Tác dụng điều trị và cơ chế của glycoside Cistanche Phenylethanol trên sự hình thành tinh trùng do Cyclophosphamide gây ra ở chuột
Mar 11, 2022
Liên hệ: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
ZHAODong-hai1, ZHANGLei2, ZHANGYan3, QILing1, ZOU Xiang-ming4
[Bản tóm tắt]
Mục đích:Để khám phá hiệu quả điều trị củaCistanche phenylethanoid glycosidetrên chuột có quá trình sinh tinh do cyclophosphamide gây ra và để làm rõ sơ bộ cơ chế hoạt động của nó.Phương pháp:Phương pháp chiết xuất etanol để chiết xuấtCistanche phenylethanoid glycoside. Bốn mươi con chuột BALB / C được chia ngẫu nhiên thành nhóm đối chứng, nhóm mô hình, liều thấpCistanche phenylethanoid glycosidenhóm (50 mg · kg -1) và nhóm liều cao (100 mg · kg -1), với 10 con chuột trong mỗi nhóm. Ngoại trừ nhóm đối chứng, những con chuột trong các nhóm khác được tiêm cyclophosphamide (80 mg · kg -1) mỗi ngày trong 5 ngày liên tiếp để chuẩn bị cho mô hình chuột bị rối loạn sinh tinh. Sau lần sử dụng cuối cùng, những con chuột trong nhóm liều thấp và liều caoCistanche phenylethanoid glycosideđược cho các liều lượng tương ứng bằng thiết bị đo, và những con chuột trong nhóm đối chứng và nhóm mô hình được cung cấp cùng một lượng nước muối thông thường bằng thiết bị đo, mỗi ngày một lần trong 30 ngày. Hai mươi bốn giờ sau lần cắt cuối cùng, mô tinh hoàn của chuột đã được lấy. Một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym đã được sử dụng để xác định mức độ testosterone trong đồng nhất mô tinh hoàn của chuột. Mật độ tinh trùng, khả năng di chuyển của tinh trùng và tỷ lệ bất thường của tinh trùng của mỗi nhóm được so sánh. Các thay đổi hình thái của mô tinh hoàn được quan sát bằng phương pháp nhuộm HE. Kết quả: So với nhóm đối chứng, mật độ tinh trùng và tốc độ di chuyển của tinh trùng của nhóm mô hình giảm (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" increased=""><0.01), and="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" decreased=""><0.01). 0.01);="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" of="" mice="" in="" each="" dose="" group="" of="">Cistanche phenylethanoid glycosideđã tăng lên đáng kể (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.01), and="" the="" testicular="" tissue="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" homogenate="" increased=""><0.05 or=""><0.01). histological="" observations="" showed="" that="" the="" seminiferous="" tubules="" in="" the="" testis="" of="" the="" model="" group="" were="" atrophied="" and="" degenerated,="" the="" seminiferous="" epithelium="" was="" significantly="" thinner,="" the="" arrangement="" of="" spermatogenic="" cells="" was="" disordered,="" and="" the="" number="" of="" sperm="" in="" the="" cavity="" decreased;="" the="" number="" of="" the="" seminiferous="" epithelium="" in="" the="" testes="" of="" the="">Cistanche phenylethanoid glycosideNhóm tăng lên rõ rệt, Các lớp rõ rệt, các tế bào sinh tinh được sắp xếp gọn gàng, chặt chẽ và đều đặn, có thể nhìn thấy tinh trùng trong lòng ống.Sự kết luận: Cistanche phenylethanoid glycosidecó tác dụng điều trị đáng kể đối với rối loạn sinh tinh do cyclophosphamide gây ra ở chuột, và cơ chế của nó có thể liên quan đến việc cải thiện nồng độ testosterone trong các mô tinh hoàn.
