên bào sợi và hạn chế sự phát triển của xơ hóa [60–62], minh họa vai trò quan trọng của mạng lưới mao mạch trong chấn thương thận và một mục tiêu điều trị tiềm năng.

Dựa trên những điều trên, rõ ràng là cấu trúc mạch máu phức tạp của thận tạo ra nhiều ngăn quanh mạch, mỗi ngăn có những chức năng và yêu cầu riêng. Do đó, nghiên cứu trong tương lai tập trung vào phân loại chuyên sâu các tế bào thận bằng cách xác định đặc điểm của các quần thể phụ dựa trên vị trí, hình thái tế bào và chức năng của chúng là cần thiết. Do đó, các phương thức hình ảnh mới nhằm mục đích tiếp cận các mạch máu kích thước nhỏ một cách không xâm lấn có thể cung cấp thông tin cần thiết này. Như được ví dụ trong lĩnh vực sinh học thần kinh [12], việc phân loại được xác định rõ ràng về các loại phụ khác nhau của pericytes có thể cung cấp những con đường mới cho sự phát triển của liệu pháp nhắm mục tiêu cho sự cố mạch máu.

4. Phương thức chụp ảnh mạch máu

Các bệnh thận khác nhau phản ánh một mô hình thay đổi cấu trúc đặc trưng. Kết quả của những tiến bộ công nghệ trong lĩnh vực hình ảnh y sinh, các cơ chế sinh lý bệnh và sinh lý thận đã được làm sáng tỏ trong vài thập kỷ qua [63]. Bằng cách tập trung vào những thay đổi về giải phẫu và hình thái của cấu trúc mô, kiến ​​thức của chúng tôi về bệnh thận ngày càng mở rộng, giúp cải thiện chẩn đoán và cung cấp các cơ hội điều trị sáng tạo. Tuy nhiên, sự thay đổi động học của các mạch máu chủ yếu bị bỏ qua do thách thức để điều tra hành vi của mạch máu trong các thí nghiệm chuỗi thời gian. Do đó, nhu cầu y tế chưa được đáp ứng để phát triển các kỹ thuật hình ảnh không xâm lấn để theo dõi huyết động của vi tuần hoàn thận [16].

Cũng sẽ rất thú vị nếu liên kết kết quả hình ảnh với các dấu ấn sinh học (mới) trong lĩnh vực thận học mạch máu. Ví dụ, chúng tôi đã chứng minh các RNA không mã hóa được liên kết chặt chẽ với tổn thương mạch máu [64,65]. Việc kết hợp các phép đo này có thể mang lại các mối quan hệ mới (nhân quả) và các khả năng chẩn đoán mới. Hơn nữa, khi các phương thức hình ảnh mới cùng với sự phát triển gần đây của các kỹ thuật dựa trên tế bào đơn lẻ như giải trình tự RNA đơn bào và phiên mã không gian [53,66,67], điều này có thể cho phép phân tích sâu chưa từng có về thành phần và động lực học. của hệ mạch thận. Các phần sau đây tóm tắt các phương thức chụp ảnh ex vivo và in vivo đã có sẵn để điều tra các khía cạnh hình thái và chức năng của vi mạch thận.

4.1. Ex Vivo

Rất nhiều kiến ​​thức của chúng tôi về vi mạch thận có được từ phân tích sinh thiết mô ex vivo toàn diện. Theo đó, liệu pháp dựa trên tế bào thường được đánh giá bằng cách phân cắt và nhuộm màu mô. Mặc dù có nhiều nghiên cứu điều tra hiệu quả điều trị của MSC trên hệ mạch thận [68], một số nhóm nghiên cứu đã tận dụng các phương thức hình ảnh tinh vi, chẳng hạn như chụp cắt lớp vi tính (micro-CT), để đánh giá liệu pháp MSC bằng cách kiểm tra kiến ​​trúc 3D. của hệ mạch thận [69–74].

4.1.1. Chụp cắt lớp vi tính (Micro-CT)

Sự ra đời của chụp cắt lớp vi tính (micro-CT) của Flannery et al. [75] vào năm 1987 đã mở ra con đường mới cho việc nghiên cứu hệ mạch nguyên vẹn của loài gặm nhấm để có được kiến ​​thức về cơ chế bệnh tật với độ phân giải không gian cao. Phương thức ex vivo này cho phép hình dung cấu trúc vi mạch thận và định lượng số lượng cầu thận, phân bố không gian và thể tích, có thể được sử dụng như một chỉ số cho trạng thái sinh lý bệnh của toàn bộ cơ quan [76]. Độ phân giải trong một trường nhìn 3D với 10, 243 voxels cho phép hình dung các tiểu động mạch hướng tâm và hướng ra ngoài, cũng như các mao mạch cầu thận của thận loài gặm nhấm. Ở chuột, kích thước voxel hoàn nguyên là 21 µm được sử dụng [77] và ở lợn, hệ thống mạch thận được nghiên cứu với kích thước voxel là 40 µm và trường nhìn là 1,2 mm [78]. Những tiến bộ trong lĩnh vực vi-CT đã tạo cơ hội để hình ảnh các mạch máu nephron của chuột với độ phân giải voxel 1 µm trong trường quét 2 mm [79].