[Từ khóa]Cistanche phenylethanoid glycoside; cyclophosphamide; rối loạn sinh tinh; chuột, BALB / C
Do nhịp sống xã hội tăng nhanh, thói quen sinh hoạt xấu, ô nhiễm môi trường và các yếu tố khác, chất lượng tinh trùng bất thường như thiểu sản và suy nhược đã trở thành nguyên nhân chính gây vô sinh nam [1]. Hiện nay, có ít loại thuốc điều trị chứng suy nhược cơ thể và chứng suy nhược cơ thể, và hiệu quả điều trị không rõ ràng. Các đơn thuốc hay hoạt chất Đông y có tác dụng tốt trong việc cải thiện chức năng sinh sản của nam giới [2-6]. Tuy nhiên, do quá nhiều loại thuốc kê đơn, mối quan hệ giữa tác dụng dược lý và thành phần tác dụng của thuốc không rõ ràng nên đã hạn chế việc quảng bá và ứng dụng thuốc sinh tinh. Việc nghiên cứu và phát triển các thành phần hữu hiệu của y học Trung Quốc và nghiên cứu tác dụng điều trị của nó trong tổn thương sinh sản có giá trị ứng dụng tốt.Cistanche phenylethanoid glycosidelà một trong những thành phần hoạt động quan trọng nhất trongCistanche Desticola. Chúng thường là các glycosid tự nhiên có chứa liên kết este và liên kết oxo-glycosidic với -glucose làm hạt nhân. Chúng được tìm thấy rộng rãi trong các loài thực vật hai lá mầm [7]. Các nghiên cứu [8] đã chỉ ra rằngCistanchephenylethanoidglycosidecó thể bảo vệ tinh trùng chuột khỏi bị oxy hóa trong ống nghiệm, nhưng không có báo cáo nào về quá trình sinh tinh của nó. Thí nghiệm này nghiên cứu tác dụng điều trị của Cistanche phenylethanoid glycoside đối với chức năng sinh tinh của chuột có quá trình sinh tinh do cyclophosphamide gây ra và cung cấp cơ sở thực nghiệm và lý thuyết cho việc áp dụngCistanche phenylethanoid glycosidetrong điều trị rối loạn sinh tinh.
1. Vật liệu và phương pháp
1.1. Động vật thí nghiệm, thuốc thử chính và dụng cụ
40 con chuột BALB / C trưởng thành loại SPF, 6-8 tuần tuổi, với khối lượng cơ thể 20-22 g, đã được mua từ Trung tâm Thí nghiệm Động vật của Trường Y khoa Cơ bản Đại học Cát Lâm và số chứng chỉ động vật : SCXK (Kyrgyzstan) 2008-005. Những con chuột đã được lai tạo để thích nghi trong 5 ngày trước khi thí nghiệm. Điều kiện cho ăn: 22 độ ~ 25 độ, nhịp sinh học (12h / 12h), nước uống và thức ăn miễn phí. Cistanche là sản phẩm của Công ty Thương mại Tân Cương Dakang. Thuốc tiêm Cyclophosphamide được mua từ Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd. (số lô 11061921). Bộ xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme testosterone đồng nhất mô tinh hoàn được mua từ Công ty TNHH Kỹ thuật sinh học y tế Tianjin Jiude (số lô 20120812), các thuốc thử khác đều là loại phân tích được sản xuất trong nước. Đầu đọc vi tấm PLUS384 (MDC ở Hoa Kỳ), kính hiển vi đảo ngược TE2000U (Nikon, Nhật Bản) và máy ly tâm J -26 XP (Nanodrop, Hoa Kỳ).
1.2 Điều chế Cistanche Phenylethanol Glucoside
10g bột cistanche được chiết xuất bằng cách hồi lưu với 70 phần trăm etanol, hai lần, mỗi lần 2 giờ, để thu được chất cô đặc rượu phenethyl glycoside. Dung dịch đậm đặc được sắc ký trên cột nhựa macroporous D101 và rửa giải bằng etanol 70% để thu được rượu Cistanche phenecoside. Máy quang phổ UV xác định dịch chiết ở bước sóng 333 nm.
1.3 Chuẩn bị mô hình động vật và phương pháp sử dụng thuốc
Sau khi 40 con chuột đực BALB / C được cho ăn thích nghi trong 5 ngày, các con chuột được chia ngẫu nhiên thành 4 nhóm (mỗi nhóm 10 con): nhóm đối chứng, nhóm mô hình, CistancheCistanche phenylethanoid glycosidenhóm liều thấp, vàCistanche phenylethanoid glycosidenhóm liều cao. Ngoại trừ nhóm đối chứng, ba nhóm chuột còn lại được tiêm vào màng bụng một liều cyclophosphamide 80 mg · kg -1 cho mỗi con chuột trong 5 ngày liên tục để chuẩn bị mô hình động vật bị rối loạn sinh tinh. Sau khi mô hình được chuẩn bị, những con chuột ở nhóm liều thấp và liều caoCistanchephenylethanoid lần lượt là 50 và 100 mg · kg -1 · d -1. Những con chuột trong nhóm đối chứng và nhóm mô hình được cho lượng nước muối bình thường bằng nhau. Mỗi ngày một lần trong 30 ngày. Tất cả các con chuột đều bị hy sinh sau 24 giờ kể từ lần dùng thuốc cuối cùng và các xét nghiệm song phương được thực hiện. Tinh hoàn bên phải đã được cố định bằng formaldehyde. Mào tinh hoàn và mào tinh hoàn được lấy từ bên trái. Tinh hoàn được đồng nhất và ly tâm ở 3, 000 phút trong 10 phút. Phần nổi phía trên được lấy và bảo quản trong thùng đá ở độ -20 để thử nghiệm. Mào tinh hoàn trái được xét nghiệm mật độ tinh trùng, khả năng di chuyển của tinh trùng, tỷ lệ dị dạng.