Dựa trên kỹ thuật định lượng được phát triển bởi Hillman et al. [80] sử dụng CT thông thường, cấu trúc mạch và thể tích mạch trong các ngăn mô thận khác nhau được xác định phù hợp với các nghiên cứu tương tự, đánh giá mạch thận dựa trên các mặt cắt mô học [77]. Điều thú vị là, bằng cách áp dụng các phương thức hình ảnh như micro-CT, tầm quan trọng đã được nâng lên để khảo sát các mao mạch phúc mạc và sự liên quan của chúng trong các tình trạng bệnh lý ngoài cách nghĩ thông thường về vai trò của mạng lưới mao mạch cầu thận.

Những thay đổi cấu trúc ban đầu của vi mạch có thể được nhìn thấy và phát hiện bằng vi CT, và do đó không có gì đáng ngạc nhiên khi một số cơ chế phân tử trên cấp độ mạch máu liên quan đến bệnh thận được xác định bằng vi CT. Trong các mô hình bệnh thận khác nhau, chẳng hạn như trong bệnh thận đa nang (PKD), mối tương quan được mô tả giữa bệnh lý và giảm vi mạch được xác định bằng micro-CT với độ phân giải kích thước voxel 17 µm [81]. Hơn nữa, mật độ vi mạch vỏ não tăng lên được quan sát thấy trong tăng cholesterol máu như một dấu hiệu sớm của tổn thương hình thái thận đang tiến triển [78]. Ở những con chuột bị thắt ống mật mãn tính, giảm tưới máu vỏ não được phát hiện bằng vi-CT, điều này có thể giải thích sự xáo trộn giữ muối và nước với sự tiến triển của bệnh [82]. Bên cạnh đó, ở thận nhiễm mỡ, stress oxy hóa gia tăng có liên quan đến việc tái cấu trúc vi mạch thận, và các khả năng điều trị được đề xuất thông qua can thiệp chống oxy hóa mãn tính [83].

Một ưu điểm chính của micro-CT là có thể xác định được trục, cũng như dạng hình học xuyên tâm của hệ thống mạch máu [84]. Bên cạnh việc hình dung kiến ​​trúc mạch thận dưới dạng 3D, mật độ không gian của vi mạch có thể được đánh giá cao [78,83], mật độ và kích thước mạch có thể được xác định với đường kính lên đến 80 µm trong các ngăn giải phẫu khác nhau của thận [77,78,83,85 ], và có thể quan sát thấy độ cong của các mạch [83]. Hơn nữa, thể tích mao mạch mạch máu của cầu thận, cũng như các mao mạch phúc mạc có thể được phân biệt và định lượng trong vỏ não [82].

Một quy trình định lượng chuẩn hóa đã được sử dụng rộng rãi để khảo sát sự thay đổi vi mạch trong các khoang vỏ não và tủy được xác định rõ ở mức độ cấu trúc để xác định mật độ và đường kính mạch máu [77,82]. Ngo et al. [84] đã thực hiện một nghiên cứu so sánh giữa micro-CT và kính hiển vi ánh sáng và kết luận rằng việc định lượng hình học mạch thận thu được bằng micro-CT là một kỹ thuật khả thi và chính xác. Giá trị gia tăng duy nhất của hình ảnh hiển vi ánh sáng so với vi CT là nó cho phép phân biệt giữa động mạch và tĩnh mạch thông qua khả năng hình dung thành mạch. Tuy nhiên, bằng cách áp dụng vi-CT, các động mạch có đường kính lần lượt là 100 và 60 µm của chuột và thỏ có thể được hình dung dưới dạng 3D. Tuy nhiên, các mạch máu kích thước nhỏ nhỏ hơn 10 µm không thể được xác định chính xác bằng vi-CT, thúc đẩy nhu cầu quay trở lại hóa mô miễn dịch để có thể chụp được ngay cả những mao mạch thận nhỏ nhất [85].

4.1.2. Kính hiển vi huỳnh quang tấm ánh sáng (LSFM)

Với sự ra đời của kính hiển vi huỳnh quang dạng tấm ánh sáng (LSFM), ngày nay có thể đạt được hình ảnh có độ phân giải cao với khối lượng lớn trong một khoảng thời gian hợp lý [86, 87]. Thông qua sự sẵn có của LSFM, mối quan tâm đã được chuyển từ các kỹ thuật mô học thông thường được áp dụng thường xuyên bao gồm cắt mô, tiếp theo là nhuộm vi mạch, sang hình ảnh toàn bộ mô. Phân tích thể tích rất thuận lợi vì không chỉ một phần được chọn của mô được kiểm tra, mà đặc tính động của kiến ​​trúc và hành vi của tàu cũng được lưu giữ trong chế độ xem 3D.

Để giữ thông tin 3D, mẫu vật sinh học được làm trong suốt thông qua các giao thức xóa mô quang học (OTC) khác nhau để giảm thiểu tán xạ ánh sáng và hấp thụ ánh sáng để nhuộm huỳnh quang FL [87]. Trong những năm gần đây, các phương pháp OTC đã trở nên phổ biến vì hình ảnh 3D cung cấp cơ hội nghiên cứu các cơ quan nguyên vẹn nhờ vào những tiến bộ hiện đại của LSFM. Việc xây dựng một cơ quan nguyên vẹn hoặc thậm chí toàn bộ động vật với độ phân giải ở cấp độ tế bào trong 3D có thể được thực hiện trong vòng vài phút [88]. Tuy nhiên, với độ phân giải tương đương với kính hiển vi huỳnh quang FL đồng tiêu, LSFM có tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu tốt hơn hai bậc, làm giảm đáng kể quá trình tẩy trắng fluorophore FL và độc quang, cho phép xử lý hình ảnh quy mô lớn cần thiết cho OTC [89]. Ưu điểm bổ sung là số lượng khung hình được ghi và tốc độ ghi lớn hơn, trong khi thời lượng hình ảnh tổng thể ngắn hơn nhiều.