1.4 Xác định mật độ tinh trùng, khả năng di chuyển của tinh trùng và tỷ lệ dị dạng
Đặt ống nghiệm chứa 10 mL dung dịch dinh dưỡng tinh trùng [9] vào nồi cách thủy nhiệt độ không đổi đun nóng sơ bộ đến 37 độ, lấy mào tinh một bên loại bỏ mô liên kết và mỡ, cắt mô, cho vào ống nghiệm ở 37 độ trong 10 phút Sau khi tinh trùng hết tự do, nhỏ 1 giọt lên đĩa đếm tế bào máu và tính mật độ tinh trùng theo phương pháp đếm tế bào. Kết quả được biểu thị bằng số lượng tinh trùng trên mililit; Ngoài ra, lấy 5μL huyền phù tinh trùng và cùng một lượng eosin-Y từ ống nghiệm Trộn đều, để ở nhiệt độ phòng 10 phút, thêm kính đậy, quan sát bằng kính hiển vi nhẹ. Tinh trùng chết có màu hồng, tinh trùng sống không nhuộm màu và tế bào chất trong suốt. Mỗi mẫu xét nghiệm đếm 200 tinh trùng, tính toán khả năng sống sót của tinh trùng, kết quả được biểu thị bằng phần trăm, khả năng sống sót của tinh trùng=một số tinh trùng sống / tổng số tinh trùng × 100 phần trăm. 5 μL huyền phù tinh trùng khác được cố định trong metanol trong 5 phút, làm khô và nhuộm bằng dung dịch nước eosin 2% trong 1 giờ, rửa sạch và sấy khô. Tìm các bộ phận có ít tinh trùng chồng lên nhau dưới thấu kính công suất thấp và sử dụng thấu kính công suất cao để kiểm tra hình thái tinh trùng theo thứ tự. Mỗi con chuột kiểm tra 1, 000 tinh trùng hoàn chỉnh. Những tinh trùng đầu không có móc, hình quả chuối, vô định hình, mập và đầu kép được đánh giá là dị tật. Tỷ lệ dị dạng của tinh trùng được tính toán và kết quả được biểu thị dưới dạng phần trăm. Tỷ lệ dị dạng tinh trùng=số lượng tinh trùng dị dạng / tổng số lượng tinh trùng × 100 phần trăm.
1.5 Xác định kích thích tố sinh sản
Tinh hoàn đã được bóc khỏi màng và được đặt trong một đĩa lọ và môi trường đồng nhất đã làm lạnh trước (0. 0 1mol·L -1 sucrose, 0. 01mol · L -1 Tris- HCl, 0,1mmol·L -1 Dung dịch EDTA-Na2, pH 7,4), cắt mô tinh hoàn bằng kéo nhãn khoa, đổ vào ống đồng nhất thủy tinh và ly tâm ở 4, 000 × g trong 10 phút ở nhiệt độ thấp và lấy phần nổi phía trên, Sử dụng bộ xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để đo mức testosterone trong đồng nhất mô tinh hoàn và xét nghiệm 3 mẫu song song cho mỗi mẫu. Các bước và phương pháp thí nghiệm đã được hoàn thành theo hướng dẫn của bộ tài liệu.
1.6 Quan sát hình thái của viêm tinh hoàn
Lấy phần parafin của tinh hoàn chuột, nhuộm HE, và quan sát sự phân bố của tế bào sinh tinh và tế bào sinh tinh trong mô tinh hoàn dưới kính hiển vi ánh sáng.