Kể từ khi LSFM được giới thiệu, một số giao thức OTC đã được cải tiến và tinh chỉnh cho các mẫu mô và cơ quan khác nhau có nguồn gốc từ một số loài. Trong những năm gần đây, phương pháp làm sạch dựa trên dung môi không độc bằng ethyl cinnamate (ECi) được áp dụng rộng rãi để làm sạch thận của chuột [88,90,91]. Giao thức này ít tốn thời gian hơn, chẳng hạn như các giao thức tiên phong CLARITY (hình ảnh cứng kết hợp acrylamide trao đổi lipid rõ ràng), CUBIC (cocktail hình ảnh não / cơ thể rõ ràng, không bị cản trở và phân tích tính toán) và / hoặc DISCO (hình ảnh ba chiều của các cơ quan được làm sạch bằng dung môi), nhưng nó cung cấp sự thanh lọc tương đối hợp lý của thận với một lượng tự phát huỳnh quang còn lại thấp. Công trình đáng chú ý đã được thực hiện bởi Ertürk và các đồng nghiệp [92], người đã thành công loại bỏ toàn bộ thận người bằng phương pháp thẩm thấu mô mới gọi là SHANEL (làm sạch và dán nhãn hiệu quả qua trung gian micelle nhỏ). Vùng vỏ não được xác định có kích thước khoảng 2742 ± 665 mm (trung bình ± SD) chứa các mao mạch cầu thận có đường kính 221 ± 37 mm và tiểu động mạch hướng tâm có đường kính 71 ± 28 mm. Hơn nữa, một khung dựa trên học tập sâu rất phức tạp để định lượng mạch máu thần kinh sau OTC, được gọi là VesSAP (đường ống phân tích & phân đoạn mạch), đã được phát triển trong lĩnh vực khoa học thần kinh [93].

Mặc dù thực tế đã đạt được nhiều tiến bộ lớn trong lĩnh vực OTC trong những năm gần đây, một số nhược điểm vẫn còn tồn tại do sự biểu hiện của FL fluorophores nội sinh hầu hết không được bảo quản một cách thỏa đáng, hạn chế việc sử dụng động vật chuyển gen. Tuy nhiên, một mối quan tâm chính là kích thước hình thái của mô và do đó của hệ mạch bị thay đổi bởi các dung môi khắc nghiệt cần thiết cho OTC. Ngoài ra, lượng dữ liệu khổng lồ do LSFM tạo ra vẫn là một thách thức, không chỉ đối với việc lưu trữ và xử lý dữ liệu thích hợp mà còn đối với phân tích định lượng [87].

Tóm lại, một ưu điểm quan trọng của việc áp dụng các kỹ thuật như micro-CT hoặc SFM là có thể chụp được sự phân bố mạch theo không gian và xác định được sự hiếm gặp cấu trúc của mạng mạch với độ phân giải phù hợp để hình ảnh hầu hết các cấu trúc mao mạch thận. Tuy nhiên, cả hai kỹ thuật đều yêu cầu cố định và do đó chỉ có thể được thực hiện ex vivo. Để theo dõi các thay đổi về hình thái và chức năng của vi mạch thận, các chiến lược chụp ảnh thời gian in vivo được mong muốn.

4.2. Trong Vivo

Việc áp dụng các phương thức hình ảnh in vivo sẽ mang lại cơ hội đánh giá liệu pháp dựa trên tế bào trong thời gian thực và xác nhận các hiệu quả điều trị có thể có trên cấp độ mạch máu. Do đó, những tiến bộ trong lĩnh vực hình ảnh y sinh in vivo đang thúc đẩy việc nghiên cứu các tác động dựa trên MSC trên hệ mạch thận. Chỉ có một số nghiên cứu đã áp dụng hình ảnh in vivo để kiểm tra tác động của MSC, sử dụng kính hiển vi đa photon (MPM) [94], CT [95,96], và hình ảnh cộng hưởng từ (MRI) [95–97].

4.2.1. Kính hiển vi đa photon (MPM)

Kính hiển vi đa photon (MPM) phụ thuộc vào sự hấp thụ đồng thời của hai hoặc nhiều photon chỉ trong mặt phẳng tiêu điểm, được áp dụng vào năm 1995 [98]. Các quá trình động có thể được hình ảnh hóa in vivo ở cấp độ tế bào, và bên cạnh việc nghiên cứu lưu lượng máu mạch thận [63], MPM mang đến cơ hội theo dõi các đoạn vi mạch thận khác nhau trong thời gian thực. Độ phân giải cao cho phép hình dung các tiểu động mạch hướng tâm và hướng ra ngoài và các mao mạch cầu thận. Mặc dù về mặt kỹ thuật có thể tiếp cận vi tuần hoàn tủy, nhưng nó vẫn là một thách thức do độ sâu thâm nhập [98]. Tuy nhiên, có thể hình dung toàn bộ cầu thận với đường kính xấp xỉ 100 µm và tiếp cận với các quá trình động ở cấp độ tế bào.