1.7 Phân tích thống kê
Phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm thống kê SPSS17. 0. Mật độ tinh trùng, tốc độ di chuyển của tinh trùng, tỷ lệ dị dạng của tinh trùng và mức testosterone tinh hoàn của chuột trong mỗi nhóm được biểu thị bằng x ± s, và việc so sánh giữa các nhóm được thực hiện bằng phân tích phương sai đơn nhân tố.
2. kết quả
2.1. Mật độ tinh trùng, khả năng di chuyển của tinh trùng và tỷ lệ dị dạng tinh trùng của từng nhóm chuột
So với nhóm đối chứng, mật độ tinh trùng và khả năng sống sót của tinh trùng của nhóm mô hình giảm (P<0.01), and="" the="" sperm="" deformity="" rate="" increased=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" rate="" of="" mice="" in="" each="" dose="" of="">Cistanche phenoxyethanol glycosidetăng lên (P<0.05 or=""><0.01), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05 and=""><0). .01).="" compared="" with="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group,="" the="" high-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" had="" higher="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility=""><0.05), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05). see="" table="">
2.2 Mức testosterone trong các mô tinh hoàn của chuột trong mỗi nhóm
Mức testosterone trong mô tinh hoàn của nhóm đối chứng và nhóm mô hình tương đồng là (1 0. 26 ± 0. 57) và (5,33 ± 0,84) nmol·L -1, tương ứng. Mức testosterone của nhóm mô hình thấp hơn đáng kể so với nhóm đối chứng (P<0.01). the="" testosterone="" levels="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" were="" (7.55±1.21)="" and="" (10.35±0.94)="" nmol·l-1.="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" low="" and="" high-dose="" groups="" of="" cistanche="" cistanche="" ethanol="" glycosides="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05 or=""><0.01). the="" testosterone="" level="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="">CistancheNhóm liều cao cistanche phenethyl glycoside cao hơn đáng kể so với nhóm dùng liều thấp (P<>
2.3 Hình thái tinh hoàn chuột ở từng nhóm
Quan sát bằng kính hiển vi ánh sáng, các ống sinh tinh trong tinh hoàn của nhóm bình thường được sắp xếp dày đặc, mức độ và số lượng tế bào mầm lớn, biểu mô bán lá xếp gọn gàng, các ống bán lá kim đều có hình thành tinh trùng. Ở nhóm mô hình, các ống sinh tinh trong tinh hoàn của chuột bị teo và thoái hóa, biểu mô nửa lá kim mỏng đi đáng kể, số lượng lớp biểu mô giảm, sự sắp xếp bị rối loạn và số lượng tinh trùng trong thể hang bị giảm. So với nhóm mô hình, liều thấp củaCistanche phenethyl alcohol glycoside.
Trong nhóm, số lượng lớp biểu mô của các ống bán lá kim tăng lên, sự sắp xếp của các biểu mô đều đặn hơn, và sự tổn thương của các ống bán lá kim được cải thiện rõ ràng; cấu trúc của ống bán lá kim ở liều caoCistanche phenylethanoid glycosidenhóm cải thiện đáng kể hơn, và số lượng và số lượng các lớp biểu mô bán lá kim tăng lên đáng kể. Sắp xếp gọn gàng, có tinh trùng trưởng thành trong các ống sinh tinh, cấu trúc cơ bản trở lại bình thường. Xem Hình 1 (Hình 6).
3 Thảo luận
Cyclophosphamide là một loại thuốc chống khối u và ức chế miễn dịch thường được sử dụng, chủ yếu can thiệp vào một loạt các chức năng sinh học nội bào thông qua quá trình alkyl hóa DNA. Độc tính đối với khả năng sinh sản là một trong những tác dụng phụ chính của cyclophosphamide [3], dễ dẫn đến tổn thương DNA của tinh trùng và sự phát triển bất thường của tinh trùng. Các nghiên cứu lâm sàng [10-11] chỉ ra rằng độc tính sinh sản của cyclophosphamide có thể gây ra azoospermia hoặc oligospermia. , Dẫn đến vô sinh hoặc xuất hiện các khiếm khuyết hoặc dị tật di truyền ở thế hệ con cái.
Cistanche tubulosalà một loài thực vật ký sinh cao hơn lâu năm trong họ Leiden. Nó là một vị thuốc bắc nổi tiếng có tác dụng bổ thận tráng dương, dưỡng huyết, bổ ruột. Nó là một loại thuốc theo toa thường được sử dụng để điều trị truyền thống của rối loạn chức năng sinh sản nam [12].Phenylethanoid glycosidelà một trong những thành phần hoạt động quan trọng nhất củaCistanche[13] và có một loạt các tác dụng dược lý, chẳng hạn như chống oxy hóa, chống lão hóa và chống khối u [14].