Quan trọng là, rò rỉ vi mạch in vivo có thể được hình dung và định lượng thông qua sự thoát mạch màu xanh Evans trong thận xơ bằng MPM [99]. Số lượng các mao mạch được tưới máu đã được định lượng và đường kính được xác định là dưới 10 µm. Gần đây, nhóm nghiên cứu của chúng tôi đã áp dụng MPM để cung cấp bằng chứng in vivo rằng các tế bào gốc đa năng của người (hPSC) được tạo ra từ thận đã hình thành một kết nối chức năng với hệ mạch thận tồn tại từ trước ở chuột sau khi cấy ghép tiểu nang thận [100,101].

Ưu điểm của MPM là không có huỳnh quang FL ngoài tiêu điểm và hiện tượng tẩy trắng bị hạn chế trong vùng tiêu điểm [98]. Tuy nhiên, một trong những nhược điểm là độ sâu hình ảnh hạn chế đòi hỏi phải áp dụng cửa sổ chụp ảnh ổ bụng để tiếp cận hệ thống mạch thận in vivo [102,103]. Cửa sổ bụng này cho phép chụp ảnh in vivo trong vài tuần đến một tháng; tuy nhiên, việc chèn một cửa sổ hình ảnh như vậy đòi hỏi phẫu thuật xâm lấn và có liên quan đến khả năng bị viêm. Hơn nữa, các cửa sổ hình ảnh đôi khi bị mất và có thể xảy ra hoại tử mô [102]. Rõ ràng, phương thức hình ảnh này không thể chuyển sang thực hành lâm sàng.

Một thay thế thú vị để theo dõi lưu lượng máu mao mạch không xâm lấn tại giường bệnh có thể đạt được kể từ khi đưa kính hiển vi quan trọng cầm tay (HVM) vào thực hành lâm sàng [104]. Mặc dù phương thức hình ảnh này dựa trên một công nghệ hoàn toàn khác, chẳng hạn như kính hiển vi video trường tối và trường tối sự cố, nó cung cấp đánh giá thời gian thực về các mao mạch nằm ở bề ngoài. Các thuật toán mới được thực hiện trên lâm sàng, được gọi là gói phần mềm MicroTools cho phép phân tích hình ảnh vi mạch tự động về mật độ mạch máu toàn phần và tưới máu để tiếp cận sự hình thành mạch, giãn / co thắt mạch và cân bằng chất lỏng, cũng như khả năng phân phối oxy dựa trên hematocrit mao mạch và vận tốc của hồng cầu [105 ]. Tuy nhiên, để nghiên cứu vi mạch thận, các phương thức đó không phù hợp do độ thâm nhập hạn chế của chúng.

4.2.2. Chụp cắt lớp vi tính (CT)

Các phương thức hình ảnh không xâm lấn có khả năng theo dõi và định lượng các thay đổi về hình thái và chức năng của vi mạch thận được yêu cầu cao để xác định vai trò của vi mạch trong sự tiến triển của bệnh thành CKD. Mặc dù mối quan hệ nhân quả giữa hiếm mao mạch và sự tiến triển của xơ hóa thận đã được công nhận trong nhiều năm, Ehling et al. [3] là những người đầu tiên thực hiện các phân tích định tính và định lượng không xâm lấn về các thay đổi về giải phẫu và chức năng của mạch máu trong quá trình tiến triển của CKD. Sự suy giảm tiến triển của thể tích máu thận đã được quan sát thấy bằng vi-CT tăng cường chất cản quang in vivo ở ba mô hình chuột bị xơ hóa thận tiến triển, tức là tổn thương do thiếu máu cục bộ tái tưới máu (IRI), tắc nghẽn niệu quản một bên và chuột Alport. Bên cạnh những thay đổi về chức năng của các vi mạch, sự mất mạch máu sau phúc mạc tương quan với sự hình thành mô sợi trong cả ba mô hình chuột CKD. Tuy nhiên, để có được thông tin về các điểm nhánh, đường kính mạch và độ dốc, cần phải có micro-CT ex vivo, cho thấy nhu cầu về công nghệ hình ảnh y sinh mới nổi cung cấp khả năng truy cập vào vi mạch in vivo với độ phân giải gần với độ phân giải tế bào.

Một ưu điểm chính của CT là hình ảnh của mạch máu thận thu được trong vòng vài phút với độ phân giải hợp lý, cung cấp thông tin 3D về tổ chức mạch máu. Sử dụng chất tương phản dựa trên i-ốt, độ tương phản được tăng cường và đạt được mô tả chi tiết hơn về vi mạch. Gần đây, đánh giá định tính và định lượng bằng vi-CT của thận lợn trong điều kiện sinh lý và bệnh lý đã được tinh chế bằng cách truyền axit phosphotungstic (PTA) để tăng cường độ tương phản trong mạch máu [106]. Mặc dù hạn chế là không thể phân biệt rõ động mạch và tĩnh mạch với nhau, nhưng độ phân giải với kích thước voxel 40 µm in vivo và kích thước voxel 12,5 µm ex vivo đã bắt giữ tổ chức đến mức mạch máu.

Tuy nhiên, một nhược điểm lớn khác của việc sử dụng CT để theo dõi bệnh thận là sự cần thiết phải sử dụng các chất cản quang chụp ảnh phóng xạ có i-ốt. Các chất cản quang này được biết là gây độc cho thận, là chống chỉ định áp dụng trên lâm sàng cho bệnh nhân suy thận từ trước [107–109]. Suy thận cấp tính do dùng thuốc cản quang làm thay đổi huyết động thận và gây ra tình trạng thiếu oxy tủy đặc biệt không mong muốn khi khảo sát hiếm gặp vi mạch thận. Tương tự, chất cản quang dựa trên gadolinium được sử dụng rộng rãi trong MRI sẽ bị thận loại bỏ và dường như gây suy thận [110].

4.2.3. Hình ảnh cộng hưởng từ (MRI)

MRI được giới thiệu trong thực hành lâm sàng vào những năm 1980 và ngay lập tức trở thành một trong những kỹ thuật hình ảnh được sử dụng nhiều nhất [111]. MRI là một phương thức hình ảnh không xâm lấn và không ion hóa áp dụng một từ trường mạnh và bằng cách sử dụng sự thay đổi của chất tương phản T1 và T2, các đặc tính giãn của máu có thể được phát hiện. Hơn nữa, chụp mạch cộng hưởng từ (MRA) hình dung cấu trúc mạch máu của động vật nhỏ bằng cách sử dụng chất cản quang dựa trên gadolinium. Tuy nhiên, một nhược điểm lớn của MRA là khó sử dụng chất tương phản cần thiết. May mắn thay, tưới máu thận có thể được xác định khi có và không cần thuốc cản quang, mang lại cả lợi ích và hạn chế [112].

Nếu không sử dụng chất cản quang, spin-labeling tận dụng nước nội sinh như một chất đánh dấu khuếch tán chỉ giúp định lượng sự tưới máu trong vỏ thận vì thời gian vận chuyển của tủy quá lâu để được thu nhận. Hơn nữa, để xác định lưu lượng máu qua thận, người ta đo sự dịch chuyển pha của các vòng quay dọc theo một hướng, điều này ngụ ý cần phải có mặt phẳng hình ảnh vuông góc với các động mạch quan tâm để đạt được phép đo chính xác [112]. Do đó, không có gì ngạc nhiên khi kỹ thuật này cung cấp một thách thức lớn khi hình dung các động mạch thận, chưa kể đến các mao mạch vỏ não nhỏ.

Chức năng của tàu có thể được xác định bằng cách định lượng RBF bằng cách tưới máu MR và theo dõi trạng thái oxy bằng hình ảnh chụp cản quang phụ thuộc vào mức oxy trong máu (BOLD) [112,113]. Tuy nhiên, hạn chế chính của MRI chức năng là đạt được kết quả đáng tin cậy và có thể tái tạo được ở các cơ quan bị ảnh hưởng bởi chuyển động hô hấp, bao gồm thận, mặc dù nó ít bị ảnh hưởng bởi chuyển động hơn so với gan hoặc ruột [112]. Mặc dù thực tế là các nghiên cứu khả thi do MRI thực hiện chức năng 1,5 Tesla mang lại nhiều hứa hẹn khi thực hiện định lượng voxel [114], các bất thường về tưới máu chỉ có thể được phát hiện trong các khu vực bệnh lý, đặt ra câu hỏi liệu thay đổi mạch máu nhỏ có được phát hiện đầy đủ hay không. Với sự ra đời của máy quét MRI có cường độ từ trường là 3. 0 Tesla, tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu đã được cải thiện đáng kể [115,116], tuy nhiên, độ phân giải thu được vẫn còn là một vấn đề.

Độ phân giải do MRI cung cấp chủ yếu phụ thuộc vào cường độ từ trường và có thể được tối ưu hóa cho bất kỳ từ trường nhất định nào bằng cách điều chỉnh các chuỗi xung [111]. Độ phân giải không gian chủ yếu bị giới hạn bởi tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu đòi hỏi thời gian thu nhận nhanh chóng và thường đạt được độ phân giải 3 × 4 mm ở kích thước pixel [117]. Ngay cả khi áp dụng từ trường cao 7 Tesla, độ phân giải tốt nhất có thể đạt được với BOLD là khoảng 500 µm. Bên cạnh độ phân giải không thỏa mãn và hạn chế để hình dung hầu hết các quá trình động, một nhược điểm lớn khác là MRI có liên quan đến chi phí cao và yêu cầu các phương tiện và bảo trì đặc biệt.

4.2.4. Siêu âm

Những tiến bộ trong siêu âm đã tạo ra một sự thay đổi mô hình để theo dõi không xâm lấn sự thay đổi cấu trúc và chức năng của vi mạch thận và mở ra con đường mới để khám phá các mạch nhỏ bằng hệ thống di động với chi phí tương đối thấp. Trong mô hình chuột bị thiếu máu cục bộ cấp tính do giảm tưới máu trầm trọng trong 1 giờ, lưu lượng máu qua thận được đánh giá theo thời gian thực bằng cách sử dụng siêu âm Doppler màu và sóng xung (PW) [118]. Hình ảnh Doppler màu cũng cho thấy khó khăn trong việc hình dung các động mạch vòng cung do kích thước tương đối nhỏ và vị trí đầu dò vuông góc để nắm bắt lưu lượng động mạch cần thiết để tính toán vận tốc máu và áp dụng hiệu chỉnh góc Doppler. Tuy nhiên, vận tốc máu chỉ có thể được tính toán tại các động mạch trong thận, tức là các động mạch phân đoạn, liên đốt và cung. Do đó, thông tin về vi tuần hoàn không thể thu thập được do giới hạn của độ phân giải được cung cấp bởi siêu âm thông thường.