Trong nghiên cứu này, cyclophosphamide được sử dụng để điều chế mô hình chuột bị rối loạn sinh tinh, và tác dụng điều trị của Cistanche phenylethanoid glycoside đối với rối loạn sinh tinh do cyclophosphamide đã được nghiên cứu. Kết quả cho thấy so với nhóm bình thường, mật độ tinh trùng của nhóm mô hình giảm, tỷ lệ sống giảm, tỷ lệ dị dạng tăng. So với nhóm mẫu, tất cả các nhóm liều của Cistanche phenoxyethanol glycoside có hiệu quả làm tăng mật độ tinh trùng, tăng cường khả năng vận động của tinh trùng và giảm tỷ lệ dị dạng tinh trùng. Các kết quả trên chỉ ra rằng glycoside cistanche phenoxyethanol có thể thúc đẩy quá trình sinh tinh và bảo vệ tinh hoàn bị tổn thương. Kết quả kiểm tra hình thái tinh hoàn cho thấy sau khi điều trị bằngCistanche phenylethanoid glycoside, số lượng biểu mô bán lá kim trong tinh hoàn của chuột mô hình tăng lên đáng kể, các lớp phân biệt rõ ràng, các tế bào sinh tinh được sắp xếp gọn gàng, chặt chẽ và đều đặn và có thể nhìn thấy tinh trùng trong lòngCistanche phenylethanoidcó thể thay đổi Shanhe phục hồi cấu trúc và hình thái của biểu mô bán lá kim sau tổn thương sinh sản.
Testosterone điều hòa sự biệt hóa của tế bào mầm đực và là điều kiện cần thiết cho sự phát triển bình thường của tinh hoàn và sự xuất hiện bình thường của tinh trùng. Một số nghiên cứu [15] báo cáo rằng sự loại bỏ có chọn lọc các thụ thể androgen trong tế bào Sertoli của tinh hoàn gây ra rối loạn phát triển tinh trùng và bất dục nam. Trong nghiên cứu này, cyclophosphamide được sử dụng để sản xuất tinh trùng.
Sau mô hình chấn thương chướng ngại vật, mức testosterone trong mô tinh hoàn của chuột thấp hơn đáng kể so với nhóm bình thường. Sau khi tác dụng của Cistanche phenylethanoid glycoside, nồng độ testosterone trong mỗi nhóm liều tăng lên, và mức testosterone ở nhóm dùng liều cao cao hơn đáng kể so với nhóm dùng liều thấp. Người ta cho rằng các glycoside cistanche phenoxyethanol có thể thúc đẩy quá trình sinh tinh bằng cách tăng mức testosterone trong mô tinh hoàn để điều trị rối loạn chức năng sinh tinh, nhưng cơ chế ảnh hưởng của nó đối với testosterone cần được nghiên cứu và thảo luận thêm.
Testosterone điều hòa sự biệt hóa của tế bào mầm đực và là điều kiện cần thiết cho sự phát triển bình thường của tinh hoàn và sự xuất hiện bình thường của tinh trùng. Một số nghiên cứu [15] báo cáo rằng sự loại bỏ có chọn lọc các thụ thể androgen trong tế bào Sertoli của tinh hoàn gây ra rối loạn phát triển tinh trùng và bất dục nam. Trong nghiên cứu này, cyclophosphamide được sử dụng để sản xuất tinh trùng.
Sau mô hình chấn thương chướng ngại vật, mức testosterone trong mô tinh hoàn của chuột thấp hơn đáng kể so với nhóm bình thường. Sau hành động củaCistanche phenylethanoid glycoside, nồng độ testosterone trong mỗi nhóm liều tăng lên, và mức testosterone ở nhóm dùng liều cao cao hơn đáng kể so với nhóm dùng liều thấp. Người ta cho rằng các glycoside cistanche phenoxyethanol có thể thúc đẩy quá trình sinh tinh bằng cách tăng mức testosterone trong mô tinh hoàn để điều trị rối loạn chức năng sinh tinh, nhưng cơ chế ảnh hưởng của nó đối với testosterone cần được nghiên cứu và thảo luận thêm.
[người giới thiệu]
[1] Wang Yixin, Zheng Jufen. Tiến bộ mới trong nghiên cứu vô sinh nam [J]. Tạp chí Andrology Trung Quốc, 2006, 12 (9): 771-774.