Với sự ra đời của công nghệ siêu âm Doppler siêu nhanh, có thể đạt được độ phân giải cao hơn bằng cách truyền sóng không tập trung đang gửi một số sóng đồng bộ ở tốc độ khung hình cao đồng thời trong một trường nhìn toàn bộ, thay vì quét từng dòng thông qua ứng dụng truyền chùm tia hội tụ [119]. Sự truyền sóng phẳng này là khái niệm cơ bản đằng sau hình ảnh siêu âm Doppler siêu nhanh và giúp phát hiện các mạch vỏ não của một quả thận người được cấy ghép có đường kính dưới 1 mm [120]. Hơn nữa, siêu âm Doppler siêu nhanh cung cấp một kỹ thuật in vivo rất thuận lợi để theo dõi sự hiếm gặp vi mạch thận trong các nghiên cứu tiền lâm sàng (Hình 3A). Bất chấp những tiến bộ của siêu âm Doppler siêu nhanh, việc tiếp cận mức độ mao mạch vẫn dựa vào việc sử dụng các chất tăng cường độ tương phản [121]. Tuy nhiên, không có mối quan tâm về an toàn đáng có thể nhắc đến khi sử dụng chất tăng cường độ tương phản cho siêu âm Doppler, đặc biệt là so với chất cản quang CT và MRI thường cho thấy độc tính trên thận [122]. Tuy nhiên, sự phân giải đáng kinh ngạc của hệ thống mạch thận của chuột có thể được thực hiện trong cơ thể sống (Hình 3B).

Kính hiển vi địa phương hóa siêu âm (ULM) giải quyết sự cân bằng giữa độ phân giải không gian và độ sâu thâm nhập bằng cách, một mặt, áp dụng hình ảnh siêu âm Doppler siêu nhanh, và mặt khác, sử dụng các chất tương phản siêu âm ở dạng các viên nhỏ chứa đầy khí [121,123,124]. Trong số những người khác, Errico et al. [123] đề xuất ULM để hình ảnh các vi cầu sọ có đường kính 10 µm trên toàn bộ độ sâu của não chuột, dày khoảng 10 mm. Trong một ấn phẩm gần đây, Demené et al. [125] có thể nắm bắt động lực của dòng máu mạch máu não ở cấp độ vi mô sâu trong não người bằng cách theo dõi từng viên vi hạt được tiêm vào tĩnh mạch riêng lẻ để cải thiện hình ảnh siêu phân giải và cho phép độ phân giải mạch máu lên đến 25 µm. Để nắm được thành tựu đáng kinh ngạc này, điều quan trọng cần đề cập là không có phương thức hình ảnh không xâm lấn nào khác có thể hình dung vi mạch in vivo dưới tỷ lệ milimet. Để đạt được độ phân giải không gian đáng chú ý này trong cơ thể sống, có hai thách thức lớn phải vượt qua: quang sai hộp sọ và tạo tác chuyển động. Mặc dù việc ứng dụng ULM cho các cơ quan trong ổ bụng như thận không bị cản trở bởi hiện tượng quang sai của cấu trúc xương, nhưng việc tạo tác chuyển động lại thể hiện một khó khăn lớn. Tuy nhiên, các nghiên cứu in vivo gần đây đã cung cấp thành công những nỗ lực đầu tiên để hình ảnh mạch máu thận bằng ULM [5,126,127].

Các ngăn mạch máu khác nhau trong thận chuột có thể được phân biệt, và bằng cách áp dụng các viên bi nhỏ, độ phân giải đã được tăng lên để hình dung các bó mạch mỏng của trực tràng vasa được phân tách cách nhau 400 µm [5]. Ngoài ra, vận tốc máu theo trục, tức là, dưới 2 mm / s, liên quan đến dòng chảy của các vi mạch thận đã được ước tính bằng cách theo dõi các vi hạt tiêm vào có đường kính 1 µm có thể đạt đến đường kính mạch nhỏ hơn 20 µm. Song et al. [127] chụp ảnh các vi mạch vỏ thận của thỏ và có thể tách các mạch in vivo một cách rõ ràng với đường kính 76 µm. Mặc dù chuyển động hô hấp có thể được điều chỉnh, các hiện vật chuyển động ngoài mặt phẳng vẫn còn nhiều thách thức và không thể sửa chữa vì không thể thu thập hoàn toàn thông tin hình ảnh [5].

Gần đây, sự tiến triển của AKI thành CKD đã được nghiên cứu bằng siêu âm Doppler siêu nhanh tăng cường chất cản quang trên mô hình chuột của IRI một bên [6]. Bằng cách tiêm các viên sỏi nhỏ, các mạch máu thận nhỏ 32 µm được xác định và định lượng các thay đổi mạch máu trong thận, tức là thể tích máu thận, mật độ mạch và độ đồi mồi. Mật độ mạch máu của vùng tiếp giáp vỏ não và vỏ não thu được bằng siêu âm trong quá trình chụp ảnh in vivo phù hợp với định lượng thu được sau khi nhuộm miễn dịch CD31 được công nhận là tiêu chuẩn vàng trong sinh học mạch máu. Điều này phù hợp với một nghiên cứu khác, được thực hiện bởi Cao et al. [128], minh họa rằng mức độ nghiêm trọng của AKI có thể được xác định bằng siêu âm tăng cường độ tương phản bằng cách tiêm microbubble. Các phép đo tưới máu thận in vivo có tương quan chặt chẽ với tổn thương thận được xác định trên mức độ mô học.

Phù hợp với những nghiên cứu siêu âm đó, Hueper et al. [7] trước đây cho rằng tưới máu thận có thể dự đoán sự tiến triển của AKI thành CKD được xác định bằng MRI.

Hình ảnh siêu âm tăng cường vi mạch thận đã được thực hiện thành công ở người để xác định tưới máu vi mạch thận và cho thấy những triển vọng tuyệt vời để chẩn đoán [129–133]. Điều thú vị là, phương thức hình ảnh này đã được áp dụng trong ghép thận để xác định tình trạng tưới máu của toàn bộ thận, từ đó có thể cung cấp một kết quả không xâm lấn phù hợp để dự đoán thải ghép cấp tính [134]. Bên cạnh sự phụ thuộc của người vận hành có thể thể hiện một hạn chế khi sử dụng siêu âm, độ bền của thỏa thuận giữa các quan sát viên rất cao giữa hai độc giả phản ánh tính khả thi lớn khi áp dụng trong môi trường lâm sàng [132]. Do tính di động và tiết kiệm thời gian và ứng dụng tùy chỉnh đơn giản, siêu âm với các vi hạt tăng cường độ tương phản cung cấp các quan điểm tuyệt vời để đánh giá vi mạch thận trong thực hành lâm sàng, đặc biệt là ở bệnh nhân ICU [135]. Do đó, công nghệ này mang lại nhiều hứa hẹn cho việc chuyển dịch sang thực hành lâm sàng sau khi thành công trong việc hiệu chỉnh các hiện vật chuyển động bụng để theo dõi microbubble mạnh mẽ với độ chính xác cao.

5. Kết luận và quan điểm

Tính không đồng nhất nổi bật của kiến ​​trúc mạch thận phản ánh sự đa dạng chức năng phức tạp và sự phân chia thành từng ngăn, với một hệ quả hợp lý là việc nghiên cứu sự thay đổi và hiếm gặp của vi mạch đòi hỏi các phương thức hình ảnh tinh vi. Việc phát triển, ứng dụng và cải tiến các phương thức chụp ảnh in vivo để nghiên cứu các bệnh mạch máu thận sẽ cung cấp hiểu biết sâu hơn về hoạt động của các liệu pháp tế bào như MSC trên cấp độ mạch máu và có thể làm sáng tỏ các dấu ấn sinh học cụ thể có thể được theo dõi trong quá trình tiến triển của bệnh.

Người giới thiệu

1. Chade, AR Cấu trúc mạch thận và độ hiếm. Soạn thảo Physiol. 2013, 3, 817–831. [CrossRef] [PubMed]

2. Chade, AR tàu nhỏ, vai trò lớn: vi tuần hoàn thận và tiến triển của chấn thương thận. Tăng huyết áp 2017, 69, 551–563. [CrossRef] [PubMed]

3. Ehling, J.; Bábícková, J. .; Gremse, F.; Klinkhammer, BM; Nướng, S .; Knochel, R .; Kiessling, F.; Floege, J.; Lammers, T.; Boor, P. Chụp cắt lớp vi tính định lượng rối loạn chức năng mạch máu trong các bệnh thận tiến triển. Mứt. Soc. Nephrol. 2016, 27, 520–532. [CrossRef] [PubMed]

4. Chen, TK; Knicely, DH; Grams, ME Chẩn đoán và Quản lý Bệnh thận mãn tính: Đánh giá. Physiol. Behav. 2019, 322, 1294–1304. [CrossRef] [PubMed]

5. Băn khoăn, J.; Zhang, H.; Ilovitsh, T.; Mahakian, L.; Tam, S.; Ferrara, KW Kính hiển vi định vị siêu âm để hình ảnh và đánh giá vi mạch trong thận chuột. Khoa học. Rep. 2017, 7, 13662. [CrossRef] [PubMed]

6. Chen, Q.; Yu, J .; Vội vàng, BM; Người dự trữ, SD; Tan, RJ; Kim, K. Kidney Int. 2020, 98, 355–365. [CrossRef] [PubMed]

7. Hueper, K.; Gutberlet, M.; Rong, S.; Hartung, D.; Mengel, M.; Lu, X.; Haller, H.; Wacker, F.; Meier, M.; Gueler, F. Tổn thương thận cấp tính: Ghi nhãn quay động mạch để theo dõi sự suy giảm tưới máu thận ở chuột — So sánh với kết quả mô bệnh học và chức năng thận. X quang 2014, 270, 117–24. [CrossRef]

8. Levy, BI; Schiffrin, EL; Mourad, JJ; Agostini, D.; Vicaut, E.; Safar, TÔI; Struijker-Boudier, HA Suy giảm tưới máu mô một bệnh lý phổ biến đối với tăng huyết áp, béo phì và đái tháo đường. Lưu hành 2008, 118, 968–976. [CrossRef]

9. Carmeliet, P.; Jain, RK Cơ chế phân tử và các ứng dụng lâm sàng của quá trình hình thành mạch. Nature 2011, 473, 298–307. [CrossRef]