[2] Xie Jianxing, Wang Jun, Chen Ming, et al. Ảnh hưởng của viên nang Guilingji trên chuột mẫu mắc bệnh Oligospermia. Vai trò sản xuất tinh trùng và tác động đến hormone sinh dục [J]. Tạp chí Đại học Y Dược Cổ truyền Trung Quốc Quảng Châu, 2011, 28 (6): 621-623.
[3] Zhang Changcheng, Jia Liangliang, Li Shouchao, et al. Epimedium tổng số flavonoid gây ra việc giảm thiểu cyclophosphamide Nghiên cứu về tác dụng bảo vệ của hàng rào tinh trùng do chuột sinh ra [J]. Bằng sáng chế y học Trung Quốc, 2010, 32 (12): 2052-2055.
[4] Xu Lei, Wang Rui, Zhang Weixing, et al. Hạt Shengjing trên Suy giảm tinh trùng do Cyclophosphamide gây ra Cản trở hiệu quả điều trị của chuột [J]. Tạp chí của Đại học Trịnh Châu: Ấn bản Khoa học Y tế, 2008, 43 (2): 267-270.
[5] Wang Rui, Xu Lei, Zhang Weixing, et al. Tác dụng của Shengjing Granules của Trung y đối với chuột bị suy giảm khả năng sinh tinh Nghiên cứu thực nghiệm về tác dụng điều trị [J]. Tạp chí Andrology Trung Quốc, 2008, 14 (11): 1046-1049.
[6] Guo Kaihua, Gao Fulu, Niu Siyun, et al. Ảnh hưởng của Heshouwu Decoction lên mô tinh hoàn của chuột lão hóa Ảnh hưởng của con đường dẫn truyền tín hiệu tế bào Rb / p53 [J]. Tạp chí Giải phẫu, 2010, 41 (3): 435-439.
[7] Wu Haihong, Xuan Guodong, Liu Chunquan. Hiệu quả của quá trình chiết xuất hồi lưu của Cistanche Phenylethanol Glucoside với nghiên cứu Yếu tố Ethanol [J]. Khoa học Nông nghiệp Giang Tô, 2009 (1): 250-251.
[8] Li Gang, Zhu Wenbin, Niu Fei, et al. Ảnh hưởng của Cistanche Phenylethanol Glucoside trên tinh trùng chuột Nghiên cứu về tác dụng bảo vệ khỏi tác hại của quá trình oxy hóa bên ngoài [J]. Y học cổ truyền Trung Quốc và Materia Medica Lishizhen, 2010, 21 (9): 2205-2207.
[9] Chen Deyu, Liu Limin, Xie Qingdong, v.v ... Kháng thể chống tinh dịch đối với chức năng ti thể của tinh trùng Tác động của [J]. Tạp chí Cao đẳng Y tế Đại học Sán Đầu, 2008, 21 (1): 4-6.
[10] KenneyLB, Laufer MR, Grant FD, etal. Nguy cơ cao về thông tin Highdoseccyclophaphamiddeforsarcomaduringchildhood [J] .Cancer, 2001, 91 (3): 613-621.
[11] JahunkainenK, EhmckeJ, Houm, etal. Sự suy giảm chức năng tinh hoàn. BestPrect ResClinEndocrinol Metab, 2011, 25: 287-302.
[12] Gao Zhanyou, Zhou Haitao, Lin Qiang. Khả năng của Cistanche để chống lại sự mệt mỏi khi tập thể dục ở chuột Và ảnh hưởng của các gốc tự do trong não [J]. Khoa học Nông nghiệp An Huy, 2011, 39 (16): 9592-9595.
[13] Ren Lu, Gu Xiaohong, Tang Jian, et al. Phenylethanol glycoside trong nghiên cứu chiết xuất và tinh chế Cistanche cistanche trồng [D]. Vô Tích: Đại học Giang Nam, 2006, 25 (3): 33-36. [14] Jinghui, Zuo Jianfeng, Li Jiaoshe. Những tiến bộ trong nghiên cứu dược lý của phenoxyethanol glycoside Triển lãm [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica, 2006, 17 (3): 440-441.
[15] ChangC, ChenYT, YehSD, etal. Infomedia mùa xuân TheandrogenreceptorinSertolicells [J]. ProcNatlAcadSci Hoa Kỳ, 2004, 101 (18): 6876-6881.