10. Nốt ruồi, G.; Aird, WC Không đồng nhất mạch máu trong thận. Semin. Nephrol. 2012, 32, 145–155. [CrossRef]

11. Armulik, A.; Abramson, A.; Betsholtz, C. Tương tác nội mô / pericyte. Circ. Res. 2005, 97, 512–523. 03.16652.d7. [CrossRef]

12. Chú ý, D .; Mishra, A.; Hội trường, CN; O'Farrell, FM; Dalkara, T. Pericyte là gì? J. Cereb. Metab lưu lượng máu. 2016, 36, 451–5. [CrossRef]

13. Evans, RG; Eppel, GA; Anderson, WP; Cơ chế Denton, KM cơ bản kiểm soát sự khác biệt của máu trong tủy thận và vỏ não. J. Hypertens. 2004, 22, 1439–1451. [CrossRef]

14. Pallone, TL; Silldorff, EP; Turner, MR Máu nội thượng thận: Giải phẫu vi mạch và điều hòa tưới máu tủy. Clin. Hết hạn. Pharmacol. Physiol. 1998, 25, 383–392. doi: 10.1111 / j. 1440-1681. 1998.tb02220.x. [CrossRef]

15. Pallone, TL; Edwards, A.; Mattson, DL Tuần hoàn tủy thận. Soạn thảo Physiol. 2012, 2, 97–140. [CrossRef] [PubMed]

16. Guerci, P.; Ergin, B.; Ince, C. Tuần hoàn vĩ mô và vi mô của thận. Pract tốt nhất. Res. Clin. Anaesthesiol. 2017, 31, 315–329. [CrossRef]

17. Shaw, tôi; Rider, S.; Mullins, J .; Hughes, J .; Péault, B. Pericytes trong hệ mạch thận: Có vai trò đối với sức khỏe và bệnh tật. Nat. Linh mục Nephrol. 2018, 14, 521–534. [CrossRef]

18. Rosivall, L.; Peti-Peterdi, JJ Tính không đồng nhất của tiểu động mạch hướng tâm — Tương quan giữa hình thái và chức năng. Nephrol. Quay số. Cấy. 2006, 21, 2703–2707. [CrossRef]

19. Stefanska, A.; Kenyon, C.; Christian, HC; Buckley, C.; Shaw, tôi; Mullins, JJ; Péault, B. Tế bào thận ở người sản xuất renin. Thận Int. 2016, 90, 1251–1261. [CrossRef]

20. Schlondorff, DO Tổng quan về các yếu tố góp phần vào sinh lý bệnh của bệnh thận tiến triển. Thận Int. 2008, 74, 860 - 866. [CrossRef]

21. Pallone, TL; Zhang, Z .; Rhinehart, K. Sinh lý học của vi tuần hoàn tủy thận. Là. J. Physiol. Ren. Physiol. 2003, 284, F253–66. [CrossRef] [PubMed]

22. Pallone, TL Các bó mạch phức tạp, các chi dày lên, và các aquaporin: Bọc ngoài tủy ngoài. Là. J. Physiol. Ren. Physiol. 2014, 306, 505–506. [CrossRef] [PubMed]

23. Zimmerhackl, BL; Robertson, CR; Jamison, RL Vi tuần hoàn tủy. Thận Int. 1987, 31, 641–647. [CrossRef] [PubMed]

24. Dumas, SJ; Meta, E.; Borri, M.; Luo, Y. Li, X.; Rabelink, TJ; Carmeliet, P. Đa dạng kiểu hình và trao đổi chất. Nat. Linh mục Nephrol. Năm 2021, ngày 1–24. [CrossRef]

25. Dumas, SJ; García-Caballero, M.; Carmeliet, P. Các dấu hiệu trao đổi chất của các kiểu nội mô khác biệt. Xu hướng Endocrinol. Metab. 2020, 31, 580–595. [CrossRef]

26. Jourde-Chiche, N. .; Fakhouri, F.; Dou, L.; Bellini, J. .; Burley, S .; Định dạng, M.; Jarrot, PA; Kaplanski, G .; Le Quintrec, M.; Pernin, V .; et al. Cấu trúc và chức năng của nội mô đối với sức khỏe và bệnh tật của thận. Nat. Linh mục Nephrol. 2019, 15, 87–108. [CrossRef]

27. Dài, DA; Norman, JT; Tốt, LG Phục hồi vi mạch thận để điều trị bệnh thận mãn tính. Nat. Linh mục Nephrol. 2012, 8, 244–250. [CrossRef]

28. Choi, YJ; Chakraborty, S.; Nguyễn, V.; Nguyễn, C.; Kim, BK; Shim, SI; Suki, WN; Truong, LD Mất mao mạch phúc mạc liên quan đến tổn thương mô kẽ ống thận mạn tính ở thận người: Biểu hiện thay đổi của yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu. Ầm ầm. Pathol. 2000, 31, 1491–1497. [CrossRef]

29. Ishii, Y. Sawada, T.; Kubota, K .; Fuchinoue, S.; Teraoka, S.; Shimizu, A. Tổn thương và mất dần các mao mạch phúc mạc trong sự phát triển của bệnh thận toàn thân mãn tính. Thận Int. 2005, 67, 321–332. [CrossRef]

30. Serón, D.; Alexopoulos, E.; Raftery, MJ; Hartley, B.; Cameron, JS Số tiết diện mao mạch kẽ được đánh giá bằng kháng thể đơn dòng: Liên quan đến tổn thương kẽ. Nephrol. Quay số. Cấy. 1990, 5, 889–893. [CrossRef]